한국환경농학회지제 28 권제 4 호 (2009) Korean Journal of Environmental Agriculture Vol. 28, No. 4, pp. 427-434 연구보문 GC-ECD를이용한배추, 사과, 감귤, 고추, 현미중살균제 Prochloraz의분석법확립 이은미 이혜리 류명주 박희원 나예림 송혁환 금영수 Zhu Youngzhe 1) 김정한 * 서울대학교농업생명과학대학농생명공학부, 1) Qingdao Agricultural University (2009 년 12 월 11 일접수, 2009 년 12 월 26 일수리 ) Establishment of Analytical Method of Prochloraz in Cabbage, Apple, Mandarin, Pepper and Hulled rice with GC-ECD Eun-mi Lee, Hyeri Lee, Myoungjoo Riu, Heewon Park, Yerim Na, Hyukhwan Song, Young Soo Keum, Youngzhe Zhu 1), and Jeong-Han Kim(Department of Agricultural Biotechnology, Seoul National University, Korea 1) Qingdao Agricultural University, China) ABSTRACT: Analytical method for prochloraz in cabbage, apple, pepper, mandarin, and hulled rice was established by conversion it to 2,4,6-trichlorophenol (TCP). Crop samples were extracted with acetonitrile, and partitioned with dichloromethane. The sample extracts were hydrolyzed with pyridine hydrochloride in a vial by heating for 1 hour, and analyzed with GC-ECD after partitioning with dichloromethane. Method quantification limit (MQL) of prochloraz was 0.01 mg/kg. Recoveries at 0.1 mg/kg level was 105-113% while at mg/kg level was 82-87%. In both of the cases CV was less than 10%. Through this procedure soxhlet extraction and refluxing apparatus of conventional method were discarded and simple solvent extraction and small vial were successfully employed, resulting in simple, rapid, economic and more precise method. Key Words: GC-ECD, MQL, Prochloraz, Recovery 서론 Imidazole계의침투성살균제인 Prochloraz는사과, 딸기, 포도, 수박등의탄저병과고추, 딸기등의흰가루병, 감귤의저장병방제와벼의종자소독용으로사용되고있다 1). 원제는담황백색의반고체로써증기압이 7 10-9 mmhg/ 20 이고, 23 물에는 47.5 mg/ml가용해되며, 일반유기용매에잘용해하는특성이있다. 흰쥐에대한급성경구독성 LD 50 은 1600 mg/kg으로급성독성은매우낮은농약에속할뿐아니라항균범위가넓으며침투이행성이강하여종자전염성병해및저장병해에예방과치료효과가있고사상균의 ergosterol 생합성을저해함으로써살균효과를나타내 * 연락저자 : Tel: +82-2-880-4644 Fax: +82-2-873-4415 E-mail: kjh2404@snu.ac.kr 는것으로알려져있다 2). Prochloraz는환경이나식물체내에서구조가변환되어일반적으로 3개의독성대사물을생산하는데, N-formyl-N- [2-(2,4,6-trichlorophenoxy)ethyl]urea와 N-propyl-N-[2-(2,4,6-trichlorophenoxy)ethyl]urea로전환되고이것은다시 2,4,6-trichlorophenol (TCP) 로분해된다 (Fig. 1) 3). Prochloraz의잔류분석법은 3개의대사산물을모두포함해야하는데, 대개의분석법은추출후 prochloraz 및 2개의대사산물 (N-formyl-N-[2-(2,4,6-trichlor ophenoxy)ethyl] urea, N-propyl-N-[2-(2,4,6-trichlorophenoxy)ethyl]urea) 을가열환류분해반응을통해 TCP로전환시킨후 TCP를분석하고, prochloraz로농도를역계산한다. Prochloraz의잔류분석에대한자료는많지않은데, 최등 (2002) 4) 이토양중잔류량과반감기를 GC-ECD를이용하여분석하였고, Paoli 등 (1997) 5) 은채소, 과일, 밀에서 GC- ECD를이용하여분석하였다. Sandro 등 (2005) 6) 은망고, 파 427
428 이은미 이혜리 류명주 박희원 나예림 송혁환 금영수 Zhu Youngzhe 김정한 파야, 오렌지를대상으로 HPLC-UV를이용하였으며, Bienvenida 등 (2007) 7) 은과일쥬스에서 LC-TOFMS를이용하여잔류분석을하였다. 현재식품공전 (2009) 상 prochlorz의분석법은 soxhlet추출장치에서 6시간추출하고, 1시간동안가열환류장치를이용하여분해반응을한후정제, 농축하여분석한다. 또한일본잔류분석법 8) 에도 soxhlet 추출과가열환류분해과정을거쳐 C 18 과 florisil mini column을이용한복잡한정제과정을수행하게된다. 따라서 soxhlet 추출, 가열환류장치사용, 정제과정의복잡함등에의해 prochloraz의분석이복잡하고, 시간이오래걸리며회수율도일정하지못한단점이있다. 하지만, 생산단계농약잔류허용기준설정연구보고서 (2009) 등에 soxhlet 추출대신에단순용매추출을이용한보고가있고 4,5), 또한가열환류장치도소규모로만들어시도한보고 5) 가있어서본연구에서는단순용매추출방법을이용하고, 소규모로가수분해장치를활용하며, 정제과정을최소한으로줄여시간과시약, 용매를절약한간편하고신뢰성높은분석법으로개선하여대표작물을선정하여적용성을확보함으로써 prochloraz 잔류분석의범용성과효율성을극대화하고자하였다. 재료및방법 은 HPLC급 (B&J ACS) 을, acetonitrile, dichloromethane, ethyl acetate, hexane은 EP급 (Samchun chemical) 을사용하였다. 또한 sodium chloride, 무수 sodium sulfate, acetic acid는 GR급을사용하였다. Pyridine hydrochloride 는 tokyo chemical industry의제품을, diethylene glycol 은 duksan pharmaceutical 제품을사용하였다. Solid phase extraction (SPE) cartridge는 waters사의 NH2 (6cc, 1g) cartridge을사용하였다. 농축기는 Buchi rotavapor R-114 (Switzerland) 를사용하였고, 농산물시료는믹서기 ( 한일, HMF-1000A) 를이용하여마쇄하였다. TCP 의검출한계 (LOD ; Limit of Detection) 및정량한계 (LOQ ; Limit of Quantification) 측정 TCP 표준용액 0.005~0.1 ppm을 2 μl씩 GC-ECD에주입하여크로마토그램의 signal과 noise의비를구하여 LOD 및 LOQ를계산하였다. TCP 분석의재현성 (Reproducibility) 의검증 TCP 표준용액 0.005 ppm을연이어 6번 GC-ECD에 2 μl씩주입하여크로마토그램상의머무름시간 (tr), peak의면적 (Area), peak 높이 (height) 의변이를비교검토하였다. 재료및시약, 기구 Prochloraz와 2,4,6-trichlorophenol (TCP) 표준품은순도 95% 이상의분석용표준품을 Chem Service로부터구입하여사용하였다. Acetone, dichloromethane, methanol TCP 및 prochloraz 의표준검량선작성 TCP 및 prochloraz 표준용액은각각의표준품을 1000 mg/l가되도록 acetone에용해시켜 stock solution으로사용하였다. 이를 1,, 0.1, 0.05, 0.01, 0.005 mg/l의농도가되도록차례로희석하고, TCP는 2 μl, prochloraz는 1 μl 를 GC-ECD 에주입하여 peak 의면적을기준으로표준검량선을작성하였다. Prochloraz 의추출법확립 Prochloraz의 SPE 정제조건조사 NH 2 sep-pak cartridge(6 cc, 1 g) 를 dichloromethane 10 ml로활성화를시킨후, prchloraz 표준용액 (1 mg/l) 1 ml을가하였다. 0%, 1% 및 5% methanol/ dichloromethane 각각 10 ml로용리시킨후용리액을농축시켜 acetone 1 ml로재정용하고, 1 μl를 GC-ECD로분석하였다. 또한사과시료에 prchloraz 표준용액 (1mg/L) 1 ml을가하고 1% methanol/dichloromethane 10 ml 로용리시킨후용리액을농축시켜 acetone 1 ml로재정용, 1 μl를 GC-ECD로분석하였다. Fig. 1. Biotransformation of prochloraz. Prochloraz의분배효율측정 의증류수에 prochloraz 표준용액 (1 mg/l) 1 ml을첨가하고, 의포화식염수와 의증류수를가한뒤, 분액여두에옮겨분배용매 n-hexane, ethyl acetate 및 dichloromethane 각각 로한번추출하
GC-ECD 를이용한배추, 사과, 감귤, 고추, 현미중살균제 Prochloraz 의분석법확립 429 였다. 분배추출액을무수 sodium sulfate 에통과시켜수분을제거하고 40 이하에서감압농축하였다. 농축잔사를 5 ml acetone에재용해하여 GC-ECD로분석하여회수율을구하였다. 위와같은방법으로각각의분배용매 로두번더추출하여동일한방법으로기기분석을통해세번분배의분배효율을구하여분배과정의용매에따른분배추출효율을계산하였다. 같은방법으로 dichloromethane 로두번더추출하여같은방법으로기기분석을행하여분배과정의용매에따른회수율을계산하였다. 분석정량한계 (Method quantification limit ; MQL) 정량한계 (LOQ) 와시료랑및분석조작중의희석배율을고려하여식 (1) 에의하여계산하였다. Prochloraz의추출효율측정마쇄한사과시료 25 g에 prochloraz 표준용액 (1 mg/l) 을 mg/kg 수준이되게첨가하여 1시간방치하였다. 추출용매인 acetone, acetonitrile, methanol 각각 100 ml을가하고, 1시간동안진탕추출한다음감압여과하였다. 잔사를 500 ml 분액여두에옮긴후, 포화식염수, 증류수 100 ml, dichloromethane 로두번분배하여합하였다. 합한용매를감압농축한후 dichloromethane 5 ml 로재용해하였다. Dichloromethane 10 ml로활성화시킨 NH 2 cartridge 에상기용액 5 ml 중 1 ml을가한다음 1% methanol/ dichloromethane 10 ml로용리시킨후용리액을농축시켜 acetone 5 ml 재정용하였고 1 μl를 GC-ECD로분석하였다. TCP 추출효율조사 TCP의분배용매별추출효율조사 의증류수에 TCP 표준용액 (1 mg/l) 1 ml를첨가하고, 의포화식염수와 의증류수를가한뒤, 분액여두에옮겨 n-hexane, ethyl acetate 및 dichloromethane를각각 로분배하고분배액에 acetone에녹인 2% diethylene glycol 용액 0.2 ml를가하였다. 40 이하의수욕조에서감압농축후농축잔사를 5 ml acetone 에재용해하여 GC-ECD로분석하였다. 위와같은방법으로각각의분배용매 로두번더추출하여같은방법으로기기분석을행하여세번분배의분배효율도구하여분배과정의용매에따른분배추출효율을계산하였다. TCP의전환반응과 TCP 추출효율조사 Pyridine hydrochloride 5 g을 40 ml vial(25 95 mm) 에넣고 220 silicon oil bath에서 1시간동안반응하였다. 반응용액을상온에서식힌후 0.2 M HCl 20 ml을가하여반응을종결하였다. TCP 표준용액 (1 mg/l) 1 ml 를반응액에가하여혼합한다음반응액을 500 ml 분액여두에옮기고 100 ml의증류수, 의포화식염수와 50 ml의 dichloromethane을가한뒤분배하고, 추출액에 acetone에녹인 2% diethylene glycol 용액 0.2 ml를가하였다. 40 이하의수욕조에서감압농축한뒤농축잔사를 5 ml acetone 에재용해하여 GC-ECD 로분석하였다. 위와 MQL(mg/kg)= [ 정량한계 GC주입전시료용액량 (ml) 희석배수 ] [GC주입량(μL) 시료량 (g)] 대표작물중 TCP 의회수율 ( 전체개선분석법의회수율 ) 측정마쇄한농산물시료 25 g 에 10 MQL(0.1 mg/kg) 과 50 MQL( mg/kg) 에해당하는 prochloraz 표준용액을가한다음 100 ml의 acetonitrile을가하여 30분동안진탕추출하였다. 추출물을흡입여과하고, acetonitrile으로잔사및용기를씻어내어앞의여액과합하였다. 합친여액을 40 이하의수욕조에서감압농축하였다. 포화식염수가담긴 500 ml 분액여두에플라스크안의잔사를 100 ml 증류수와 dichloromethane으로행구어담고격렬히진탕한후층이분리될때까지정치하였다. Dichloromethane 층을 sodium sulfate anhydride에통과시켜탈수한후, 다시 dichloromethane 을가하여상기의과정을거친추출액을합하고 40 이하에서감압농축, 건고하였다. 추출액을 dichloromethane 5 ml에재용해하였고, 재용해한용액중 1 ml을취하여 40 ml vial 에담고, 2% diethylene glycol 용액 0.2 ml를가한후질소건고하였다. 40 ml vial에 5 g의 pyridine hydrochloride를가하고밀봉한다음 vial을 220 (silicon oil bath ) 에서 1시간동안가열한후실온으로냉각시켜 0.2 M HCl 20 ml를가하여반응을용해시켰다. 반응액을 100 ml 증류수와 dichloromethane을이용하여 500 ml 분액여두에옮기고격렬히 1분간진탕한후층이분리될때까지정치하였다. Dichloromethane층을무수 sodium sulfate에통과시켜탈수한후, 다시 dichloromethane 50 ml을가하여상기의과정을거친추출액을합하고, 추출액에 acetone에녹인 2% diethylene glycol 용액 0.2 ml를가하여 40 이하의수욕조에서감압농축하였다. 잔류물에 5 ml acetone로재용해하여 2 μl을 GC-ECD로분석하였다. GC-ECD 기기분석조건작물중 TCP의분석은 GC는 HP6890(Hewlett packard) 모델을사용하였고, 컬럼은 DB-5, 검출기는 ECD를이용하여등온조건으로분석하였다 (Table 1). (1)
430 이은미 이혜리 류명주 박희원 나예림 송혁환 금영수 Zhu Youngzhe 김정한 GC 에서 TCP peak 의분리특징 Retention factor Retention factor(k) 는머무름시간과보정머무름시간 (t r' ; adjusted retention time) 을이용하여식 (2) 에의하여계산하였다. t r' k = tm (2) t r = retention time tm = retention time of a non-retained compound t r' = t r - t m = adjusted retention time Number of plates(n) and Height of theoretical plates(h) Number of plates는머무름시간과 peak의너비를이용하여식 (3) 에의하여계산하였고, 계산된 number of plates와컬럼의길이를이용하여식 (4) 에의하여 height of theoretical plates를계산하였다 9). Table 1. GC-ECD operating conditions of TCP in crops DB-5 fused silica capillary column, Column 3 mm I.d. 30 m, μm film thickness (J&W, USA) Oven temp. 110 Detector temp. Inlet temp. 300 300 (ECD) Gas flow rate 5.0 ml/min (N 2) Sample size 2 μl N = 5.545 ( t r(min) ) 2 W h(min) (3) W h = peak width at half height H(mm) = column length(mm) N (4) 결과및고찰 대표작물의선정한국보건산업진흥원의식품의농약잔류허용기준 (2009) 에 Prochloraz를대상성분으로등록되어있는농산물 (Table 2.) 중채소에서배추, 고추를, 과일에서사과, 감귤을곡류에서현미를대표작물로선정하였다. 선정한농산물의무농약시료는무농약재배가확인된유기농수확물을농가에서직접구매하거나할인매장에서구입하였다. 검출한계, 정량한계및재현성검출한계는기기상 peak으로검출할수있는한계로서, 크로마토그램상에서 S/N(signal과 noise) 비가 2-3배이상을나타내는농약의양을말한다. 정량한계는기기상으로신뢰성있게정량할수있는한계로서, 크로마토그램상에서 signal과 noise의비가 10배이상 (LOD의 3-5배이상 ) 을나타내는농약의양을의미한다 10,11). 다양한농도의표준용액을분석하여 S/N비를구한결과, TCP의정량한계는 0.01 ng이었다. 분석의재현성을알아보기위해본연구에서설정한정량한계양 (0.01 ng) 을연속으로 6번분석한결과머무름시간 (t r), peak의면적 (Area), peak 높이 (Height) 간의오차가작 Table 2. Maximum residue limits (MRLs) of prochloraz in agricultural products Commodity MRL, ppm Commodity MRL, ppm Persimmon Green & Red pepper fresh Other Mushrooms Oat Oyster Mushroom Strawberry Garic(Greem galric) Mango Wheat Mandarin Banana Pear Barley Peach Apple Apricot 1.0 3.0 0.1 0.05 5.0 0.05 Watermelon Rice Avocado Mushroom Orange Cucumber Plum Korean Melon Cherry Coffee Bean Tomato Papaya Grape Sweet pepper Rye 0.05 5.0 0.3 5.0 1.0 0.05 0.2 1.0 3.0
GC-ECD 를이용한배추, 사과, 감귤, 고추, 현미중살균제 Prochloraz 의분석법확립 431 Table 3. LOQ and reproducibility LOQ 0.01 ng Reproducibility [Average ± C.V(%)] t r 9.15(min) ± 0.029 Area 223.49 ± 0.453 Height 17.19 ± 0.251 Table 4. Recovery of prochloraz by methanol/ dichloromethane mixture methanol/dichloromethane Recovery (%) 0 : 100 10 ml 96.9 1 : 99 10 ml 9.5 5 : 95 10 ml - 아매우기기가안정적이고정밀한분석을수행할수있음을확인하였다 (Table 3.). TCP 및 prochloraz 검량선의직선성 TCP 표준용액 (0.005~1 ppm) 을분석하여얻은검량선의회귀방정식은 y=21988x-157.54 (R 2 =0.9996) 로직선성이우수하였고, prochloraz 표준용액 (0.005~1 ppm) 을분석하여얻은검량선의회귀방정식도 y=4147x + 35.89 (R 2 =0.9998) 로직선성이우수하였다. 용매추출 / 분배 / 정제에의한 Prochloraz 의추출조건확립 Prochloraz의잔류분석은 prochloraz를추출한후 TCP 로분해시키고, TCP만을분석하기때문에먼저 prochloraz 가농산물시료로부터정상적으로추출되는조건을확립해야한다. 특히기존의 soxhlet 법을사용하지않고단순용매추출로대체하기때문에정확한추출법을마련해야한다. 따라서다음과같이 prochloraz의정제조건 (SPE cartridge) 과분배조건을확립한다음추출용매를선정해서 prochloraz 의전체적추출법을확립하였다. 정제과정에서의 prochloraz의회수율을확인하기위하여 NH2 cartridge에표준용액을첨가하여회수율을확인하였으며 0%, 1%, 및 5% methanol/dichloromethane 혼합액으로용리한결과 0-1% 혼합액에서좋은회수율을얻을수있었다 (Table 4.). 또한이상의결과를토대로사과추출액에표준용액을첨가하고 1% methanol/dichloromethane으로정제한결과 108.4% 회수율을보였다. Prochloraz의분배법에적용할분배용매로는잔류분석시보편적으로많이사용되는 n-hexane, dichloromethane 및 ethyl acetate가고려되었다. n-hexane, dichloromethane, ethyl acetate의세용매로각각 씩세번 ( 3) 분배한결과 (Table 5.), dichloromethane으로 1차, 2차에걸쳐추출한회수율이 108.9% 로대상성분의전량회수가가능하였다. Table 5. Efficiency of liquid-liquid partitioning with three solvents Solvent First Recovery (%) Second Third Table 6. Extraction efficiency by three different solvents Extraction solvent Acetone Acetonitrile Methanol Recovery(%) 113.3 113.1 93.3 Table 7. Liquid-liquid partitioning of TCP by three different solvents Partitioning solvent First Recovery (%) Second Third n-hexane 86.1 10.9 3.1 Ethyl acetate 103.6 5.3 - Dichloromethane 104.8 6.6 - n-hexane 60.3 1.3 0.1 ethyl acetate 54.7 - dichloromethane 70.9 2.5 - 분배및정제조건이확립되었으므로시료추출용매를선정하고자하였다. 추출용매로는농약의잔류분석법에서널리사용되고있는 acetone, acetonitrile, methanol의적용성을검토하였다. 사과시료에표준용액을첨가하고각용매의추출효율을비교한결과 acetonitrile과 acetone에서우수한결과를나타내었으며그중간섭물질의방해가적은 acetonitrile으로선정하였다 (Table 6.). 이상의과정으로서 soxhlet을사용하지않고용매만사용하여농작물시료에서 prochloraz를효율적으로추출할수있는방법이확립되었다. TCP의회수율이미언급했듯이, prochloraz를 TCP로분해해서분석하기때문에분해반응액중 TCP의추출이제대로이루어져야전체적인회수율을확보할수있다. 따라서분해반응액중 TCP의분배추출조건을확립하기위해우선증류수에 TCP 를첨가한다음 n-hexane, dichloromethane 및 ethyl acetate의적용성을검정한결과 dichloromethane으로 2회추출함으로써 70% 이상의회수가가능하였다 (Table 7). 위의결과를이용해서실제가수분해반응액에서의 TCP 추출효율을보기위해가수분해반응최종액에 TCP 표준용액을처리하고위에서선정한 dichloromethane 로 2 회분배한결과회수율은 85.1% 로양호하였다. 또한이러한 TCP로의분해과정중에서일반적으로크기가크고설치가
432 이은미 이혜리 류명주 박희원 나예림 송혁환 금영수 Zhu Youngzhe 김정한 복잡한환류장치를배제하고작은 vial(fig. 2.) 을사용하여, 간편하고신속, 경제적이며다수의반응을동시에수행할수있도록개선하였다. 분석정량한계분석정량한계는정량한계, 시료량및분석조작중의희석배율등을감안하여산출한수치로서 ( 식 1.), 연구에사용한전체적분석방법으로신뢰성있게정량할수있는한계를의미하며 12), 식품공전잔류농약분석법실무해설서 (2009) 에는 0.05 mg/kg 이하또는 MRL의 1/2 이하까지정량이가능하도록추천하고있다. TCP의분석정량한계는 0.005 mg/kg으로계산되었고여기에 prochloraz로환산하는환산계수 1.906을곱하여 prochloraz의분석정량한계는 0.01 mg/kg로서잔류분석법기준에적합하였다. 개선분석법의회수율마쇄한무처리시료에 prochloraz 표준용액을 10 MQL 50 MQL이되도록첨가하고, 전체적으로확립한방법으로 3 회반복하여분석한결과 (Table 8.), 10 MQL수준에서는 105-113%, 50 MQL 수준에서는 82-87% 의양호한회수율을보였고, 정밀성도양호하여 (CV<7%) 분석성분, 처리수준및농산물시료종류에관계없이회수율및분석오차는잔류 분석기준인 70-120% 범위와분석오차 10 % 이내를만족하였다 (Table 8.). 따라서이상의결과에서확립된전체개선분석법은잔류허용기준이설정된 31 종의농산물에충분히적용이가능함을알수있었다. GC에서 TCP peak의분리특징작물중tcp의분석크로마토그램에서 TCP의머무름시간 (tr) 은약 9.2 분이었으며, 머무름시간에서의방해물질은관찰되지않았다 (Fig. 3-7.). 머무름시간은혼합물이칼럼에주입된후에각성분이검출기까지도달하는데걸리는시간이고, 이동상은칼럼에머무르지않고최소의시간 (t m) 내에칼럼을통과한다 13). 따라서 t r 에서 t m 을뺀수치가보정머무름시간 (t r') 이고이것을 t m 으로나눈수치를 retention factor(k) 라하는데, partition ratio 또는 capacity factor(k') 라고하기도하며 9) 약 7.3 이었다. 이론단수 (N) 와이론단높이 (H) 는칼럼의분리효율을나타내는데 11,14), 이론단수가클수록분배가많이이루어져혼합물의분리가더잘이루어진다. 따라서 N은클수록, H는작 Fig. 2. Decompostion of prochloraz in sealed vial. Fig. 3. Chromatogram of TCP in cabbage extract. Table 8. Recoveries and MQL of the prochloraz in crops Fortified level (mg/kg) Recovery ± CV (%) 1 Cabbage Apple Mandarin Pepper Hulled rice 0.1 112.9±4.2 104.9±1.8 109.4±3.3 108.7±1.1 109.30±5.7 86.92±1.1 84.2±3.4 84.0±1.1 85.8±6.3 81.90±5.4 MQL (mg/kg) 0.01 1 Average of triplicate ± coefficient of variation.
GC-ECD 를이용한배추, 사과, 감귤, 고추, 현미중살균제 Prochloraz 의분석법확립 433 Fig. 4. Chromatogram of TCP in apple extract. Fig. 6. Chromatogram of TCP in mandarin extract. Fig. 5. Chromatogram of TCP in pepper extract. Fig. 7. Chromatogram of TCP in hulled rice extract. Table 9. Retention factor(k), N and H of TCP peak on GC Crops tr(min) tm(min) tr k N H(mm) Cabbage, Apple, Mandarin, Pepper, Hulled rice 9.2 1.1 8.13 7.3 12536 0.0024 을수록칼럼이효율적이다 9,11,14). 컬럼의효율을나타내는 N은 12536이었으며, 따라서 H 는 0.0024 이었다 (Table 9.).
434 이은미 이혜리 류명주 박희원 나예림 송혁환 금영수 Zhu Youngzhe 김정한 결론 Prochloraz를 TCP로전환하여분석하는 prochloraz의잔류분석방법을개선확립하였다. 기존의분석법중 soxhlet 추출부분과가열환류장치사용을배제하고각각간편한용매추출과소규모가열분해법으로대체해서시험과정을간편, 신속화하여재현성을높였다. 대표농산물중 prochloraz의분석정량한계 (MQL) 는 0.01 mg/kg이었다. 회수율은 82-113% 로처리수준및농산물시료종류에관계없이회수율및분석오차는잔류분석기준인 70-120% 범위와분석오차 10% 이내를만족하였다. 요약 Prochloraz를 2,4,6-Trichlorophenol (2,4,6-TCP) 로전환시켜분석하는방법을확립하였으며, 배추, 사과, 고추. 감귤, 현미를대사농작물로선정하였다. 농산물시료를마쇄, acetonitrile로추출하여 dichloromethane으로분배하고농축액에 pyridine hydrochloride를넣고 1시간가열분해를한다. 반응액을다시 dichloromethane으로분배한후 GC-ECD로분석하였다. Prochloraz의정량한계는 0.01 mg/kg 이었다. 회수율은 0.1 mg/kg 수준에서 105-113%, mg/kg 수준에서 82-87% 이었고, 반복간분석오차는 10% 미만이었다. 이러한분석법개선과정에서기존의 soxhlet 추출과환류장치를쓰지않고용매추출법과작은 vial을성공적으로적용하였고, 간편, 신속, 경제적이며정밀한분석법을확립하였다. 감사의글 본연구는식품의약품안전청의 2009년국가잔류농약안전관리연구사업단의연구비지원으로수행된결과의일부이며, 이에감사드립니다. 참고문헌 1. Korea crop protection association(2009) Pesticide Field Manual, Samjeong Press, Seoul, Koera, 328-331. 2. Tomlin, C. D. S (2006) The Pesticide Manual (14th), p.436-437. 3. Hollrial-Rosta A., Kreuzig R., Bahadir M. (1999) J. Pestic. Sci. 55, 531-538. 4. Choi, Y. H., Han, S. S., Kim, I. K. (2002) Determination of residual concentration and half-life time in soils of Imidazole fungicide Prochloraz, Analy. sci. echnol. 15, 67-71. 5. De Paoli M., Taccheo Barbina M., Damiano V., Fabbro D., Bruno R. (1997), Simpligied determination of combine resides of prochloraz and its metabolites in vegetable, fruit and wheat samples by gas chromatography, J. chromato. A, 765, 127-131. 6. Sandro, N. and Maria, L. R. (2005) An alternative LC-UV Procedure for the determination of Prochloraz residue in fruits, J. Braz. Chem. Soc. 16, 157-162. 7. Bienvendia, G., Juan, F. G., Milagros, M., Antonio, M., and Amadeo R. F. (2007) British Crop Production Council, UKBienvenida Determination of Postharvest Fungicides in Fruit Juices by Solid-Phase Extraction Followed by Liquid Chromatography Electrospray Time-of-Flight Mass Spectrometry, J. Agric. Food Chem. 55, 10548-10556. 8. Pesticide analytical method (2006) Chungang Press, p714. 9. Rood, Dean (2007) The Troubleshooting and Maintenance Guide for Gas Chromatographers, p.16-17, pp.22, Wiley-VCH, U.S.A8. 10. Fong, W. G, H. A. Moye, J. N. Seiber and J. P. Toth (1999) Pesticide Residues in food: Methods, Technologies, and Regulations. Wiley Interscience. pp.3-4, 40-44, Canada. 11. Miller, J. M. (2005) Chromatography : concepts and contrasts (2nd), Wiley Intersciense, p.286-287, U.S.A. 12. Lee, J., Park, H., Keum, Y., Kwon, C., Lee, Y., Kim, J. (2008) Dissipation pattern of Boscalid in cucumber under green house condition, Kor. J. Pesti. Sci. 12, 67-73. 13. Daniel C. Harris (1997) Quantitative chemical analysis (3rd), W. H. Freeman and company, New York, USA, pp.450. 14. McNair, H. M. and J. M. Miller (1997) Basic Gas Chromatography. p.7, 51, Wiley Interscience, U.S.A.