생 약 학 회 지 Kor. J. Pharmacogn. 46(3) : 268 278 (20) 베트남 약용식물의 최종당화산물 생성저해활성 검색(XIV) 최소진 김영숙 김주환 2 Tran The Bach 3 김진숙 * 한국한의학연구원 한의약융합연구부, 2 가천대학교 생명과학과, 3 베트남과학기술원 생태생물자원연구소 식물학과 Screening of Herbal Medicines from Vietnam with Inhibitory Activity on Advanced Glycation End Products Formation (XIV) So Jin Choi, Young Sook Kim, Joo Hwan Kim 2, Tran The Bach 3 and Jin Sook Kim * Korean Medicine Convergence Research Group, Korea Institute of Oriental Medicine, Daejeon 30-8, Korea 2 Department of Life Science, Gachon University, Seongnam, Kyonggi-do 46-70, Korea 3 Department of Botany, Institute of Ecology and Biological Resources,Vietnamese Academy of Science and Technology, Hanoi, Vietnam Abstract In this study, 80 herbal medicines from Vietnam have been investigated with an in vitro evaluation system using advanced glycation end products (AGEs) formation inhibitory activity. Of these, herbal medicines (IC 0 : < µg/ml) were found to have significant AGEs formation inhibitory activity. Particularly, herbal medicines Strobilanthes pateriformis (aerial parts), Rhodamnia dumetorum (), Glochidion rubrum (), Dipterocarpus obtusifolius (), Bombax ceiba (), Amesiodendron chinense (), Bauhinia coccinea (), Lithocarpus laouanensis (), Bauhinia bracteata () and Connarus paniculatus (), showed more potent inhibitory activity (approximately 6-3 fold) than the positive control aminoguanidine (IC 0 : 76.47 µg/ml). Key words Advanced glycation end products (AGEs), Diabetic complications, Herbal medicines 당뇨병 환자의 만성적인 고혈당은 최종당화산물(Advanced glycation end products, AGEs)을 생성시키고, 이는 polyol pathway flux의 증가 및 protein kinase C 활성화 등을 증가 시켜, -4) 당뇨성 망막증(diabetic retinopathy), 당뇨성 백내장 (diabetic cataract), 당뇨성 신증(diabetic nephropathy)과 같 은 당뇨합병증을 유발한다. -7) 이 중 최종당화산물은 단백질 과 환원당의 비효소적 반응에 의해 산화적이거나 비산화적 으로 생성되는데, 일단 생성이 되면 혈당이 정상으로 회복 되어도 분해되지 않고 단백질 생존 기간 동안 혈중이나 조 직에 축적되어, 단백질과 교차결합(AGEs-protein cross-link) 하여 혈액 단백질이나 여러 조직에 축적되어 당뇨 합병증 을 가속화하게 된다. 8-) 따라서 생체 내에서 최종당화산물 의 생성을 저해하거나 이미 생성된 최종당화산물의 단백질 과의 교차결합을 억제 또는 절단하여 당뇨합병증을 예방하 거나 치료하기 위해 많은 연구들이 진행되고 있다. -20) 본 연구에서는 베트남에서 사용되는 약용식물 80종의 에탄올 *교신저자(E-mail) : jskim@kiom.re.kr (Tel): +82-42-868-946, +82--8706-422 추출물을 대상으로 최종당화산물 생성 저해 활성을 in vitro 에서 검색하였다. 재료 및 방법 실험재료 약용식물은 202월 월부터 204년 월까지 베트남에서 채취되어, 가천대학교 생명과학과 김주환 교수 의 감정을 거친 후 실험 재료로 사용되었다(Table II). 사용 한 실험 재료의 증거표본은 한국한의학연구원 표본실에 보 관 중이다. 추출 및 시료조제 분쇄한 시료 200 g에 2L의 에탄올을 넣고 실온상태에서 3일간 3회 추출하였다. 이를 여과하여 40 o C의 수욕 상에서 감압농축을 실시한 후, 동결 건조기에 서 건조하였다. 추출물은 실험 수행 전에 감압 하에서 P 2 O 를 이용하여 24시간 이상 재건조한 후 DMSO(Sigma, St. Louis, MO, USA)에 용해시켜 stock solution을 조제하였으 며 DMSO의 최종 농도가 0.2%가 되도록 % Tween 80(Sigma, St. Louis, MO, USA)용액으로 희석하여 사용하 268
Vol. 46, No. 3, 20 269 Table I. Inhibitory activity of the ethanol extracts of the herbal medicines on AGEs formation in vitro Family name Scientific name Part used Acanthaceae (쥐꼬리망초과) Strobilanthes pateriformis aerial parts Conc. 2. Inhibition (%) 2.63±2.64 40.34±0.90 8.82±.9 IC 0 3.8±0.4 Actinidiaceae (다래나무과) Saurauia roxburghii 7 46.68±. >7 Anacardiaceae (옻나무과) Buchanania reticulata 2. 3.26±.3 36.±.27 6.99±.3 8.4±0.22 Ancistrocladaceae (안키스트로클라투스과) Ancistrocladus cochinchinensis 2. 4.3±.72 28.±2.2.7±.36 9.0±0.2 Annonaceae (포도나무과) Fissistigma chloroneurum leaves and 7 20.8±0.44 >7 Annonaceae (포도나무과) Rauwenhoffia siamensis 7 48.4±2.6 >7 Annonaceae (포도나무과) Mitrephora maingayi 2 0 7 33.±0.36 39.7±2.49 2.03±0.8 74.40±0.38 Annonaceae (포도나무과) Polyalthia hancei 2. 4.90±0.42 22.9±2.83 0.27±2.74.3±0.33 Apiaceae (미나리과) Hydrocotyle chinensis whole plants 7 3.6±0.42 >7 Apocynaceae (협죽도과) Willughbeia cochinchinensis 2. 4.07±.93 3.34±.47 8.6±0. 6.±0.98 Apocynaceae (협죽도과) Alyxia annamensis 7 27.34±3.43 >7 Apocynaceae (협죽도과) Micrechites polyanthus 7 33.74±.60 >7 Apocynaceae (협죽도과) Strophanthus perakensis 7 28.±.2 >7 Asclepiadaceae (박주가리과) Hoya villosa aerial parts 7 22.4±3.08 >7 Asclepiadaceae (박주가리과) Telectadium dongnaiense aerial parts Asteraceae (국화과) Centratherum intermedium whole plants 2 0 2 0 38.96±0.77 47.98±0.4.26±0.4 2.±0.84 36.38±.33 60.66±.30 34.89±0.78 39.06±0.7 Bignoniaceae (능소화과) Fernandoa brilletii leaves and 7 9.04±.79 >7 Bombacaceae (판야과) Bombax ceiba 2. 3.9±. 6.±0.9 67.4±0.6 4.±0.03 Boraginaceae (지치과) Cordia dichotoma leaves and 2 0 7 27.26±.39 37.70±0.63 7.38±.42 6.37±.3 Burseraceae (감람과) Canarium parvum 7 33.32±.00 >7 Caesalpiniaceae (실거리나무과) Bauhinia coccinea 2..7±.84 47.87±0.8 6.40±0.22 3.93±0.0 Caesalpiniaceae (실거리나무과) Bauhinia bracteata Clusiaceae (클루시아과) Garcinia cowa 2. 2 34.00±0.3 38.2±0.76 4.6±0.6 2.8±.6 2.2±0.3 42.68±0.9 7.3±0.6 63.2±2.9
270 Kor. J. Pharmacogn. Table I. Continued Family name Scientific name Part used Connaraceae (콘나루스과) Connarus paniculatus Conc. 2. Inhibition (%) 34.9±2.2.08±2.2 6.68±2.78 IC 0 2.7±0.3 Cyperaceae (사초과) Scirpus grossus whole plants 7 46.2±0.4 >7 Dioscoreaceae (마과) Dioscorea hamiltonii Dipterocarpaceae (이엽시과) Dipterocarpus obtusifolius Ebenaceae (감나무과) Diospyros lancaefolia 2. 2. 2 0 28.84±7.27 4.60±.98 63.0±3.97 7.02±0.77 60.22±.04 4.±0.4 28.34±0.36 3.±.7.±.72 48.7±3.3 Euphorbiaceae (대극과) Croton tiglium leaves and 7 22.08±.44 >7 Euphorbiaceae (대극과) Glochidion rubrum Euphorbiaceae (대극과) Hevea brasiliensis 2. 2 30.8±.3 7.74±.0 76.86±0.9 9.0±0.6 38.69±.4 60.64±.69 2.38±0.03 8.76±0.64 Fabaceae (콩과) Acacia dongnaiensis 7 49.74±0.84 >7 Fabaceae (콩과) Campylotropis splendens Fabaceae (콩과) Ormosia henryi Fabaceae (콩과) Crotalaria bracteata Fabaceae (콩과) Cassia javanica Fabaceae (콩과) Caesalpinia decapetala 2 0 7 2 0 2 0 7 2. 2.4±.89 30.22±.44 6.±.48 24.86±2.29 46.72±3.3 72.9±.77 3.4±0.93 40.00±0.3 6.0±.90 30.63±2.74 33.24±2.29 68.96±.32 24.36±0.69 4.37±2.64.±.40 69.46±. 29.97±.99 6.40±0.78 6.89±0.3 9.4±.7 Fagaceae (참나무과) Lithocarpus tubulosus 7 3.33±3.28 >7 Fagaceae (참나무과) Lithocarpus laouanensis 2. 3.72±.66 40.7±.03.7±.42 4.6±0.22 Fagaceae (참나무과) Lithocarpus corneus 7 43.76±.04 >7 Fagaceae (참나무과) Castanopsis echinophora 7 40.49±.2 >7 Fagaceae (참나무과) Castanopsis pseudoserrata 7 2.96±.4 >7 Fagaceae (참나무과) Lithocarpus thomsonii 7 47.80±0.82 >7 Flacourtiaceae (이나무과) Scolopia nana 2. 60.4±2.38 9.39±0.6
Vol. 46, No. 3, 20 27 Table I. Continued Family name Scientific name Part used Flacourtiaceae (이나무과) Osmelia philippinensis Lauraceae (녹나무) Cinnamomum inconspicuum Lauraceae (녹나무) Cinnamomum soncaurium Lauraceae (녹나무) Phoebe macrophylla Magnoliaceae (목련과) Manglietia blaoensis Conc. 2 2. 2 2. 2 Inhibition (%) 33.76±3.96 46.7±0.40 4.±.36 22.4±.08 2.86±3..68±0.8 22.±0.4 46.0±0.89 6.94±. 8.92±0.7 39.9±0.8 4.90±3.0 4.48±.8 39.40±0.37 9.63±.46 IC 0 9.0±.66.02±0. 8.86±0.3 8.4±0.49 9.27±0.48 Malvaceae (아욱과) Byttneria aspera 7 46.78±0.84 >7 Melastomataceae (산석류과) Memecylon lilacinum 7 39.04±.63 >7 Melastomataceae (산석류과) Melastoma eberhardtii 7 3.70±0.92 >7 Melastomataceae (산석류과) Memecylon angustifolium 7 47.69±.38 >7 Menispermaceae (새모래덩굴과) Tinomiscium petiolare fruits 7 43.3±2.72 >7 Moraceae (뽕나무과) Ficus callophylla Myrtaceae (도금양과) Rhodamnia dumetorum 2. 2..8±2.32 36.04±2.44.97±2.22 32.46±0.77 39.02±2.63 8.0±0.90 8.8±0.37 3.88±0.3 Oleaceae (물푸레나무과) Linociera ramiflora 7 2.78±3.2 >7 Opiliaceae (오필리아과) Opilia amentacea 2 0 7 33.62±0.00 47.02±.03 6.40±0.90 2.09±0.76 Opiliaceae (오필리아과) (오필리아과) Cansjera rheedii 7 4.09±0.7 >7 Pentaphylacaceae (펜타필락스과) Eurya ciliata 7 43.34±3.03 >7 Polygalaceae (원지과) Xanthophyllum urophyllum 7 40.±3.70 >7 Rosaceae (장미과) Pyrus calleryana 7 4.±3.4 >7 Rosaceae (장미과) Pyrus calleryana leaves 7 27.9±0.70 >7 Rosaceae (장미과) Pyrus calleryana stems 7 32.47±.28 >7 Rosaceae (장미과) Eriobotrya cavaleriei Rubiaceae (꼭두서니과) Ixora varians 2. 2. 7.3±.90 34.32±0.83 4.47±.80 6.98±0. 30.74±.47 8.40±2.8 8.87±0.32 8.49±0.3 Rubiaceae (꼭두서니과) Mussaenda dehiscens 7 3.±2.98 >7 Rubiaceae (꼭두서니과) Mussaenda dehiscens leaves 7 34.68±.2 >7 Rubiaceae (꼭두서니과) Mussaenda dehiscens stems 7 26.±0.49 >7 Rubiaceae (꼭두서니과) Cephalanthus angustifolius aerial parts 7 3.9±2.38 >7
272 Kor. J. Pharmacogn. Table I. Continued Family name Scientific name Part used Conc. Inhibition (%) Rubiaceae (꼭두서니과) Lasianthus langkokensis 7 44.3±.73 >7 Rubiaceae (꼭두서니과) Guettarda speciosa 2 27.68±0.40 40.77±0.34 66.77±.29 IC 0.93±0.2 Rubiaceae (꼭두서니과) Chassalia curviflora 7 23.49±3.00 >7 Sapindaceae (무환자나무과) Amesiodendron chinense Sapotaceae (산람과) Planchonella clemensii Symplocaceae (노린재나무과) Symplocos adenophylla Theaceae (차나무과) Eurya cerasifolia 2. 2 2. 2. 6.99±2.96 24.8±.39 4.±0.96 37.8±0.93 49.2±0.97 7.40±.8 2.22±0.3 3.67±. 8.4±0.4 28.84±3.9 44.99±.49 64.4±.7 4.68±0.08.0±0.97 8.9±0.3 6.69±0.39 Thymeleaceae (서향나무과) Linostoma decandrum leaves and 7 44.46±2.98 >7 Verbenaceae (마편초과) Vitex ajugaeflora 2 20.9±3.09 46.3±2.37 7.33±2.4 8.7±.29 Violaceae (제비꽃과) Rinorea anguifera 2 62.49±2.2 30.73±0.43 0 Aminoguanidine 76.47 IC 0 values were calculated from the dose inhibition curve. Table II. Extracts numbers and collect localities of the herbal medicines from Vietnam ID Family name Scientific name Part used Collect Locality aerial DiAB202-47 Acanthaceae (쥐꼬리망초과) Strobilanthes pateriformis Lang Son, Huu Lien Reserve parts DiAB203-029 Actinidiaceae (다래나무과) Saurauia roxburghii Hoa Binh, Mai Chau, Pa Co DiAB203-0 Anacardiaceae (옻나무과) Buchanania reticulata DiAB203-00 Ancistrocladaceae (안키스트로클라투스과) DiAB202-46 Annonaceae (포도나무과) Ancistrocladus cochinchinensis Fissistigma chloroneurum leaves and DiAB203-009 Annonaceae (포도나무과) Rauwenhoffia siamensis DiAB203-046 Annonaceae (포도나무과) Mitrephora maingayi DiAB204-079 Annonaceae (포도나무과) Polyalthia hancei DiAB203-030 Apiaceae (미나리과) Hydrocotyle chinensis whole plants Lang Son, Huu Lien Reserve Ha Tinh prov., Vu Quang distr., Vu Quang National Park Quang Nam prov., Nam Giang distr., Ta Poo comm. Hoa Binh, Mai Chau, Pa Co
Vol. 46, No. 3, 20 273 Table II. Continued ID Family name Scientific name Part used Collect Locality DiAB203-004 Apocynaceae (협죽도과) Willughbeia cochinchinensis DiAB203-04 Apocynaceae (협죽도과) Alyxia annamensis DiAB204-077 Apocynaceae (협죽도과) Micrechites polyanthus DiAB204-083 Apocynaceae (협죽도과) Strophanthus perakensis DiAB202-49 Asclepiadaceae (박주가리과) DiAB203-043 Asclepiadaceae (박주가리과) DiAB203-038 Asteraceae (국화과) Hoya villosa Telectadium dongnaiense Centratherum intermedium aerial parts aerial parts whole plants Kon Tum prov., Sa Thay distr., Sa Son comm. Gia Lai prov., K Bang distr., So Pai comm. Huong Viet comm. Lang Son, Huu Lien Reserve Quang Nam prov., Nam Giang distr., Ca Dy comm. Thua Thien-Hue prov., Phong Dien distr., Phong Dien DiAB202-44 Bignoniaceae (능소화과) Fernandoa brilletii leaves and Quang Tri, Huong Hoa DiAB203-023 Bombacaceae (판야과) Bombax ceiba Thai Nguyen, Phu Luong, Yen Ninh DiAB202-48 Boraginaceae (지치과) Cordia dichotoma leaves and DiAB204-090 Burseraceae (감람과) Canarium parvum DiAB203-036 Caesalpiniaceae (실거리나무과) Bauhinia coccinea Lang Son, Huu Lien Reserve Da Nang prov., Hoa Vang distr., Hoa Ninh comm. Ha Tinh prov., Vu Quang distr., Vu DiAB203-048 Caesalpiniaceae (실거리나무과) Bauhinia bracteata Quang National Park DiAB203-024 Clusiaceae (클루시아과) Garcinia cowa Bac Kan, Cho Don, Bang Lung DiAB204-08 Connaraceae (콘나루스과) Connarus paniculatus DiAB203-022 Cyperaceae (사초과) Scirpus grossus whole plants DiAB204-087 Dioscoreaceae (마과) Dioscorea hamiltonii DiAB203-020 Dipterocarpaceae (이엽시과) Dipterocarpus obtusifolius DiAB203-02 Ebenaceae (감나무과) Diospyros lancaefolia DiAB202- Euphorbiaceae (대극과) Croton tiglium leaves and DiAB203-07 Euphorbiaceae (대극과) Glochidion rubrum DiAB203-03 Euphorbiaceae (대극과) Hevea brasiliensis DiAB203-0 Fabaceae (콩과) Acacia dongnaiensis Huong Son comm. Ha Tay, Quoc Oai Bac Can, Na Ri Quang Binh, Quang Trach, Viet Trung town
274 Kor. J. Pharmacogn. Table II. Continued ID Family name Scientific name Part used Collect Locality DiAB203-04 Fabaceae (콩과) Campylotropis splendens DiAB203-028 Fabaceae (콩과) Ormosia henryi Bac Kan, Cho Don, Binh Trung DiAB203-044 Fabaceae (콩과) Crotalaria bracteata DiAB204-007 Fabaceae (콩과) Cassia javanica Binh Thuan prov., Bac Binh distr., Phan Son comm. DiAB204-084 Fabaceae (콩과) Caesalpinia decapetala Huong Viet comm. DiAB203-027 Fagaceae (참나무과) Lithocarpus tubulosus Bac Kan, Cho Don, Binh Trung DiAB203-042 Fagaceae (참나무과) Lithocarpus laouanensis DiAB203-047 Fagaceae (참나무과) Lithocarpus corneus DiAB204-072 Fagaceae (참나무과) Castanopsis echinophora DiAB204-073 Fagaceae (참나무과) Castanopsis pseudoserrata DiAB204-07 Fagaceae (참나무과) Lithocarpus thomsonii DiAB203-09 Flacourtiaceae (이나무과) Scolopia nana DiAB203-04 Flacourtiaceae (이나무과) Osmelia philippinensis DiAB204-078 Lauraceae (녹나무) Cinnamomum inconspicuum DiAB204-080 Lauraceae (녹나무) Cinnamomum soncaurium DiAB204-082 Lauraceae (녹나무) Phoebe macrophylla DiAB203-039 Magnoliaceae (목련과) Manglietia blaoensis DiAB204-08 Malvaceae (아욱과) Byttneria aspera DiAB203-006 Melastomataceae (산석류과) Memecylon lilacinum DiAB204-074 Melastomataceae (산석류과) Melastoma eberhardtii Quang Nam prov., Nam Giang distr., Ca Dy comm. Ha Tinh prov., Vu Quang distr., Vu Quang National Park Lam Dong prov., Dam Rong distr., Da Knang comm. Gia Lai prov., K Bang distr., Son Lang comm. Lam Dong prov., Da Hoai distr., Da P'loa comm. Da Nang prov., Hoa Vang distr., Hoa Ninh comm. Quang Nam prov., Nam Giang distr., Ta Bhing comm. Huong Phung comm. Huong Viet comm. Da Nang prov., Hoa Vang distr., Hoa Ninh comm. Huong Phung comm. Binh Thuan prov., Duc Linh distr., Me Pu comm. Lam Dong prov., Da Hoai distr., Ha DiAB204-076 Melastomataceae (산석류과) Memecylon angustifolium Lam comm. DiAB202-36 Menispermaceae (새모래덩굴과) Tinomiscium petiolare fruits Bac Can, Na Ri DiAB203-08 Moraceae (뽕나무과) Ficus callophylla DiAB203-06 Myrtaceae (도금양과) Rhodamnia dumetorum DiAB203-008 Oleaceae (물푸레나무과) Linociera ramiflora
Vol. 46, No. 3, 20 27 Table II. Continued ID Family name Scientific name Part used DiAB203-0 Opiliaceae (오필리아과) Opilia amentacea DiAB203-00 Opiliaceae (오필리아과) Cansjera rheedii DiAB204-086 Pentaphylacaceae (펜타필락스과)Eurya ciliata Collect Locality Thanh Hoa prov., Nhu Thanh distr., Hai Van comm. DiAB204-089 Polygalaceae (원지과) Xanthophyllum urophyllum DiAB203-02 Rosaceae (장미과) Pyrus calleryana Bac Kan, Cho Don, Bang Lung DiAB203-02- Rosaceae (장미과) Pyrus calleryana leaves Bac Kan, Cho Don, Bang Lung DiAB203-02-2 Rosaceae (장미과) Pyrus calleryana stems Bac Kan, Cho Don, Bang Lung DiAB203-040 Rosaceae (장미과) Eriobotrya cavaleriei Da Nang prov., Hoa Vang distr., Hoa Ninh comm. DiAB203-007 Rubiaceae (꼭두서니과) Ixora varians DiAB203-026 Rubiaceae (꼭두서니과) Mussaenda dehiscens Bac Kan, Cho Don, Quang Bach DiAB203-026- Rubiaceae (꼭두서니과) Mussaenda dehiscens leaves Bac Kan, Cho Don, Quang Bach DiAB203-026-2 Rubiaceae (꼭두서니과) Mussaenda dehiscens stems Bac Kan, Cho Don, Quang Bach DiAB203-033 Rubiaceae (꼭두서니과) Cephalanthus angustifolius aerial parts DiAB203-034 Rubiaceae (꼭두서니과) Lasianthus langkokensis DiAB203-037 Rubiaceae (꼭두서니과) Guettarda speciosa DiAB204-088 Rubiaceae (꼭두서니과) Chassalia curviflora DiAB203-032 Sapindaceae (무환자나무과) Amesiodendron chinense DiAB203-049 Sapotaceae (산람과) Planchonella clemensii Quang Binh, Quang Ninh, Truong Son Da Nang prov., Hoa Vang distr., Hoa Ninh comm. Quang Binh, Quang Trach, Viet Trung town Ha Tinh prov., Ky Anh distr., Ky Son comm. DiAB203-03 Symplocaceae (노린재나무과) Symplocos adenophylla DiAB203-003 Theaceae (차나무과) Eurya cerasifolia Bac Can, Na Ri DiAB202-4 Thymeleaceae (서향나무과) Linostoma decandrum leaves and DiAB203-03 Verbenaceae (마편초과) Vitex ajugaeflora DiAB203-02 Violaceae (제비꽃과) Rinorea anguifera Quang Tri, Huong Hoa 였다. 추출에 이용한 에탄올 및 그 외 시약은 급 및 특급 시약을 사용하였다. In vitro에서 최종당화산물 생성저해 실험 Vinson과 Howard 2) 의 방법을 변형하여 실험을 실시하였다. 본 실험 에서는 mg/ml의 우혈청 알부민(bovine serum albumin, Sigma)을 0.2 M phosphate buffer(ph 7.4)에 용해시키고, 0.2 M의 fructose와 glucose를 처리하였다. 이 때 0.2 M phosphate buffer에 0.02% sodium azide를 넣어 반응기간 동
276 Kor. J. Pharmacogn. 안 박테리아의 생성을 방지하였다. 이 반응액에 추출물 또 는 최종당화산물 생성저해제인 aminoguanidine을 넣은 후 37 o C에서 7일 동안 반응시켰다. 이때 시료의 IC 0 값을 구하 기 위해, 2.,,, 2, 0, 7 µg/ml의 7개 농도에서 실 험 하였다. 배양 후에는 spectrofluorometric detector(bio- TEK, Synergy HT, USA)를 이용하여 형광도를 측정하였다 (Ex.: 30, Em.: 40 nm). 추출물의 최종당화산물 생성 저해 활성 효과는 최종당화산물 생성 저해 활성(%) = 0 {(배양한 시료 형광도 배양하지 않은 시료 형광도) 0/ (배양한 시료 형광도 배양하지 않은 시료 형광도)의 평 균(n=3)} 의 수식에 따라 산출하였다. 최종당화산물 생 성 저해 활성 분석은 3반복을 회로 하여 3회 이상 반복 하였으며, 통계처리는 평균±표준오차(mean±SE)로 표기하 였다. 결과 및 고찰 최근 당뇨병성 만성 합병증의 발생이 증가함에 따라 당뇨 합병증의 원인 중 하나인 최종당화산물의 생성 억제제가 당 뇨합병증의 예방 및 치료제로 제시되었다. 22,23) 대표적인 최 종당화산물 억제제인 aminoguanidine은 독성 문제가 제기 되어 독성이 없는 안정한 천연물의 검색을 위해 많은 연구 들이 진행되고 있다. 24,2) 본 연구팀은 최종당화산물 생성을 강력하게 억제하는 천연물 소재를 발굴하기 위하여 많은 천 연소재들의 효능을 검색 발표하였다. -20) 본 연구에서도 베트남에서 자생하는 약용식물 80종의 에 탄올 추출물을 이용하여 최종당화산물 생성 저해 효능을 측 정하였다. 양성 대조 약물인 aminoguanidine의 IC 0 값 (76.47±4.8 µg/ml)을 근거로 하여, 추출물이 IC 0 : <0 µg/ml 이면 효능이 있다고 판단하였다. 24종의 식물 추출물이 IC 0 : < µg/ml로 최종당화산물 생성 저해 효능을 보였고, 그 중 에서 종의 추출물 Strobilanthes pateriformis의 지상부 (3.8±0. µg/ml), Rhodamnia dumetorum의 소지(3.88±0. µg/ml), Glochidion rubrum의 소지(2.38±0.0 µg/ml), Dipterocarpus obtusifolius의 소지(4.±0. µg/ml), Bombax ceiba의 소지(4.±0.0 µg/ml), Amesiodendron chinense의 소지(4.68±0. µg/ml), Bauhinia coccinea의 소지(3.93±0.0 µg/ml), Lithocarpus laouanensis의 소지(4.6±0.2 µg/ml), Bauhinia bracteata의 소지(4.6±0.2 µg/ml), Connarus paniculatus의 소지(2.7±0.3 µg/ml)는 IC 0 가 µg/ml 이하로 aminoguanidine보다 약 6-3배 이상의 우수한 효능을 보 였다. 도금양과의 R. dumetorum의 소지와 뿌리는 HepG2 cell 과 Vero cell에 대해 세포 독성이 있다고 보고되었다. 26) 대 극과의 G. rubrum는 복통 및 다양한 질병에 사용되었다고 기록되어 있으며, 27) 가수분해성 타닌인 glochiin M, glochiin M 2, glochiin C 과 lignan, neolignan glucoside, tachioside 2 -O-4 -methylgallate가 함유되어 있다고 보고되었다. 28,29) 이 엽시과의 D. sifolius의 줄기에서 발견된 새로운 terpene은 암세포에 증식 억제 효과가 있다고 보고되었다. 30) 판야과의 B. ceiba의 잎에서 새롭게 발견된 C-glycoside이 동물모델에 서 혈압강하와 저혈당 활성이 있다고 보고되어 최종당화산 물 생성 억제제로써 개발 가치가 매우 높다고 사료된다. 3,32) 줄기에서 분리한 shamimicin 또한 동물모델에서 혈압을 강 하시킨다고 보고되었다. 33) 또한 당뇨모델 쥐에서 혈당을 강 하시키고, 혈중지질을 감소시켜 항당뇨활성을 나타낸다고 보고되었다. 34) 꽃의 추출물은 isoniazid와 rifampicin로 유도 된 간독성에 대해 간보호 효과가 있으며, 3) 다양한 phenolic 성분들이 함유되어 있어 phytochemcal로서 항산화효과가 있 다고 보고되었다. 36-38) 또한 옥살산칼슘 요로결석증에 대한 위험을 감소시킨다고 보고되었다. 39) 쥐꼬리망초과의S. pateriformis, 무환자나무과의 A. chinense, 실거리나무과의 B. coccinea, 참나무과의 L. laouanensis, 실거리나무과의 B. bracteata, 콘나루스과의 C. paniculatus는 효능 및 성분에 관한 연구가 진행된 바 없으며, 위 언급된 종의 약용 식 물은 최종당화산물 생성 억제 효능이 보고된 바 없으며, 양 성 대조 약물 보다 6-3배 이상 최종당화산물 생성 억제 효능이 우수한 것으로 확인되었으므로, 전임상 실험을 통해 in vivo효능 확인이 필요하다고 생각된다. 본 연구 결과는 베트남 약용식물로부터 안전하고 효능이 좋은 최종당화산 물 생성 저해제 후보를 발굴하기 위한 기초 자료로 활용될 수 있으며, 당뇨에 의해 나타나는 합병증 치료제 개발의 기 반을 구축하는데 기여할 수 있을 것이다. 결 기원이 확인된 베트남 약용식물 80종의 에탄올 추출물을 대상으로 in vitro에서 최종당화산물 생성저해 효능을 검색 하였다. 그 결과 24종이 양성대조군인 aminoguanidine 보다 우수한 효능이 있음을 확인하였고, 특히 S. pateriformis의 지상부, R. dumetorum의 소지, G. rubrum의 소지, D. obtusifolius의 소지, B. ceiba의 소지, A. chinense의 소지, B. coccinea의 소지, L. laouanensis의 소지, B. bracteata의 소 지, C. paniculatus의 소지의 종의 추출물은 양성대조군 (aminoguanidine: IC 0 : 76.47±4.8 µg/ml) 보다 6-3배 억 제 효능이 우수하므로 당뇨합병증 예방 및 치료제로 가능 성이 있다고 판단하였다. 사 본 연구는 한국한의학연구원 기관고유사업(K4040, K270)의 지원으로 수행되었으며 이에 감사드립니다. 론 사
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