* Isotope-Room, K01-YO Geηeral HosptÏal A total of. 610 sera (Male 415, Female 195) collected from vaccinated medi-screeners were tested for the imit)une response to Hepavax-B vaccine by radio-immunoassay (RIA) during the period between Jan 6th and Jun 30th, 1986. The solid phase radioimmunoassay kit for detection of HBs Ag (Connaugh Lab.), the solid phase radioimmunoassay kit for detection of anti-hbs (Connaught Lab.), and CORAB kit for detection of anti-hbc (Abbott Lab.) were used in this study. The results are as follows: 1. The highest rate of age groups in vaccinated medi-screeners was that of 31f'J35 age group marking 29.5% and followed by 41 f'j45 (24. 1 %) 36f'J40 (20.0%), 46f'J50 (10.2%), above 50 (9.8%), 26f'J30 (4.4%), 21",25 (1. 2%) and below 20 (0.8%) indicated the lowest rate of all. 2. The production of protective antibody(anti-hbs) from 610 sera of vaccinated medi-screeners was appeared in 69.9% (426/610 cases, 69. 7% in male and 70. 3% in female). The difference of anti-hbs production between male and female was statistically not significant. 3. The positive rates of protective antibody(anti-hbs) after lst, 2nd and/or 3rd immunization were showed in 59.5% (50/84), 59.5% (110/185) and 78.0% (266/341) respectively. The positive rate of anti-hbs after the 3rd immunization was higher than that after 1st and 2nd immunization. (P <0. (05) 4. The vaccinees that are appeared negative phase in immune response were 115 cases (18.8 %) from 610 cases, and the vaccinees that are appeared temperary antigenemia were 11 cases (1. 8%) from all. =Abstract= Oh, Jae-Se., Kim, Kyung-Chul* Dept. 0/ Cli η ical Pathology, Won Kwang Public Health Junior College Immune Response to Hepatitis B Vaccine in Healthy Medi-Screeners u 철 켜 김 고려병원동위원소설 원광보건전문대학임상병리과 오재세 검진자에있어서 B 형간염백신에대한면역응랍 대한임상병리사회지 : 제 18 권제 1 호 1986
플수거하여 B 형간염 virus 의표지자인 HBs Ag, 1. 서론 anti-hbs 와 anti-hbc 에대하여 radioimmunoassay 법 에의해서검사를실시하여면역응답즉방어향체의 1965 년미국유전학자인 Blumberg l) 은다수혈혈우병생성에대하여조사연구하었기에보고히는바이다. 환자의혈청이 Australia원주민의혈청과 Ouchterlony 2원확산법에의해서단일침강대가형성되는것을발견 II. 실험재료및방법 하고그원주민의혈청에있는항원을 Australia 항원 (HBs Ag) 이라보고한것이 B형간염 Virus(HBV) 의최초의발견이었다. 그후 Prince 등 (1 968)2) 에의해서 B 형간염 Virus 에는표지자들 (markers) 이존재함을시사한이래 Bayer 등 (1 968)3) 에의해서 B형간염 Virus 의표면향원표지자인 HBs Ag 이밝혀졌고, HBV의핵표지자인 HBc Ag 은 Almeida 등 (1 971)4) 에의해서그리고 HBe Ag 표지자는 Magnius 둥 (1 972)5) 에의해서 1986 년 1 월 6 일부터 6 월 30 일까지서울에소재하고 있는 G 종합병원에서건강진단수검자중 hepavax-b vaccine( 비동화 HBs Ag 20 μg, Aluminium hydroxide 0.5mg, Thimerosal 0.01 %(w jv) 함유 ) 을 1 차, 2 차흑 은 3 차접종받은수검자 610 명 ( 남자 415 명, 여자 195 명 ) 의혈액약 5ml 를 - 채혈하여무균적으로혈청을분 리하여방사면역측정법 (radioimmunoassay) 에의하여 밝혀졌으며이 3 개의표지자들에대응하는각각의항 체들 anti-hbs, anti-hbc 그리고 anti-hbe 도 HBV 의 표지자들 6, 7) 로알려져있으며 HBV의캄염여부를밝혀 낼수있는지표로이용되고있다. 특히 HBs Ag 에대 응하는항체인 anti-hbs 만이방어키능이있는것으 로밝혀졌다. 선진국국민의 HBsAg 보유율은 0.1 내 지 2.9%8) 인데반해서우려국민의 HBs Ag 보유율은 학자들에의한보고에따르면차이는있으나 5.3% 내 지 14 % 9, 10, 11, 12) 로세계에서가장높은것으로일려졌 다. 한국인의급성간염, 만성활동성간염, 칸경변증및 간셰포암의약 90% 가 HBV 의 강염과관련이있는것 으로알려져있어 13) 한국인은 HBV 의감염에감수성 이높은것으로사료된다. 질시하였다. 그래서우리나라의보건당국도국민건강에위협이되 HBs: Ag, anti-hbs 와 anti-hbc 에대하여컴사하었다. HBs Ag 검사를위한시약 Kit 는 Solid phase radioimmunoassay Kit for detection of hepatitis B surface antigen(connaught Lab 제품 ) 을사용하었고, anti-hbs 컴시를위한시약 Kit 는 Solid phase radioimmunoassay Kit for detection of antibody to hepatitis B surface antigen(connaught Lab 제품 ) 을그리고 anti-hbc 캠사를위한시약 Kit 는 CORAB: radio immunoassay Kit for the detection of antibody to hepatitis B core antigen(abbott Lab 제품 ) 을사용하여그들의사용법을 엄격히준수하여컴사하였다. 모든검사는 gamma scintillation"'icounter, ANSR (Abbott 제품 ) 을 사용하여 고있는 B 형 간염의예방과퇴치에지대한관심을가 지고능동적으로대처해나가고있는질정이다. 1971 년 Krugman등 14) 은 HBV 함유혈청을열 처리후인체 에 능동면역을실시하여 Vaccine 접종자의 69% 에서 예방효과를얻었고, 만성 Virus 보유자의발생도감소 시킬수있었다고보고한것이능동면역의효시가되어 각국에서는 B 형 간엽의예방과퇴치를위하여 Vaccine 을개발하는데박차를 가해 B 형 간염을 예방하는데 주력하고있다. 우리나라도외국에서개발한 vaccine을수입하여 B 형 간염예방에주력하고있는가운데국내에서도 19 84 년녹십자사가개말발매하고있는 hepavax-b(b형 간염 vaccine) 으로많은 국민이보건 당국의홍보에 m. 실험성적 1. Vaccine접종자의연령분포 Table 1 에서 vaccine 접종자의연령분포를살펴보면총 610 명중 31"-'35세군이 180 명 (29.5%) 로써가장많았고, 그다음이 41"-'45세군으로 147 명 (24.1%), 36"-' 40세군이 122 명 (20.0%), 46 rv 50세군이 62 명 (10.2%), 50세이상군이 60 명 (9.8%), 26 rv 30세군이 27 명 (4.4%), 21rv25세군이 7 명 (1.2%), 20세미만군이 5 명 (0.8%) 의순이었다. 사회적인활동이가장활발한 30대에서 50 대가 93.6% 인 571 명으로써대부분을점유하고있었다. 2. 성별간의면역응답 의하여 B 형간염에대한관심이높아짐에따라예방 Table 2 에서 살펴보면조사대상자총 610 명중남자 접종을실시하게되었다. 저자등은 G 종합병원에서수겸하는건강진단수검자 들중 hepavax-b vaccine 을접종한수검자의혈액겸체 는 415명으로 68.0% 를, 여자는 195명으로 32.0% 를점유하였다. 남자접종자 415명중면역이이루어져서방어항체인 anti-hbs의생성지-(-+-, -++) 는 2 -
_ Table 1. Age Distribution of the Vaccinees and Immune Response to Hepatitis B Vaccine Age group _ 기 Results of HBs Ag, anti-hbs, anti-hbc Total 내 + 十 十 L No. C/0/ ------------ ----- --_---- ~------ - ---_._- i - ι-~--- - _--- --- a -_----- -_-- _. <20 ο 21'"'-'25 J,., 0 0 5 0.8 1 2 0 7 1. 2 26""30 6 10 9 27 4.4 31"-'35 41 81 16 Q t1fl? 5 180 29.5 36"-'40 42 50 7 22 122 20.0 41""45 32 72 15 27 147 24. 1 46 rv 50 16 27 8 11 0 62 10.2 50< 4 36 10 8 2 60 9.8 ----~- _._ -,-~-- - ----_._----------- _---_- -------- >-_---- ------ ------- Total 145 281 58 11 100 115 610 Table 2. Immune Résponse to the Inoculation of Hepatitis B Vaccine by Sex :f\1arkers Male Female Total HBs Ag, anti-hbs, anti-hbc No. + +1 + + + + No. % No. c 87 21. 0 58 202 48.7 79 47 11. 3 11 74 17.8 41 5 1. 2 6 / /0 29.8 145 23.8 40.5 281 46. 1 5.6 58 9.5 21. 0 115 18.8 3. 1 11 1. 8,. 0 TotaI 415 100 195 --------------------- - 1 썩 100 610 100 289 명으로 69.7% 블나타내었으며, 과거지연감염으로 인하여 anti-hbc 만생성된자는 47 명으로 11. 3% 이었으 며, 면역반응에서음성기릅나타내는면역불응탑자는 74 명고로 17.8% 이었 며일시적 antigenemia 를일으 킨자는 5 명으로써 1. 2% 듭나타내었다. 그리고여자 접종자 195 명중방어항체인 anti-hbs 의생성자는 137 명으로 70.3% 릎나타내었으며, 이전의자연감염으로 생각되는 anti-hbc 생성자는 11 명으로 5.6% 블면역반 응에서음성기로생각되는띤역불응답자는 41 명으로 21.0% 를., 그리고일시적인 antigenemia 를 - 나다낸자 는 6 명으로 3.1% 를각각나타내었다. 전체적으로는완전히떤역이이루어진 anti-hbs 생성 자는 426 명으로 69.9% 를나타냈으며 vaccine 의자극 에의하여이전에지 - 연감염이었을것으로생각되는 anti-hbc 생성자는 58 맹으로 9.5% 를, 면역반응에서음 성기로생각되는면역불응답자는 115명으투 18.8% 를그리고일시적인 antigenemia 를나타낸자는 11 명으로 1. 8% 릎나타내었다. 3. 접종회수에의한면역응답 Table 3 에서살펴보면방어항체인 anti-hbs 생성자 는 1 차 vaccine 접종자 84 명중 50 명으로 59.5%, 2 차 접종자 185 명중 110 명으로 59.5%, 그리고 3 차접종자 341 명중 266 명으로 78.0% 칠 - 나다내었다. 이전의자연 감염 로생각되며 vaccine 자극에의한 anti-hbc 생성 자는 1 차접종자는 14.3% (1 2/84 명 ), 2 차접종지는 14. 6%(27/185 명 ) 그리고 3 차접종자는 5.6% (1 9/341 명 ) 를나타내었고, 면역불응답자는 1 차접종자에서 21. 4% (1 8/84 명 ), 2 차에서 24.3%(45 /1 85 명 ) 그리고 3 차에서 15.2%(52/341 명 ) 이었다. 일시적인 antigenemia 를일 으킨자는 1 차접종자에서 4.8%(4/84 명 ), 2 차에서 1.6 %(3/185 명 ) 그리고 3 차에서 1. 2%(4/341 명 ) 를나타내 었다. Vaccine 접종회수에의한방어항체 (anti-hbs) 의 생성은 1 차와 2 차접종간에는유의한차이룹볼수없 었으나 3 차접종에의한방어헝 - 체의생성은유의한차 이를 - 나타내었다 (P<0.005). 3
Table 3. Imrmme Responses to 1st, 2nd and 3rd Injection of Hepatitis B Vaccine Vaccination }larkers Total 1st 2nd 3rd HBs Ag, anti-hbs, anti-hbc No. % No. % No. 0//0 No. l/o L 9 10.7 28 15.2 108 31. 7 145 23.8 41 48.8 82 44.3 158 46.3 281 46. 1 12 14.3 27 14.6 19 5.6 58 9. 5 18 21. 4 45 24.3 52 15.2 115 18.8 f -+- 4 4.8 3 1. 6 4 1. 2 11 1. 8 Total 84 100 185 100 341 100 610 100 IV. 고차르개발된 hepavax-b vaccine 으로실시한인체임상실험 에서서등 16) 은 0, 1, 그리고 6 월에 20μg 의 HBs Ag 함 유 hepavax-b vaccine 을자원공혈자에접종한결과 우리나라는 B 형간염 (HBV) 의발생율이높을뿐만 7 월째에 96% 에서고역가의 anti-hbs 항체가생성펀었 아니라모든국면이 E 형간염의위험이높은환경에 서생활하고있으므로 HBV 표지자의출현율이낮은 구라파나북미국가에서처럼 HBV 표지자의출현율이 높은집단에한하여 hepatitis B vaccine 을접종하는것 은무의미하며모든비감염국민이 B 형간염 vaccine 을접종하여야한다고이 15) 는주장하였다. 1971 년 Krugman 등 14) 에의하여 HBV 블함유한혈청을가열하 여인체에능동면역을실시하여예방효과가있었음을 보고한이래우리나라에서도 B 형간염 vaccine 의개발 을서둘러 1983 년녹십자사가 hepavax-b vaccine7~ 말 에성공을거두어외국 vaccines(merk Sharp and Dome(MSD) vaccine 과 Pasteur vaccine 등 ) 에비하여 저렴한가격으로공급하게되어많은국민이면역첩종 을받게되었다. 또한제일제당에서도 hepaccine-b vaccine 을개발하여시판하게되므로써더많은국민 이예땅접종을질시하게될것으로사료된다. 1979 낌 17) 은자신이개발한 vaccine 정종으로 7.8% 에서만 HBs Ag 말현율을볼수있어서 B 형간염을현저하게줄일 수있다고하였고, Gerety 등 18) 은 O. 1 내지 1. 0μg 의 HBs Ag 을 guinea pig 에주사하여 50% 에서 anti-hbs 의생성을나타내었는데 vaccine 을 90 초간끓이거나 60 0 C 에 10 시간가옐하면 HBs Ag 의항원성이감소된 다고보고하였다. H i11 eman 등 19) 은 HBs Ag 이 10, 20 혹은 40μg 함유한각 vaccine 으로 3 회투여후항체 (anti-hbs) 의출현율에별차이가없었으며, 20μg 의 HBs Ag 함유 vaccine 을 0, 1, 6 월에 3 회투여한 7 개월 에 vaccine 접종자의 96% 에서 anti-hbs 가생성되었다 고보고한바있다. 녹십자사낌경호박사에의해서 4 - 다고보고하였다. 션등 9) 은녹십자사제품인 hepavax-b(lot No. AL- 80(1) 를건강인에게 3 회 (0, 1, 6 월 ) 투여한결과면역항 체의생성율은 1 개월에 46.6%, 2개월에 52.0%, 4 개월에 74.0%, 6개월에 80%, 8개월에 90.5% 로써면역 항체의생성효과가우수하다고하었다. 킴등 13) 은제일 제당에서개발한 hepaccin B vaccine 을 1 개월간격으 로 3 회건강한자원자에게접종하고 5 개월간관찰한연 역성연구에서접종후 1 개월에 34.9%, 2 차점종후에 69.0%, 3 차점종후 85.4% 그리고 1 차접종후 4 혹은 5 개월후에는 94.7% 에서방어항체의생성을나타내었 다고보고하였다. 정등 20) 은제일제당의개발품인 hep accine-b (HBs Ag 3μg 함유 ) vaccine 을자원차에게 1 회접종후 3 개월만에점종자의 80% 에서 anti-hbs 생성 이나타났다고보고하였다. 서외 - 배 21) 는제일제당제품 인 hepaccine-b vaccine 을 1 개월간격으로 3 회접종후 1, 2, 3, 및 5 개월에항체생성율을조사하였던바 1 개월 에 33.3%, 2 개월에 66.7%, 3 개월에 90.9%, 5 개월에 97% 를나타내었다고보고하였다. 저자등은녹십자사가개발한 hepavax-b vaccine 접 종자 610 명 ( 남자 415 명, 여자 195 명 ) 중 1 차접종자 84 명 (13.9%), 2 차정종자 185 명 (29.9%) 및 3 차접종자 341 명 (56.2%) 에대한면역응답즉방어항체 (anti-hbs 의생성에대하여조사연구하였던바 1 차접종자의 59. 5%(50/84 명 ), 2 차접종자의 59.5% (1 10 /1 85 명 ), 그리 고 3 차접종자의 78.0% 에서방어항체의생성율을나 타내었다. 1 차와 2 차접종자사이에서는유의한차이 를볼수없었으나, 3 차정종자의면역항체생성율은 1
차나 2 차에비하여유의한차이를나타내있다 (P<O.O 05). 저자등의조사결과와이전에발표한보고자들의 켈과블비교하여보면 1 차접종으로면역항체의양전율 은 59.5% 로써선등 20) 의 46.6%, 김등 13) 의 34.9% 및 서등 22) 의 33.3% 보다높았으며 2 차접종에의한양전 율은 59.5% 로써김등 13) 의 69.0% 나서등 22) 의 66.7% 보다낮았으며, 3 차접종에의한양전율은 78.0% 로써 서등 16) 의 96%, 션등 20) 의 90.5%, 검등 13) 의 85.4% 그 리고서등 22) 의 90.9% 보다현저하게낮게나다났다. 그리고낌등 13) 의실험결과에의하면여자의혈청 anti-hbs 양전율이남자의것보다높았다고하였으나저 자등의조사결과에의하띤남녀성별간에차이나, 연 령군간에유의한차이를볼수없었다. 음성기로생각되는떤역불응답자둡 (---) 도시간 의흐릎에따라혹은추가면역으로면역항체가생성될 것으로믿어지묘로이조사에서나타난면역항체의양 전융 78.0% 보다더높아질것으로보았을때 B 형간염 의고위험지역으로알려진우리나라에서는 B 형간염에 폭로되지않은국민들이계속적으로 3 회씩 vaccine 을 정종받으면 B 형간염의전파를예방할수있게될것 이며 B 형간염 virus 의감염율도선진국의수준으로 캄소시킬수있을것으로기대해본다. V. 결론 1986 년 1 월 6 일부터 6 월 30 일까지 hepavax-b vaccine 을 1 차 2 차, 혹은 3 차접종한검진자 610 명 ( 남자 415 명, 여자 195 명 ) 의혈청을수집하여방사면역측정 법 (RIA) 에의해서 HBs Ag, anti-hbs, 와 anti-hbc 에 대하여조사연구하였다. vaccine 정종자 610 명에대하 여면역항체생성융즉면역응답에대하여조사하였던 바다음과같은결과를얻었다. 1. Vaccine 접종자의연령분포 (Table 1) 는총 610 명 중 31 rv 35 세군이 180 명 (29. 5%)~ 로써가장많않고그 다음은 41 rv 45 세군이 147 명 (24. 1 %), 36 rv 40 세군이 122 병 (20.0~~), 46 rv 50 세군이 62 명 (10.2%), 50 세이상군 이 60 명 (9.8%), 26 rv 30 세군이 27 명 (4.4%), 21 rv 25 세 군이 7 명 (1. 2%), 20 세미만군이 5 명 (0.8%) 의순이었 다. 사회적활동이가장활발한 30 대에서 50 대가 571 명 (93. 6%)~ 로대부분을차지하였다. 그리고연령별 변역항체의생성율간에는유의한차이가없었다 (Table 1). 2. 남녀성별간의면역응답을상펴보면남자 vaccine 접종자 415 명중방어항체인 a, nti-hbs 생성자는 289 명으 로 69.7% 를나타내었으며여자첩종자 195 명중방어 항체생성자는 137 명으로 70.3% 를나타내었다. 남여 간에방어항체의생성율은유의한차이를볼수없었 다 (TabIe 2). 3. Vaccine 접종회수에따르는방어항체의생성율 을살펴보면 1 차접종자 84 명중 50 명으로 59.5%, 2 차 접종자 185 명중 110 명으로 59.5% 그리고 3 차. 접종자 341 명중 266 명으로 78.0% 에서방어항체 (anti-hbs) 가 생성되었다. 따라서 1 차나 2 차접종에의해서는방어 항체생성에별차이블나타내지않았으나 3 차접종에 의한방어항체생성은 1 차와 2 차접종에의한것보다 유의힌 - 차이를나타내었다 (P<0.005). 4. Hepavax-B vaccine 의접종에의하여음성기릎 나타내는면역불응탑자는 18.8% (1 15/610 명 ) 이었으며. 일시적인 antigenemia 블나타낸정종지 - 는 1.8% (11/ 610 병 ) 이었다. 참고문헌 1. Blumberg, B.S., Alter, H.]. and Visnich, S.: A I\ew antigen in leukemia sera. ]AMA,191 : 541, 1965. 2. Prince, A.M.: An antigen detected in the bolld during the incubation period of serum hepatitis. Proc. NatI. Acad. Sci., 50 : 814, 1968. 3. Bayer, M.E., Blumberg, B.S. and Werner, B.: Particles associated with A ustraiia antigen in the sera of patients with leukemia, Downs' syndrome and hepatitis. Nature, 28 : 1057, 1968. 4. AImeida, ].D., Rubenstein, D. and Stott, E.].: New antigen-antibody system in Australia-antigen-posit:ve hepatitis. Lancet, 2: 1225, 1971. 5. Magnius, L.O. and Espmark, A.:A new antigen compiex co-occurring with Australia antigen. Acta Pathol. Microb. Scand. Sec. B, 80 : 335, 1972. 6. Ling, C.M., Mushahwar, I.K. and Overby,K.R.: Hepatitis antigen and its correlation with other serologicai markers in chimpanzees. Intest.Imm unoi., 24: 352, 1979. 7. Mushahwar, I.K., Dienstag, ].L. and Polesky, H.F.: Interpretation of various serological profiles of hepatitis B viral infection. Am. ]. Clin. Pathol., 76 : 773, 1981. 8. 鄭煥國, 바이러스性府淡과 Hepatitis-asscciated antigen, 韓國醫科學, 4: 6, 356, 1972. - 5
9. 션회식, 정환국, 신광순, 검경호 :B 형간염백산 의면역반응. Asian Pacific Assoc. for the study of the Iiver, Scientific meeting (84. 1. 12"-'1. 14, Bangkok ThaiIand), 1984. 10. 文希柱, 尹基股, 金景熙, 李長薰 : 韓國 A 의府씻 B Virus 抗原 (HBs Ag) 陽性率에對한調훌. 大韓 臨皮病理士會誌, 11: 1, 57, 1979. 11. 吳在世, 朴昌鳳 : 韓國供血者의府씻 B Virus 表面 抗原 (HBs Ag) 陽性率에對한調흉. 理士會誌 14 : 1, 46, 1982. 大韓臨 * 病 12. 吳在世 : 韓國家族의 HBs Ag 와 Anti-HBs 의陽 d 生 率에關한調효. 대한엄상병리사회지 : 제 15 쉰제 1 호 1983. 13. 김순호, 손한첨, 문한규 :B 형간염백신의임상효 과에관한연구. 대한소화기병학회치, 17: 211, 1985. 14. Krugman, S., Giles, ].P. and Hammond, ].: Viral hepatitis type B (MS-2 strain): Studies on active immunization. ].K.M.A., 217: 41, 1971. 15. 이창홍 :B 형바이러스간염의예방. 소아과, 26: 15, 1983. 16. 서동진, 김진호, 최중호, 신광순, 김경호 :B 행간 염백신의임상효과. 대한의학회잡지, 92: 863, 1983. 17. 낌청룡 :B 型府꽃 Vaccine 에관한연구 - 精製땀 씻 B 表面抗原을利用한 B 型 R 꾸씻의據防. 의학협회지, 22: 1013"-'1025, 1979. 대한 18. Gerety, R.]., Tabor, E., PurceIl, R.H. and Tye ryar, F.].: Summary of International Workshop on Hepatitis B Vaccines. ]. Infect. Dis., 140: 642,,-,648, 1979. 19. HiIIeman, M.R., Buynak, E. B., McAleer, W.]. and McLean, A.A.: HumanHepatitis B Vaccine, in Proceedings of the European Symposium on Hepatitis B", Krugman, S.and SherIock,S.(Eds), Rahway, New ]ersey, Merck Sharp and Dohme International, pp. 120,,-,139, 1981. 20. 鄭煥國, 宣熙 뽑, 鄭圭源 : 加熱非活動化한 B 型땀 씻 Vaccine 의安定性과免홈性에대한臨皮的觀察 ( 第 1 報 ). 대한의학협회지, 28: 675, 1985. 21. 徐延르, 裵昌煥 :B 型府갖백신의安定性맞免度 性에대한臨皮的考察. 最폈 醫學, 28: 813, 1985. - 6 -