untitled

354 Jae-Jung Kim. Frequency and Distribution of Unexpected Antibody ORIGINAL ARTICLE Korean J Clin Lab Sci. 2018;50(3):354-358 https://doi.org/10.15324/kjcls.2018.50.3.354 pissn 1738-3544 eissn 2288-1662 Frequencies and Distributions of Unexpected Antibodies at a General Hospital in the Daejeon of Korea Jae-Jung Kim Department of Laboratory Medicine, St. Mary s Hospital, Daejeon Catholic University, Daejeon, Korea 대전지역일개종합병원에서의비예기항체발생현황과분포 김재중 가톨릭대학교대전성모병원진단검사의학과 When preparing for a blood transfusion, the presence and types of unexpected antibodies should be identified through screening tests. Using the DiaMed-ID system, antibody identification among unexpected antibody screening tests performed at a university hospital in Daejeon area for two years from January 2016 to December 2017 were limited to 55 patients and were predominantly women. A total of 36 patients (65.5%) belonged to the Rh group, 7 (12.7%) patients to the Lewis group, 4 (7.3%) patients to the Kidd and Duffy groups, 3 patients (5.5%) to the MNS group, and 1 (1.8%) to the Rh+Kidd combined group. In the Rh group, 19 (34.5%) patients had Anti-E single antibody, 5 (9.1%) patients had Anti-D single antibody, 4 (7.3%) patients had Anti-E/-c, 4 (7.3%) patients had Anti-C/-e, and 1 (1.8%) patient had Anti-E/-c/-Jk b. In the Lewis group, three (5.5%) patients had both Anti-Le a and Anti-Le b. In the Kidd group, one (1.8%) patient had Anti-Jk a and three (5.5%) patients had Anti-Jk b. In the Duffy and MNS groups, only single antibody was found: one (1.8%) patient with Anti-Fy a, three (5.5%) patients with Anti-Fy b, two (3.6%) patients with Anti-M, and one (1.8%) patient with Anti-S. This study reflects the recent frequencies and distributions of unexpected antibodies in Daejeon, which would be helpful for the efficient preparation for transfusions. Key words: Anti-E antibody, Anti-Le a /-Le b antibody, Anti-E/-c/-Jk b antibody, Preparation for blood transfusion, Unexpected antibody Corresponding author: Jae-Jung Kim Department of Laboratory Medicine, St. Mary s Hospital, Daejeon Catholic University, 64 Daeheung-ro, Jung-gu, Daejeon 34943, Korea Tel: 82-42-220-9615 Fax: 82-42-220-9915 E-mail: leokj2@hanmail.net This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution Non-Commercial License (http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0) which permits unrestricted non-commercial use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited. Copyright 2018 The Korean Society for Clinical Laboratory Science. All rights reserved. Received: May 8, 2018 Revised 1 st : June 1, 2018 Revised 2 nd : June 3, 2018 Revised 3 rd : June 24, 2018 Accepted: June 25, 2018 서론수혈을준비하는과정중에미리비예기항체의종류를알거나동정하는것은안전한수혈과밀접한관계가있다. 비예기항체 (unexpected antibody) 검사는 ABO 혈액형과함께예측되지않는여러원인들에의한수혈부작용발생을예방할수있어서수혈부작용의빈도를감소시킬목적으로필수적으로실시되고있다. 이항체는주로임신이나수혈등에의해다른적혈구 항원에노출됨으로써발생하는면역항체로, ABO 혈액형항체와는달리존재여부를미리예측할수없기때문이다. 그리고해당항원을가진수혈된적혈구를파괴하여급성및지연성용혈성부작용이나신생아용혈성질환등의수혈부작용을유발할수도있기때문이다 [1-3]. 최근국내에서도비예기항체에의한용혈성수혈부작용이다수보고되고있는추세로 [4-7], 대표적으로 Rh항체및 Kidd, Duffy, Kell 항체등이현재알려져있다 [8, 9]. Lee 등 [10] 은다회수혈환자에서 72시간마다검체를새로

Korean J Clin Lab Sci. Vol. 50, No. 3, September 2018 355 채혈하여검사해보거나예민도가높은수혈전검사방법을채택하여수혈부작용발생에대한예방이필요하다고하였다. 그러나연구가이루어진대전지역일개종합병원에서는그동안다회수혈환자에서도종전대로항체선별검사는 1개월마다이루어지고있었고, 임상에서의항체동정검사요청이제대로이루어지지않아동정된항체의종류와특성을제대로파악할수가없었다. 또한이지역의과거연구에서도몇몇자료만있을뿐최근상황을반영한자료는많이부족한실정이었다. 이에수혈부작용을사전에예방하고안전한수혈을진행하고자 2016년 1월부터새롭게비예기항체검사의채혈기간을조정하였다. 수혈예정환자에대해기존의 1개월에서 72시간마다채혈로변경하였고, 항체선별검사에서양성인환자들에대해자체적으로동정검사를실시하였다. 이에지난 2년간의비예기항체검사들을대상으로항체양성률과종류, 그리고빈도및분포현황등을조사하였다. 이러한정보는비예기항체가생성된수혈예정환자들에게동정항체별음성인혈액을수혈가능하게하고, 부작용이의심되지않은혈액제제를준비함으로써효율적이고안전한수혈준비에큰도움이될것이라사료된다. 재료및방법 1. 연구대상기존의 1개월마다채혈방식에서 72시간마다채혈로변경되어검사가이루어진 2016년 1월부터 2017년 12월까지, 중부권일개대학병원에비예기항체선별검사가의뢰된 16,734명중양성으로판독된 81명을대상으로항체동정과분포를분석하였다. 2. 분석방법 1) 비예기항체선별검사비예기항체선별검사는 LISS/Coombs card (DiaMed AG, Cressier, Morat, Switzerland) 와 ID-DiaCell I, II혈구 (DiaMed AG) 를이용하여실시하였다. 검사방법은항체선별혈구 50 L 와환자혈청 25 L를 LISS/Coombs card에각각넣고, DiaMed incubator (DiaMed AG) 에서 37 C로 15분간반응시킨후 ID-Centrifuge (DiaMed AG) 를이용하여 10분간원심분리 (1,000 rpm) 하였다. 결과는제조사의판독법에따라원주의사이에적혈구가분포하는상태에따라서음성과 4+ 사이에약양성과 1+ 에서 3+ 로판독하였다. 2) 비예기항체동정검사항체동정검사는 11가지혈구로구성된동정혈구 ID-DiaPanel set (DiaMed AG) 를사용하여선별검사와같은방법으로실시하였다. 11개의 ID-DiaPanel set의혈구를원주liss/coombs card에각각 50 L씩넣고, 환자혈청 25 L를추가로넣어 DiaMed incubator (DiaMed AG) 에서 37 C로 15분간반응시켰다. 이후 ID-Centrifuge (DiaMed AG) 를이용하여 10분간원심분리 (1,000 rpm) 를실시하였고, 비예기항체선별검사와동일하게결과를판정하였다. 결과 1. 비예기항체양성률 2016년 8,611 검체중 37예 (0.43%), 2017년 8,123 검체중 44예 (0.54%) 가양성으로 2년동안검사의뢰된총 16,734 검체중에서양성검체수는 81예 (0.48%) 이었다. 2016년보다는 2017년에서양성환자가더많이조사되었지만전반적으로낮은양성률을보였고, 남성 (23명, 41.8%) 보다는여성 (32명, 58.2%) 에서더자주검출되었다. 또한 2016년에는 40, 50대가, 2017년에는 60대가더많이검출되는특성을보여주긴했지만, 일반적으로 30대이하 (3명, 5.5%), 40대 (11명, 20.0%), 50대 (18명, 32.7%), 60대이상 (23명, 41.8%) 으로연령이높아지면서많이검출되는특성을보였다 (Table 1). 2. 비예기항체동정빈도및분포 비예기항체양성으로판정된 81예를대상으로항체동정검사를실시한결과 2016년 27예 (33.3%), 2017년 28예 (34.6%) 로총 55예 (67.9%) 에서만항체가동정되어 2년동안연도별차 Table 1. The characteristics of detected unexpected antibodies in Daejeon 2016 2017 2016 2017 No. (%) Antibody Positive 37 44 81 (100.0%) Identified 27 28 55 (67.9%) Unidentified 10 16 26 (32.1%) Gender Male 11 12 23 (41.8%) Female 17 15 32 (58.2%) Age 30 1 2 3 (5.5%) 31 40 6 5 11 (20.0%) 41 59 11 7 18 (32.7%) 60 9 14 23 (41.8%) *Frequencies and distributions of unexpected antibodies at a hospital in Daejeon.

356 Jae-Jung Kim. Frequency and Distribution of Unexpected Antibody 이점은크게없었다. 5예 (6.2%) 는자가항체로동정되었고, 나머지 21예 (25.9%) 는동정되지않았다. 36예 (65.5%) 에서 Rh 계열이가장자주동정되었고, Lewis 계열이 7예 (12.7%), Kidd 계열과 Duffy 계열이각각 4예 (7.3%), MNSs 계열이 3예 (5.5%) 순으로동정되었다. Rh+Kidd 복합항체도 1예 (1.8%) 에서동정되었다. Rh 계열에서는단독항체로 Anti-E가 19예 (34.5%) 에서가장자주동정되었고, Anti-D가 5예 (9.1%) 에서동정되었다. 복합항체로는 Anti-E/-c 3예 (5.5%), Anti-C/-e 4예 (7.3%) 가동정되었고, Kidd 계열과함께 Anti-E/-c/-Jk b 1예 (1.8%) 가동정되었다. Lewis 계열은 Anti-Le a 와 Anti-Le b 가 3예 (5.5%) 에서단독항체로, 그리고 Anti-Le a /-Le b 1예 (1.8%) 에서복항항체로동정되었다. Kidd 계열의 Anti-Jk a 는단독항체로 1예 (1.8%) 에서동정되었지만, Anti-Jk b 는단독항체로 3예 (5.5%), 그리고 Rh 계열과 Anti-E/-c/-Jk b 복합항체로 1예 (1.8%) 에서동정되었다. Duffy 계열은단독항체로만 Anti-Fy a 1예 (1.8%), Anti-Fy b 3예 (5.5%) 가동정되었다. MNSs 계열도단독항체로 Anti-M 2예 (3.6%), Anti-S 1예 (1.8%) 가동정되었다 (Table 2). Table 2. The frequency and distribution of unexpected antibodies in Daejeon 2016 2017 Antibody specificity No. (%) 2016 2017 Total Rh 36 (65.5%) Anti-E 8 11 19 (34.5%) Anti-D 3 2 5 (9.1%) Anti-C 1 1 2 (3.6%) Anti-c 1 1 2 (3.6%) Anti-C/-e 3 1 4 (7.3%) Anti-E/-c 3 1 4 (7.3%) Lewis 7 (12.7%) Anti-Le a 1 2 3 (5.5%) Anti-Le b 1 2 3 (5.5%) Anti-Le a /-Le b 1 0 1 (1.8%) Kidd 4 (7.3%) Anti-Jk a 0 1 1 (1.8%) Anti-Jk b 2 1 3 (5.5%) Duffy 4 (7.3%) Anti-Fy a 0 1 1 (1.8%) Anti-Fy b 1 2 3 (5.5%) MNSs 3 (5.5%) Anti-M 1 1 2 (3.6%) Anti-S 0 1 1 (1.8%) Rh+Kidd 1 (1.8%) Anti-E/-c/-Jk b 1 0 1 (1.8%) Autoantibody 3 2 5 (9.1%) Total 27 28 55 *Presence and types of unexpected antibodies at a hospital in Daejeon. 3. 비예기항체특징동정된비예기항체들은혈액형계열에따라단독또는복합항체의형태로동정되는특징을보였다. Rh, Lewis, Kidd 계열은단독항체뿐만아니라복합항체로도동정되었고, Duffy 계열과 MNSs 계열은단독항체로만동정되었다. 고찰비예기항체의빈도및종류는연구대상군, 대상연구집단의혈액형빈도, 유전자빈도, 검사방법, 그리고판독자의능력등에따라결과에큰차이를보이는것으로알려져있다 [12]. 본연구에서는남성보다는여성에서, 30대보다는 60대에서비예기항체양성빈도가높게조사되었다. 이는아마도임신이나수혈등에의해서비예기항체가발생되는특성때문으로사료되지만, 조사기간 2년동안연도별차이점은거의없었다. Park 등 [15] 이보고한 0.58% 보다는다소낮았지만, 현재까지보고된선행연구들의 0.33% 에서 1.34% 까지다양하게보고되는추세와비슷하였다 [13-15]. 비예기항체는총 81개양성자중에서 55예 (67.9%) 에서만동정되었다. 26개검체는항체선별검사후추가적인동정검사가이루어지지않았거나, 동정검사를실시했지만 11개의동정혈구에서각항체에대한응집형태와차이를보여명확하게결과가동정되지않았다. 아마도온난항체분석방법으로인해한냉항체계열의항체들이검출되지않았을것으로사료된다. Rh 계열이 36예 (65.5%) 로가장자주동정되었고, 그뒤를이어 Lewis 계열 7예 (12.7%), Kidd 계열과 Duffy 계열각각 4예 (7.3%), MNSs 계열 1예 (1.8%), Rh+Kidd 복합계열 1예 (1.8%) 가동정되었다. 2010년에같은중부지역을연구한 Kang 등 [11] 의보고에서도 Rh 계열과 Lewis계열이자주동정되어비슷한맥락을보였다. 그러나 MNSs 계열보다 Kidd 계열이더많이동정된점과, Anti-Le b, Anti-Fy a, Anti-S 항체등이동정된점, 그리고 P 계열의 Anti-P1 항체가전혀동정되지않은점등이차이로나타났다. 가장자주동정된 Rh 계열 [16] 은우리나라에서가장많이발생하고있는항체로본연구에서 Lewis 계열의동정빈도가 Rh 계열보다감소되거나 P 계열이동정되지않은것은아마도짧은연구기간과검체수부족때문으로추정되지만, 연구방법역시온난항체검출률이높은원주응집법을사용했기때문이거나 [20], DiaMed-ID system을이용한연구에서 Rh 계열항체가가장많은다빈도로검출되었다고보고된바있는데, 이러한원인때문으로판단된다 [21, 22]. 그리고단일항체뿐만아니라복합항체들도자주동정되었

Korean J Clin Lab Sci. Vol. 50, No. 3, September 2018 357 는데, Kim 등 [16] 의연구에서는 Rh 계열의복합항체가자주발생되는이유를우리나라 Rh 표현형에서가장흔한 CDe형 (38.0%), CcDEe 형 (34.2%) [19] 간에수혈, 특히 CcDEe 형의혈액이 CDe환자에게수혈할경우동종면역으로인한 Anti-E의생성이나 Anti-E/-c 등이동시발생할수있어서라고주장하였는데, 본원역시다른의료기관들과마찬가지로적십자혈액원으로부터주로 CcDEe형의혈액들을공급받고있어서비슷한결과가나타난것으로추정된다. 가장자주동정된단일항체로 Rh 계열의 Anti-E는임상적으로의미있는용혈성수혈부작용의주요원인항체중하나이다. 그리고 Anti-c 와같이동반검출되는경우가 30 40% 로많은것으로알려져있다 [18]. 본연구에서도 Anti-E/-c 4예 (7.3%), Anti-C/-e 4예 (7.3%), Anti-Le a / -Le b 1예 (1.8%), Anti-E/-c/-Jk b 1예 (1.8%) 의복합항체가다양하게동정되었다. Kim 등 [17] 23.9%, Oh 등 [18] 30.0% 보다낮게조사된 Anti-E/-c 복합항체의빈도는아마도조사기간에따른검체수의차이로생각된다. 그리고비록 1개검체에서소수로동정된 Anti-E/-c/-Jk b 는가장자주동정된 Rh 계열과 Kidd 계열에서발생된복합항체라는점에서, 수혈에미칠영향을고려할때매우특이할만한결과라고할수있다. 복합항체는수혈이나임신등과같이원인을알수있는요인들에의해서생성되기도하지만 [1-3], 알수없는여러원인들에의해서생성되기때문에그검출자체가의미가크다. 이러한복합항체들은향후더많은검체수와오랜기간을대상으로조사한다면검출빈도가더높아질것으로사료된다. 5예 (9.1%) 에서검출된 Anti-D 는일반적으로 RhD 음성자가수혈이나임신등의경로로적혈구표면의 D항원에노출되는경우에생성되는것으로알려져있다. 또한 D항원의면역원성은다른혈액형군항원보다훨씬높아 RhD 양성혈액을수혈받은 RhD 음성자의약 80% 에서 anti-d가생성되는것으로알려져있으므로 [19, 23], Rh 음성혈액수혈시 anti-d 항체의존재유무를꼭확인해서준비해야되겠다. 이연구는짧은조사기간으로인해더다양한비예기항체동정과발생을반영하지못한한계점이있다. 그리고동정된 Rh 계열의항체에대해서도효소처리된항체동정용혈구를사용하여추가검사를진행하여야했지만그렇지못한점도부족하다. 그러나최근중부지역환자군들에대한전반적인항체특성과분포현황을확인할수있었다는점과이를토대로보다더신속하고부작용없는수혈준비를가능하게할수있다는점에서큰의의가있다고할수있겠다. 요약 수혈준비시비예기항체선별검사를통한항체의유무와그종류를아는것은매우중요하다. DiaMed-ID 시스템을이용하여대전지역일개대학병원에 2016년 1월부터 2017년 12월까지 2년동안의뢰된비예기항체선별검사양성자중에서항체동정은 55명에서만되었고주로여성에서자주동정되었다. Rh 36예 (65.5%), Lewis 7예 (12.7%), Kidd 4예 (7.3%), Duffy 4예 (7.3%), MNSs 3예 (5.5%), Rh+Kidd 복합 1예 (1.8%) 가동정되었는데, Rh 계열은 Anti-E 19예 (34.5%), Anti-E/-c 4예 (7.3%), Anti-C/-e 4예 (7.3%), Anti-E/-c/-Jk b 1예 (1.8%) 가, Lewis 계열은 Anti-Le a 3예 (5.5%), Anti-Le b 3예 (5.5%), Kidd 계열은 Anti-Jk a 1예 (1.8%), Anti-Jk b 3예 (5.5%) 가동정되었다. Duffy 와 MNSs 계열은각각 Anti-Fy a 1예 (1.8%), Anti-Fy b 3예 (5.5%), Anti-M 2예 (3.6%), Anti-S 1예 (1.8%) 가동정되었다. 최근대전의비예기항체빈도와분포가반영된이연구는효율적인수혈준비에도움이될것이다. Acknowledgements: None Conflict of interest: None REFERENCES 1. Kim MH, Suh JT, Lee WI. The frequency of unexpected antibodies in transfusion candidates in recent 6 years. Korean J Blood Transfus. 2004;15:162-167. 2. Cho YK, Kim DS, Lee HS, Choi SI. The frequency and distribution of unexpected antibodies in surgical patients at Chonbuk National University Hospital. Korean J Lab Med. 2004;24:67-71. 3. Kim WD, Lee YH. A fatal case of severe hemolytic disease of newborn associated with anti-jk b. J Korean Med Sci. 2006;21:151-154. 4. Kim KH, Han JY, Kim JM, Park KH, Han KS. Fatal acute hemolytic transfusion reaction due to anti-e+ Fy a. Korean J Lab Med. 2003;23:57-59. 5. Hur M, Han BY, Han KS, Yoo WH, Ahn H, Lee DY, et al. Two cases of severe hemolytic transfusion reactions caused by anti-jk b antibody. Korean J Blood Transfus. 1997;8:139-145. 6. Park TS, Kim HH, Son HC, Kim BC. Hemolytic transfusion reaction with acute renal failure due anti-jk b. A case study. Korea J Blood Transfus. 2002;13:89-92. 7. Park TS, Kim KU, Jeong WJ, Kim HH, Chang CL, Chung JS, et al. Acute hemolytic transfusion reaction due to multiple alloantibodies including anti-e, anti-c and anti-jk b. J Korean Med Sci. 2003;18:894-896. 8. Kim SM, Kim SH. Analysis of current status of chronic red blood cell transfusion. Korean J Blood Transfus. 2016;27:229-236. 9. Yoo DW, Lee HJ, Lee SM, Kim IS, Song DY, Chang CH, et al.

358 Jae-Jung Kim. Frequency and Distribution of Unexpected Antibody Delayed hemolytic transfusion reaction with alloimmunization of Rh phenotype: A two-case study. Korean J Blood Transfus. 2017;28:163-169. 10. Lee WH, Kim SY, Kim HO. The incidence of unexpected antibodies in transfusion candidates. Korean J Blood Transfus. 2000;11:99-103. 11. Kang HJ, Ihm CH, Lee MH, Hyun SH, Kim IS. The frequency and distribution of unexpected antibodies at a tertiary hospital in Daejeon. Korean J Clin Lab Sci. 2010;42:63-70. 12. Roback JD, Combs MR, et al. Technical manual. 16th ed. Bethesda: American Association of Blood Banks. 2008. p411-423, 465. 13. Cho YK, Kim DS, Lee HS, Choi SI. The frequency and distribution of unexpected antibodies in surgical patients at Chonbuk National University Hospital. Korean J Lab Med. 2004;24:67-71. 14. Lee SM, Lim YA, Oh JS. An experience of including ID-DiaCell Dia cell in unexpected antibody screening test. Korean J Blood Transfus. 2005;16:32-37. 15. Park BM, Song YK, Kim TS, Lee GH, Choi JS, Seong MW, et al. The frequency and distribution of unexpected red cell antibodies at National Cancer Center. Korean J Blood Transfus. 2009;20:120-128. 16. Kim JW, Kim WJ. Studies on the RBC alloimmunization after blood transfusions. J Exp Biomed Sci. 2006;12:35-42. 17. Kim JE, Kim BR, Woo KS, Han JY, Kim KH. The characteristics of concurrent blood group antibodies detected by unexpected antibody screening tests. Korean J Blood Transfus. 2010;21: 115-121. 18. Oh DJ, Kim MJ, Seo DH, Song EY, Han KS, Kim HO. The frequency of unexpected antibodies in blood donors and transfusion candidates in Korea. Korean J Blood Transfus. 2003;14:160-172. 19. Han KS, Park MH, et al. Transfusion medicine. 1st ed. Seoul: Korea medical book publishing company; 2006. p214-231. 20. Song DH, Moon IS, Hong SI, Park JH, Kim JG, Jeon DS. Frequency and distribution of unexpected antibodies of Koreans. Korean J Blood Transfus. 1998;9:191-200. 21. Jung TK, Lee NY, Bae HG, Kwon EH, Park SH, Suh JS. Unexpected antibody positivity with the use of the LISS/Coombs gel test. Korean J Lab Med. 2001;21:422-425. 22. Kim JY, Huh JH, Kim SH, Nam MH, Roh KH, Kim JS, et al. Evaluation of the DG gel system using the microtube column agglutination technique for antibody screening and identification. Korean J Blood Transfus. 2007;18:32-38. 23. Brecher ME. Technical manual. 15th ed. Bethesda: American Association of Blood Banks; 2005. p315-333.