J Koren So Foo Si Nutr 한국식품영양과학회지 36(12), 1511~1516(2007) DOI: 10.3746/jkfn.2007.36.12.1511 두충차추출물의 Angiotensin Converting Enzyme 저해효과 손미예 1 남상해 2 1 경상대학교식품영양학과 2 진주산업대학교식품과학과 Inhiitory Effets of Euommi ulmoies Extrt on Angiotensin Converting Enzyme Mi Ye Shon 1 n Sng He Nm 2 1 Dept. of Foo Siene n Nutrition, Gyeongsng Ntionl University, Jinju 660-701, Kore 2 Dept. of Foo Siene, Jinju Ntionl University, Jinju 660-758, Kore Astrt To ssess potentil possiility of Euommi ulmoies (EU) s funtionl foo, nti hypertensive mterils of EU were isolte y sili gel olumn, thin lyer n reverse phse olumn hromtogrphies, n then ACE (ngiotensin onverting emzyme) inhiitory tivities of ifferent prts (lef, rk, n stem) were investigte. The isolte ompoun, 8A, ws pinoresinol 4,4' i O β D gluosie (elow PDG) originting from Euommil Cortex n its purity ws 95.64%. Of ll the smples teste, PDG in rw rk n roste rk ws the highest level t 135.13 mg% n 163.67 mg%, respetively. In ACE inhiitory tivity t 10 mg/ml of EU extrts, roste lef, rw rk, n roste rk were 77.56%, 75.73%, n 75.73%, respetively. ACE tivities t 1 mg/ml were shown to e 91.87% for PDG, 97.06% for Enlpril R, n 90.32% for Cptopril R. Key wors: Euommi ulmoies, pinoresinol-4,4'-i-o-β-d-gluosie (PDG), ACE inhiitory tivity 서론고혈압은대표적성인병의하나로순환기계통질병의근원이되는만성퇴행성질환으로노인인구가증가할수록발병율이증가하고있다. 고혈압은뇌출혈, 심장병, 신장병등과합병증으로나타날경우치사율이높아암, 심장병과함께 3대사망원인중의하나이다. 대부분의고혈압은원인불명으로알려져있는데, 이를본태성고혈압 (primry or spontneous hypertension) 이라고하며약물치료가요구된다 (1). 사람의경우에는식이중염분섭취량, 육체적인작업, 비만과스트레스등의환경적인요인뿐만아니라사회, 문화적또는행동적요인이본태성고혈압발현에중요한역할을한다 (2). 특히고혈압의원인은 renin-ngiotensin 계가중요한역할을하고있는것으로보고되어있으며, 여기에는 ngiotensin Ⅰ onverting enzyme[ec 3.4.15.1, ACE: peptiylipeptie hyrolse] 이라는효소가관여하고있는것으로알려져있다 (3). 생체중에존재하는불활성형의 ngiotensin Ⅰ은 ACE에의해 ipeptie가떨어져나감으로써혈관벽수축작용이있는 ngiotensin Ⅱ로전환되며, 생체내혈압강하인자인 rykinin을불활성화시킴으로써혈압이 상승하게된다. 특히식품의생체조절기능에서혈압상승원인중에하나인 ngiotensin onverting enzyme(ace) 에대해저해작용이있다는것이알려지면서이에관해많은연구가진행되고있다 (4,5). ACE 억제제로서는화학합성제인에날라프릴 (enlpril) 및캡토프릴 (ptopril) 등이개발되어이용되고있으나, 이들은여러가지의신체부작용등이나타날수있으므로화학합성 ACE 억제제보다는천연물유래고혈압개선제의개발이절실히요구된다 (6). 현재까지천연항고혈압활성제는대체로펩타이드성물질과폴리페놀성물질이다수를차지하는것으로보고되어있다 (7-9). 식물체에함유되어있는생리활성성분들은대부분식물체의 2차대사산물로서생성되는데 flvonoi, lkloi, oumrin 및 plnt sterol 등이존재한다. 이들은매우적은양으로도생리활성을나타내는데 (10,11), 이러한생리활성성분들은 polyphenol류에속하는물질로서다양한생약재는물론과일과곡류등에서볼수있으며, 특히차에많이포함되어있으면서항고혈압등의생리활성을나타낸다고보고되어있다 (12). 특히식물성 ACE 저해활성에좋은생리활성물질들은비교적열에안정하여체내에흡수가용이한비교 Corresponing uthor. E-mil: shnm@jinju..kr Phone: 82-55-751-3274, Fx: 82-55-751-3279
1512 손미예 남상해 적저분자물질로항상섭취하는식품중에존재한다는관점에서예방의학적유용성이기대되고있다. 최근항고혈압생리활성을나타내는천연식품소재에관한연구로는대두와된장및카제인가수분해물 (13-15), 고등어와어육단백질, 우유카제인을비롯한동물단백질의펩타이드류 (16,17), 그리고차류, 마늘을포함한일반식물체자원 (8,9,18) 과헛개나무 (19), 숙지황 (20), 음양곽 (21), 인삼 (22,23) 등의각종생약재 (24-26) 에서가장많이보고되었으며, 기타발아메밀 (27), 키토올리고당 (28), 감태를포함한해조류 (6,29), 송엽과익모초 (30), 찔레영지버섯 (31) 등에관한연구들이있다. 한편두충 (Euommi ulmoies Oliver) 은두충나무과에속하는낙엽교목으로서원산지는중국으로알려져있으며, 우리나라에는 1926년에도입되었고약용가치가높아최근농가의특용작물로써전국적으로많이재배되고있다. 두충의약리작용으로강장, 진정, 진통작용등이알려져있고 (32), 혈압강하효과가있어고혈압등의질병을예방한다고알려져있으며 (33), 일부의작용에대하여는과학적인연구가수행되어있으나유효성분에관한연구는미진한상황이다. 본연구에서는지리산권지역에재배되는생약재중에항고혈압약리작용이있을것으로예상되는두충의기능성식품으로서이용가능성을평가하기위하여, 두충의항고혈압활성물질을분리및확인하였고, 각부위별 ( 잎, 껍질, 줄기 ) 추출물의활성관련물질의함량및 ACE 저해활성을조사하였다. 재료및방법시약및기기본연구에사용된시약은모두특급 (GR) 및 1급시약을사용하였으며, olumn hromtogrphy는 sili gel(70~ 230 mesh, Merk), Lihro-prep RP-18(40~63 μm, Merk) 를사용하였으며 preprtive TLC는 Kiesel gel 60 F plte(0.5 mm, Merk) 를사용하였다. 실험재료실험에사용한두충 (Euommi ulmoies Oliver) 은산청군두충재배농장으로부터공급받아사용하였다. 자연건조된두충의잎, 껍질, 줄기등을각각 10 kg씩을공급받아그중에서 5 kg씩은 200 o C의오븐에서볶은후에실험에사용하였다. 시료는잎 (LW, rw lef; LT, roste lef), 껍질 (BW, rw rk; BT, roste rk) 및줄기 (SW, rw stem; ST, roste stem) 로구분하였다. 추출및고혈압활성물질분리두충의부위별항고혈압활성물질의함량을정량하기위하여 Fig. 1과같이분리및정제를실시하였다. 즉두충의항고혈압활성물질로알려져있는 pinoresinol-4,4'-i-o-β 8/2/0.2 Fr.1 33 34 Fr.A Euommi ulmoies Olivers (1 kg) Wter extrts (58.75 g) Fr.B Boiling with 10 L of -wter for 1 hr, 3 times & onentrtion uner vuum Sili olumn hromtogrphy (Φ5 * H30 m), CHCl2/MeOH/wter=8/2/0.2~7/3/0.5 60 61 7/3/0.5 Fr.C Sili olumn hromtogrphy (Φ3 * H20 m), ACN/wter=9/1~0/10 G-1 G-2 G-3 G-4 G-5 G-6 G-7 G-8 Reverse phse olumn hromtogrphy (Φ1.8 * H16 m) ACN/wter=9/1 G 8 1 84 85 Fr.D G 8 2 G 8 4 98 99 Fr.E 111 112 G 8 8 Fr.F 140141 Fr.G 189 G 8 22 G 8 9 8A (Pinoresinol-4,4'-i-O-β-D-gluosie) Fig. 1. The isoltion proeure of pinoresinol 4,4' i O β D gluosie in Euommi ulmoies Oliver. -D-gluosie(PDG) 를분리하기위하여우선한방에서두충을고혈압치료에주로이용하고있는자연건조한껍질 (rw rk) 1 kg에 10 L의물을가하고 1시간동안끓여서 3회반복하여추출하였으며, 추출액을따로모아감압농축하여 58.75 g의 wter extrt 를얻었다. 이것을 CHCl 3/ MeOH/wter=8/2/0.2~7/3/0.5의용매조합으로 sili gel olumn hromtogrphy를실시한후 thin lyer hromtogrphy(tlc) 로서확인하여 7개의분획 (Fr. A~Fr. G) 을얻었다. 그중에서 Fr. G를다시 ACN/wter=9/1~0/10의용매조합으로 sili gel olumn hromtogrphy를실시한후 TLC로서확인하여 8개의분획 (G-1~G-8) 을얻었다. 다시분획 G-8을 ACN/wter=9/1의용매로 reverse phse olumn hromtogrphy를실시하여 22개의소분획 (G-8-1~G-8-22) 으로분리하였으며, 이를 TLC로서확인하여 G-8-4~G-8-8 을따로모아감압농축하여 pinoresinol-4,4' -i-o-β-d-gluosie(pdg) 로추정되는물질을확인하여 8A라고명명하였다 (Fig. 1). 분리된고혈압활성물질의동정 두충의부위별로 pinoresinol-4,4'-i-o-β-d-gluosie 함량을분석하기위한방법은다음과같다. 우선두충시료각 10 g씩을정확히칭량하여 100 ml의물을가하여 90~ 95 o C에서 2시간가열한후추출액을모았다. 이과정은 3회반복하여실시하였으며모은추출액을 rotry vuum evportor로서완전히농축하고나서 10 ml의 3차증류수에녹였으며, 이를 0.2 μm memrne filter 로서여과한후에 HPLC분석용시료로사용하였다. 그리고배당체 pinoresinol-4,4'-i-o-β-d-gluosie 의분석을위한 HPLC의분석조건은 Shimzu LC-10A, 칼럼 C 18 ODS(3.9 300
두충차추출물의 Angiotensin Converting Enzyme 저해효과 1513 결과및고찰 Fig. 2. The HPLC hromtogrm of 8A ompoun isolte from Euommi ulmois Oliver. mm), 이동상 etonitrile : wter = 70 : 30, 유속 1 ml/min, 검출기 UV 254 nm, 주입량 10 μl였으며, Fig. 2는분리한 8A 물질을 HPLC로서분석한 hromtogrm이다. ACE 억제활성측정 두충의부위별추출물과이로부터분리한 pinoresinol- 4,4'-i-O-β-D-gluosie 의항고혈압활성은 ngiotensin onverting enzyme(ace) 의활성을억제하는효능을검색하는방법 ( 이하 ACE ssy) 으로측정하였다. ACE ssy는 Cushmn과 Cheung(34) 및 Kim 등 (18) 의방법에의하여측정하였다. 즉 ACE 저해활성은 0.3 M NCl을함유한 0.1 M soium orte uffer(ph 8.3) 에 rit lung etone power (Sigm, USA) 를 1 g/10 ml(w/v) 의농도로 4 o C에서 2시간동안추출한후, 원심분리 (4 o C, 4,000 rpm, 40 min) 하여 ACE 조효소액을얻었다. ACE 저해활성은 0.1~10 mg/ml의농도로조제한시료및 positive ontrol에 0.1 M soium orte uffer(ph 8.3) 100 μl와 ACE 조효소액 50 μl를가한다음 37 o C에서 5분동안예비반응을시킨후, 0.3 M NCl이함유된 0.1 M soium orte uffer(ph 8.3) 5 ml에 HHL (hippuryl-histiyl-leuine) 25 mg을첨가하여만든기질 50 μl를첨가하여 37 o C에서정확히 30분간반응을시켰다. 이에 1 N HCl 250 μl를첨가하여반응을정지시킨후, ethylette 1.5 ml을가해 15초동안교반한후원심분리 (3,000 rpm, 5 min, 4 o C) 하여상등액 1 ml을얻었다. 이상등액을완전히건조시켜증류수 3 ml을넣은후에 228 nm에서흡광도를측정하여 ACE 저해활성을측정하였다. 대조구는추출물대신에추출용매를 50 μl 가해실험하였으며, ACE 저해활성효과는다음의계산식을이용하여산출하였다. 이실험에사용한 positive ontrol은현재병원에서고혈압환자에게투약하고있는 Cptopril R ( 보령제약 ) 과 Enlpril R ( 보령제약 ) 을구입하여시료와그활성을비교하였으며모든실험은 3회반복하여시행하였다. ACE 억제활성율 (%)=(1-ACE test/ace ontrol) 100 두충에서항고혈압의물질분리 고혈압치료에이용하는자연건조한두충껍질에 10배정도의물을가하고 1시간동안열수추출하여 3회반복한전체추출액을감압농축하여 58.75 g의 wter extrt 를얻은후, sili gel olumn hromtogrphy, thin lyer hromtogrphy(tlc), reverse phse olumn hromtogrphy를순차적으로실시하여각각의소분획으로분리ㆍ확인과정을통하여 pinoresinol-4,4'-i-o-β-d-gluosie(pdg) 로추정되는물질약 16 mg을분리ㆍ정제하였다 ( 실험방법참조 ). 그결과로 Fig. 2의 HPLC hromtogrm에나타낸바와같이두충에서분리한항고혈압활성을갖는 8A 물질의순도는 95.64% 로서상당히순수한상태까지분리ㆍ정제되었음을알수있었다. 두충부위별물추출물의수득율및 PDG 의함량 두충의각부위별물추출물의수득율및 PDG 함량은 Tle 1과같다. 표에서나타난바와같이두충생시료의물추출물수득율은 5.02~5.36% 범위로큰차이가없었으며, 그리고볶은두충의경우잎과껍질은각각 5.87% 와 6.01% 로서줄기의 5.22% 에비하여약간높은수득율을나타내었다. 이는가열에의하여불용성고분자화합물로부터유리되어각부위별물추출에약간용이한것으로생각되었으며 (35), 대체로생약재는그구성성분들이상당히차이가나타나기때문에, 그에따른물추출의경우에도각각의수율이 0.3~5.9 o Brix까지다양한것으로보고되어있다 (25). 또한두충의부위별로 PDG 함량은자연건조상태의껍질및볶은껍질에서각각 135.13 mg%, 163.67 mg% 로서잎과줄기에비하여껍질에서가장높은함량을나타내었으며, 이는자연건조두충껍질이그잎 85.14 mg% 와줄기 70.49 mg% 에비하여각각 1.59배, 2.17배높은함량이었고, 볶은두충껍질은그잎 69.72 mg% 와줄기 106.37 mg% 에비하여각각 2.35배, 1.54배높은함량이었다. 특히두충은볶음공정 Tle 1. Pinoresinol 4,4' i O β D gluosie (PDG) on tents in ifferent prts of Euommi ulmoies Oliver nlyze y HPLC Smples 1) LW LT BW BT SW ST Yiels of wter extrts (%, w/w) 5.36±0.009 2)3) 5.87±0.030 5.26±0.011 6.01±0.011 5.02±0.014 5.22±0.024 PDG ontents (mg%, w/w) 85.14±0.018 69.72±0.457 e 135.13±0.025 163.67±0.352 70.49±0.016 f 106.37±0.206 1) LW: rw lef, LT: roste lef, BW: rw rk, BT: roste rk, SW: rw stem, ST: roste stem. 2) Vlues re given s men±sd (n=3). 3) Mens in the sme olumn followe y ifferent letters re signifintly ifferent (p<0.05).
1514 손미예 남상해 을통하여혈압강하효과를나타내는생리활성물질인 PDG 의함량이껍질과줄기에서유의적으로각각 1.21배, 1.51배증가는경향을나타내었으나잎은오히려 18% 감소하였다. Tkmur 등 (36) 은녹색두충잎의주요천연물질로 geniposii(2.53%), uuin(2.99%), hlorogeni i(0.16%) 등이많이함유되어있으며, 녹색잎이열처리한볶은잎보다그함량이높다고보고하였다. 본실험에서도볶음공정을통하여두충잎은 PDG 함량이약간감소현상을나타내었는데, 두충껍질과줄기의경우는잎에비하여열처리에의하여그함량이오히려증가되었다. 이는잎과줄기및껍질의목질부조직특성과열처리에의한불용성고분자화합물로부터유리형화합물로전환등에차이로생각되지만 (35), 추후두충부위별전처리공정에따른주요성분들의변화를구체적으로조사하고자한다. 두충부위별추출물의항고혈압활성두충의부위별로추출한시료의항고혈압활성을검색한결과는 Fig. 3과같다. Fig. 3에서나타난바와같이추출물의처리농도별 ACE 저해활성은 10 mg/ml 씩을처리하였을때에는두충잎과껍질에서각각 72.70~77.56%, 75.68~ 75.73% 범위로비슷한활성을나타내었으나, 줄기에서는 46.80~53.19% 로서비교적낮은저해활성을나타내었다. 또한 5 mg/ml 처리하였을때에는잎과줄기에서는큰변화가없었으나, 껍질에서는항고혈압활성 ( 자연건조껍질 45.62%, 볶은껍질 12.09%) 이 10 mg/ml에서보다각각 60.25, 15.98% 까지저하되었으며, 1 mg/ml 처리하였을때모든시료의저해활성평균은 28.05% 로서, 그저해활성범위가낮은볶은껍질 4.68% 에서높은볶은잎 52.23% 범위로다른부위에비하여추출물농도저하에따라활성이현저하게떨어지는것을알수있었다. 한편이상의결과에서두충의부위별 ACE 저해활성은 10 mg/ml 농도에서잎과껍질이높았고, 줄기는상대적으로저해활성이낮았는데, 두충의대표적인혈압강하물질 PDG 함량과는다소일치하지않은부분이있었다. 특히두충잎에는본연구에서분리한 PDG 이외에플라보노이드화합물인 isoqueritrin을포함한각종알칼로이드와배당체화합물등이함유되어있어 (37,38), 두충잎추출물의경우에는그껍질과줄기의추출물에비하여항고혈압활성이다소높게나타난것으로생각된다. 그리고 Kwski 등 (39) 은두충잎은 polyphenolis, flvonois, triterpins 등도많이함유하고있어항고혈압활성이높다고하였으며, 또한 Nkmur 등 (40) 은두충잎에 12가지의 phenolis, Tnk 등 (41) 은 triterpenoi를함유한다는보고를하였다. 이런점을고려하여두충의항고혈압기능성을갖는음료화를위해서껍질은자원재생산이라는점에서어려움점이많기때문에자원이용측면에서두충잎을이용하는방법도여러가지건강기능성음료개발에유리한점으로작용될것으로판단된다 (37). 그리고 Lee 등 (19) 은헛개나무 (Hoveni ulis) 의물추출물 4 mg/ml 농도에서 ACE 저해활성이 75.8% 로보고하였고, Ahn 등 (20) 은건지황과숙지황에탄올추출물 1 g/l 농도에서각각 55.24%, 56.58% 로보고하였으며, 그리고 Do 등 (25) 은 32가지생약재의물추출물을동결건조한시료를 10 mg/ml 농도에서 ACE저해작용은파고지 (Psorle orylifoli) 가 65.2% 의억제율로가장좋았으며, 다음으로소목 (Ceslpini sppn) 과죽엽 (Phyllosthys nigr) 이좋았다고하였다. PDG의항고혈압활성두충에서분리한 8A(pinoresinol-4,4'-i-O-β-D-glu- ACE inhiition rte (%). 100 80 60 40 20 0 e f e 10 mg/ml 5 mg/ml 1 mg/ml LW LT BW BT SW ST f e ACE inhiition rte (%). 150 100 50 0 Cptopril Enlpril 8A 10 mg/ml 5 mg/ml 1 mg/ml Fig. 3. ACE inhiition effets of extrts from the rw n roste Euommi ulmoies Oliver lef, rk n stem. LW: rw lef, LT: roste lef, BW: rw rk, BT: roste rk, SW: rw stem, ST: roste stem. ACE: ngiotensin onverting enzyme. Vlues re given s men±sd (n=3). Mens in the sme olumn followe y ifferent letters re signifintly ifferent (p<0.05). Fig. 4. ACE inhiition effet of 8A (pinoresinol 4,4' i O β D gluosie) isolte from Euommi ulmoies Oliver. Antihypertensive rugs from Boryung Phrmy (Cptopril) n DongKwng (Enlpril) Phrm. Co. Lt., Seoul, Kore. Mteril (8A) isolte from Euommi ulmoies Oliver in this stuy. Vlues re given s men±sd (n=3). Mens in the sme olumn followe y ifferent letters re signifintly ifferent (p<0.05).
두충차추출물의 Angiotensin Converting Enzyme 저해효과 1515 osie) 의항고혈압활성을알아보기위하여병원에서고혈압환자에게투약하고있는 Cptopril R ( 보령제약 ) 및 Enlpril R ( 동광제약 ) 과그혈압강하활성을비교한결과를 Fig. 4에나타내었다. 동일한농도를처리하였을때혈압강하활성을비교하여보면, 1 mg/ml 처리에서분리물질 8A의활성은 91.87% 로서 Enlpril R 의 97.24% 보다는조금낮았지만, Cptopril R 의 90.32% 보다약간높은항고혈압활성을나타내었다. 그리고 8A 성분의농도를 0.5 mg/ml 및 0.1 mg/ml 로처리한실험에서도 8A는 Cptopril R 보다높은 74.29%, 68.57% 의억제율을나타내었다. 이상에서언급한두충의혈압강하작용은오래전부터민간요법으로사용되어왔으며, 동물실험및임상실험으로입증되고있다. 특히두충추출물을토끼 (34) 및쥐 (42) 의혈압강하작용에대한실험에서혈압이높은실험동물들이현저히혈압이낮아진다는결과가보고되어있으며, 사람을대상으로한임상실험의결과에도두충함유음료수를섭취한그룹에서혈압강하작용이유효하다는보고가있다 (43). 그러나대부분은두충의추출물에대한활성탐색에관한결과로서, 고혈압예방에유용한활성물질개발의기초자료로는미비하였으며, 본실험을수행한결과로활성물질개발의기초자료로서활용성이기대된다. 또한앞으로활성물질에대한순도확인과실험이수행되어야하며, 동물모델을이용한효능검증이추가적으로수행되어야할것으로사료된다. 요약두충의기능성식품으로서이용가능성을평가하기위하여, 두충의항고혈압활성물질을분리및확인하였고, 각부위별 ( 잎, 껍질, 줄기 ) 추출물의관련물질의함량및 ACE 저해활성을조사하였다. 두충에서분리한항고혈압성물질로추정되는 8A는순도 95.64% 의 pinoresinol-4,4'-i-o-β -D-gluosie(PDG) 로서자연건조및볶은껍질에서가장높았으며, 각각 135.13 mg% 와 163.67 mg% 였다. 또한두충추출물의 ACE 저해활성은 10 mg/ml 농도로처리하였을때볶은잎, 자연건조껍질및볶은껍질에서각각 77.56%, 75.73%, 75.73% 로높은활성을나타내었으며, 줄기는상당히낮게나타났다. 두충에서분리한 PDG를 1 mg/ml 처리할때, ACE 저해활성은 91.87% 로서 Enlpril R 의 97.06% 보다는조금낮았지만, Cptopril R 의 90.32% 보다는약간높은항고혈압활성을나타내었다. 감사의글본연구는 2006년산청군약초신활력사업비지원에의해수행된연구결과의일부로이에감사드립니다. 문 1. Nkmur T, Nkzw Y, Onizuk S, Stoh S, Chi A, Sekihshi K, Miur A, Ysughr N, Sski Y. 1997. Antimutgeniity of Tohu te: 1. The lstogen-suppressing effet of Tohu te in CHO ells n mie. Mutt Res 388: 7-20. 2. Sski Y, Stoh S, Chi A, Murkmi M, Sekihshi K, Tnk M, Moriyshi N, Kuou C, Hr Y, Nkzw Y, Nkmur T, Onizuk O. 1996. Antimutgeniity of Tohu te: 2. Suppressing effet of Tohu te. Mutt Res 387: 203-214. 3. Eros EG. 1975. Angiotensin-onverting enzyme. Cirultion Reserh 36: 247-255. 4. Knnel WB, Dwer TR, Sorli P. 1976. Components of loo pressure n risk of throthromoti rin infrtion. Stroke 7: 327-331. 5. Kirkenll WM, Notteohm GA. 1977. Hypertension physiopthology n tretment. In Essentil Hypertension. MGrw-Hill, New-York, USA. p 674-692. 6. Hong JH, Son BS, Kim BK, Chee HY, Song KS, Lee BH, Shin HC, Lee KB. 2006. Antihypertensive effet of Ekloni v extrt. Kor J Phrmogn 37: 200-205. 7. Ymmoto N. 1997. Antihypertensive pepties erive from foo proteins. Biopolymer 43: 129-134. 8. Hr Y, Mtsuzki M, Suzuki T. 1987. Angiotensin-Ⅰ -onverting enzyme inhiiting tivity of te omponents. Nippon Nogeikgku Kishi 61: 803-808. 9. Do JR, Kim SB, Prk YH, Kim DS. 1993. Angiotensin-Ⅰ -onverting enzyme inhiitory tivity y the omponents of tritionl te mterils. Koren J Foo Si Tehnol 25: 456-460. 10. Golovinsky EV, Mnev LS, Angelov II, Veljnov KD, Sniker DJ, Stnkevih EK. 1976. Antiteril n ntitumor tivity of some erivtives of ureiosuini i. Neoplsm 23: 43-46. 11. Ayres HM, Pyne DN, Furr JR, Russell AD. 1998. Use of Mlthus-AT system to sses the effiy of permeilizing gents on the tivity of ntiteril gents Pseuomons eruginos. Lett Appl Miroiol 26: 422-426. 12. Hung Y, Zhng A, Lu CW, Chen ZY. 1998. Vsorelxnt effets of purifie green te epitehin erivtives in rt mesenteri rtery. Life Si 63: 257-283. 13. Kim HS, In YM, Jeong SG, Hm JS. 2002. Antihypertensive effets of sein hyrolyste in spontneously hypertensive rts. J Anim Si Tehnol 44: 483-490. 14. Suh HJ, Kim YS, Chung SH, Kim YS, Lee SD. 1996. Funtionlity n inhiitory effet of soyen hyrolyste on ngiotensin-onverting enzyme. Koren J Foo Nutrition 9: 167-175. 15. Shin ZI, Ahn CW, Nm HS, Lee HJ, Lee HJ, Moon TH. 1995. Frtiontion of ngiotensin-onverting enzyme (ACE) inhiitory pepties from soyen pste. Koren J Foo Si Tehnol 27: 230-234. 16. Do JR, Heo IS, Jo JH, Kim DS, Kim HK, Kim SS, Hn CK. 2006. Effet of ntihypertensive pepties originte from vrious mrine proteins on ACE inhiitory tivity n systoli loo pressure in spontneously hypertensive rts. Koren J Foo Si Tehnol 38: 567-570. 17. Do JR. 2000. Seprtion n purifition of ngiotensin I-onverting enzyme inhiitory peptie from mkerel. J Koren Fish So 33: 153-157. 18. Kim KJ, Do JR, Kim HK. 2005. Antimiroil, ntihypertensive n ntiner tivities of grli extrts. 헌
1516 손미예 남상해 Koren J Foo Si Tehnol 37: 228-232. 19. Lee SE, Bng JG, Seong NS. 2004. Inhiitory tivity on ngiotensin onverting enzyme n ntioxint tivity of Hoveni ulis Thun. Cortex extrt. Koren J Meiinl Corp Si 12: 79-84. 20. Ahn SW, Kim YG, Kim MH, Lee HY, Seong NS. 1999. Comprison of iologil tivities on Rehmnni rix n R. rix Preprt proue in Kore. Koren J Meiinl Corp Si 7: 257-262. 21. Choi HI, Lee SI, Ahn DK, Kim HC. 1997. A stuy on the ntihypertensive effet of Epimeii her. J Herology 12: 35-44. 22. Lee SE, Seong NS, Bng JG, Kng SW, Lee SU, Jeong TY. 2003. Inhiitory effet ginst ngiotensin-onverting enzyme n ntioxint tivity of Pnx ginseng C.A. Meyer extrts. Koren J Meiinl Corp Si 11: 236-245. 23. Choi HJ, Zhng YB, An BJ, Choi C. 2002. Ientifition of iologilly tive ompouns from Pnx ginseng C.A. Meyer. Koren J Foo Si Tehnol 34: 493-497. 24. Choi GP, Chung BH, Lee DI, Lee JH, Kim JD. 2002. Sreening of inhiitory tivities on ngiotensin onverting enzyme from meiinl plnts. Koren J Meiinl Corp Si 10: 399-402. 25. Do JR, Kim KJ, Jo JH, Kim YM, Kim BS, Kim HK, Lim SD, Lee SW. 2005. Antimiroil, ntihypertensive n ntiner tivities of meiinl hers. Koren J Foo Si Tehnol 37: 206-213. 26. Kim HC, Prk JY, Ahn DK. 2006. Anti-hypertensive effets of expelling pthogeni win-het rugs. Kor J Herology 14: 141-147. 27. Lee JS, Prk SJ, Sung KS, Hn CK, Lee MH, Jung CW, Kwon TB. 2000. Effets of germinte-ukwhet on loo pressure, plsm gluose n lipi levels of spontneously hypertensive rts. Koren J Foo Si Tehnol 32: 206-211. 28. Hong SP, Kim MH, Oh SW. 1998. ACE inhiitory n ntihypertensive effet of hitosn oligoshries in SHR. Koren J Foo Si Tehnol 30: 1476-1479. 29. Lee HO, Kim DS, Do JR, Ko YS. 1999. Angiotensin-I onverting enzyme inhiitory tivity of lge. J Koren Fish So 32: 427-431. 30. Prk KK, Ryu JW, Choi EK, Ro HS. 2000. Anti-hypertensive effets of Pini folium n Leonuri her extrt on spontneously hypertensive rt (SHR). Koren J Meiinl Corp Si 8: 27-31. 31. Song JH, Lee HS, Hwng JK, Chung TY, Hong SR, Prk KM. 2003. Physiologil tivities of Phellinus riis extrts. Koren J Foo Si Tehnol 35: 690-695. 32. Sok T. 1985. Enylopei of Chinese Drugs. Shnghi Siene & Tehnolgy Press, Shogkukn, Tokyo, Jpn. Vol 3, p 1964-1966. 33. Chung MH, Prk CW. 1975. Influene of Euommil Cortex of Kore on the loo pressure response of rits. Kor J Phrmog 6: 39-42. 34. Cushmn DW, Cheung HS. 1971. Spetrophotometri ssy n properties of the ngiotensin-onverting enzyme of rit lung. Biohem Phrmol 20: 1637-1648. 35. Ch JY, Kim HJ, Chung CH, Cho YS. 1999. Antioxitive tivities n ontents of polyphenoli ompouns of Curni triuspit. J Koren So Foo Si Nutr 28: 1310-1315. 36. Tkmur C, Hirt T, Ymguhi Y, Ono M, Miyshit H, Ike T, Nohr T. 2007. Stuies on the hemil onstituents of green leves of Euommi ulmoies Oliv. J Nt Me 61: 220-221. 37. Lee SY. 2003. Development of mixe Euommi ulmoies everge n nlysis of voltile flvor ompouns. MS Thesis. Duksung Women's University, Seoul, Kore. p 3-7. 38. Prk SJ, Kim MB. 1996. Effets of ietry supplementtion of Euommi ulmoies Oliver leves on performne n met qulity in roiler hiks. Koren J Poult Si 23: 71-76. 39. Kwski T, Uezono K, Nkzw Y. 2000. Antihypertensive mehnism of foo for speifie helth use: 'Euommi lef glyosie' n its linil pplition. J Helth Si 22: 29-36. 40. Nkmur T, Nkzw Y, Onizuk S, Tnk C, Yhr S, Nohr T. 1998. Twelve phenolis from leves of Euommi ulmoies. Nt Me 52: 460-465. 41. Tnk C, Nkmur Y, Nohr T. 1997. A new triterpenoi from the leves of Euommi ulmoies Oliv. Chem Phrm Bull 45: 1379-1380. 42. Nkzw Y, Ogiri N, Imi R, Yoshii T, Tgshir E, Nkt C, Nkmur T, Asumi M, Onizuk S, Yhr S, Nohr T. 1997. Effet of Euommi lef (Euommi ulmoies Oliver lef; Du-Zhong yge) extrt on loo pressure (Ⅰ). J Nt Me 51: 392-398. 43. Metori K, Furutsu M, Tkhshi S. 1997. The prevention effet of ginseng with Du-zhong lef extrt on plsm n protein metolism in ging. Biol Phrm Bull 20: 237-242. (2007 년 9 월 27 일접수 ; 2007 년 12 월 7 일채택 )