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은주 엄
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1 J Koren So Foo Si Nutr 한국식품영양과학회지 45(2), 167~173(2016) 고지방식이와저용량스트렙토조토신으로유도된 2 형당뇨병흰쥐에서녹차폴리페놀과비타민 C 병합투여효과 이병래 1 양훈 1 박평심 2 1 조선대학교의과대학생화학분자생물학교실 2 조선이공대학교식품영양조리과학과 Effets of Green Te Polyphenol n Vitmin C on Type 2 Dieti Rts Inue y Low Dose Streptozotoin Following High Ft Diet Byoung-Ri Lee 1, Hoon Yng 1, n Pyoung-Sim Prk 2 1 Deprtment of Moleulr Biology & Biohemistry, College of Meiine Chosun University 2 Deprtment of Foo Nutrient n Culinry, Chosun College of Siene & Tehnology ABSTRACT This stuy investigte the effets of green te polyphenol n vitmin C on type 2 ietes mellitus y ministering polyphenon 60 (P60) n soium sorte (SA) to ieti rts inue y high ft iet/low-ose streptozotoin. The experimentl group ws ivie into five ifferent groups: non-ieti ontrol group (NC), ietes ontrol group (DC), ietes+p60 group (DM+P60), ietes+sa group (DM+SA), n ietes+p60+sa group (DM+P60+SA). P60 n SA were issolve in 0.1% rinking wter. After P60 n SA were ministere for 16 weeks, fsting loo gluose, plsm insulin, serum triglyerie, loo ure nitrogen (BUN), n retinine levels s well s kiney lkline phosphtse (AP) n γ-glutmyltrnspeptise (GGT) tivities were mesure. Fsting loo gluose level inrese 5-fol in the DC group ompre to the NC group. In the DM+P60 group, fsting loo gluose level erese y 14%. In the DM+P60+SA group, fsting loo gluose level erese y 28% ompre to the DC group, wheres the DM+SA group i not show ny signifint ifferene. The homeostsis moel ssessment for insulin resistne inex inrese in the DC group n erese in the DM+P60+SA group ompre to the DC group. Serum retinine level inrese in the DC group, ut erese y 17% in the DM+P60 group n y 43% in the DM+P60+SA group ompre to the DC group. The serum BUN level inrese in the DC group, ut erese y 41% in the DM+P60+SA group ompre to the DC group. Kiney GGT n AP tivities erese in the DC group ompre to the NC group; however, they were reverse y DM+P60+SA group. These results show tht omine ministrtion of oth green te polyphenol n vitmin C h etter effets on improving loo gluose level, insulin resistne, serum triglyerie level, n proteting kineys thn ministrtion of either green te polyphenol or vitmin C lone in the ontext of type 2 ietes. Key wors: type 2 ietes, green te polyphenol, vitmin C 서 당뇨병은만성대사성질환으로서세계적으로환자수가계속증가하고있는데, 국제당뇨병연맹 (IDF) 의통계에의하면 2013년당뇨병환자수는 3.8억명정도로추정되며, 2035년에는 5.9억명정도로증가할것으로예상한다 (1). 당뇨병환자의증가는대부분 2형당뇨병에의한것으로 2 형당뇨병은인슐린비의존형당뇨병으로서인슐린저항성, 인슐린분비이상및인슐린분비세포의 poptosis 및간 Reeive 30 Septemer 2015; Aepte 23 Novemer 2015 Corresponing uthor: Pyoung-Sim Prk, Deprtment of Foo Nutrient n Culinry, Chosun College of Siene & Tehnology, Gwngju 61453, Kore E-mil: psprk@st..kr, Phone: 론 포도당생성증가등의원인에의한혈당조절의이상과관련이있는것으로알려졌다 (2). 당뇨병환자에게혈당조절을위해사용되는경구용혈당강하제는 sulphonylures, igunies, thizoliineiones(tzds) 및 α-gluosise inhiitor 등이있고, 최근에개발된제재로는 glugonlike peptie-1 gonists, ipeptiyl peptise-iv inhiitors 및 mylin nlogues 등이있다 (3). 경구용혈당강하제는장기간사용하면약효가감소하거나약물부작용이나타날수있으며, 혈당조절기능을회복하여당뇨병을근본적으로치료할수있는방법이아직까지개발되어있지않기때문에당뇨병치료를위한새로운제재의개발이절실히요구되고있다. 식물에서추출한천연물은화학합성의약품에비하여부작용이적기때문에질병의치료나건강증진을위한목적으로많은연구가진행되고있다 (4). 식물에풍부

2 168 이병래 양훈 박평심 하게들어있는폴리페놀 (polyphenol) 은항산화작용, 항균작용및항암작용등생리활성이알려지면서천연물을연구하는연구자들의관심을끌고있다 (4,5). 폴리페놀은구조에따라서 phenoli is, flvonois, stilenes 및 lignns 등으로나눌수있고, flvonois에는 flvonols, flvones, flvnols, flvnones, isoflvones 및 nthoyniins 등이포함된다 (5). Flvonoi는과일, 채소, 차, 콩및식물재료뿐만아니라이들을이용한가공식품이나음료등에도포함되어있으며, 당뇨병, 암, 심혈관질환및골다공증등의질환발생과 flvonoi 함유식품의섭취량은연관성이있다고한다 (6,7). Hnhinev 등 (8) 은폴리페놀이탄수화물의소화, 흡수및대사에영향을미친다고하였고, Weik 등 (9) 은 flvonoi 식이가 2형당뇨병의발생과연관이있다고하였으며, Song 등 (10) 은 flvonols과 flvones 식이섭취가인슐린저항성을감소시켜서 2형당뇨병발생을예방할수있다고하였다. 녹차 (Cmelli sinensis L.) 에는폴리페놀류인 tehin이함유되어있는데, tehin 함량은수용성물질의 30~42% 를차지할정도로매우높은것으로알려져있으며, tehin 중 epitehin(ec), epitehin-3- gllte(ecg), epigllotehin(egc) 및 epigllotehin-3-gllte(egcg) 등 4가지함량이높다 (11). Iso 등 (12) 이 40~65세연령 17,423명을 5년간추적하여연구한역학조사결과에따르면하루에녹차 6컵이상마시는사람이일주일에 1컵이하로마시는사람보다 2형당뇨병의발생이현저히낮아녹차음용이 2형당뇨병의발생을억제하는효과가있다고하였다. 또한 Wolfrm 등 (13) 은배양세포와동물을이용한실험에서 EGCG가 2형당뇨병의예방과치료에효과가있다고하였고, Ishikw 등 (14) 은 tehin 이소장 α-gluosise를억제하거나포도당흡수를억제하여식후혈당증가를저하시키는작용이있다고하였다. 그러나 Fukino 등 (15) 은 2형당뇨병환자에 EGCG를투여해도혈당의감소가없었다고하였고, Stroel 등 (16) 은지방세포를이용한실험에서 EGCG가 gluose trnsporter 4에직접작용하여포도당의흡수를억제한다고하여 EGCG의 2형당뇨병치료효과에대해서는아직논란이되고있다. Go 등 (17) 은대사증후군에서 tehin 단독투여보다 tehin, 비타민 C 및비타민 E 등의병합투여로산화스트레스감소효과가증가한다고하였고, Chen 등 (18) 은비타민 C가 tehin의안정성을증가시킨다고하였다. 당뇨병에서산화적손상은당뇨병합병증발생과밀접한연관이있는것으로알려졌으므로산화스트레스를감소시키는제재의개발은당뇨병성합병증의예방에매우중요한과제라할수있는데 (19), tehin과비타민 C의병합투여가당뇨병에미치는영향에대한연구는아직미진한상태이다. 본연구는녹차폴리페놀이당뇨병치료를위한기능성식품재료로이용가능성을알기위해서 2형당뇨병흰쥐에녹차폴리페놀과비타민 C를혼합하여음용시킨후혈액과신장의생화학적소견을비교관찰하였다. 재료및방법실험재료본실험에사용된 polyphenon 60(P60) 은 tehin 함량이 70% 인녹차추출물로 Sigm-Alrih Co.(St. Louis, MO, USA) 에서구매하여사용하였다. Soium sorte (SA), streptozotoin(stz), soium itrte, γ-glutmylnitronilie, p-nitrophenyl phosphte, 단백질측정 kit 및인슐린측정 kit은 Sigm-Alrih Co. 에서구매하여실험에사용하였다. 실험동물본실험에서사용한흰쥐는체중 180~200 g 되는 Sprgue-Dwley 종수컷으로샘타코 (Dejeon, Kore) 에서구매하여 12시간명암주기, 온도 20±2 C, 상대습도 60±5% 의환경에서사육하였고, 45% 고지방식이는샘타코에서구매하여실험동물에공급하였다. 동물실험은조선대학교동물실험윤리위원회승인 ( 승인번호 : CIACUC2015-A0003) 을받아윤리규정에따라서실험을실시하였다. 2형당뇨병의유발은고지방식이와저용량스트렙토조토신을사용하여유발하였다. 실험동물에 45% 고지방식이를공급하여 4주일간사육한후당뇨군에는 STZ를 0.05 M itrte uffer(ph 4.5) 에용해시켜흰쥐 (STZ 35 mg/kg BW) 의복강에주사하였고, 대조군은 0.05 M itrte uffer를복강에주사하였다. STZ 주사후부터실험동물은일반실험동물사육사료를공급하여사육하였다. 실험군은대조군 (nonieti ontrol: NC 군 ), 당뇨대조군 (ieti ontrol: DC 군 ), 당뇨 + 녹차폴리페놀 (DM+P60) 군, 당뇨 + 비타민 C(DM+SA) 군및당뇨 + 녹차폴리페놀 + 비타민C(DM+P60 +SA) 군등총 5군으로나누었고, 각실험군의동물수는 5마리로하였다. NC 군과 DC 군은식수로수돗물을공급하였고, DM+P60 군은수돗물에 P60을 0.1%(w/v) 농도로, DM+SA 군은수돗물에 SA를 0.1%(w/v) 농도로용해시켜서식수로공급하였으며, DM+P60+SA 군은 P60과 SA가각각 0.1%(w/v) 농도가되도록용해된물을식수로공급하여 16주일동안사육하였다. 혈액채취및분석실험동물을실험시작후 2주간격으로공복혈당을측정하였다. 공복혈당은동물을 12시간금식시킨후꼬리정맥에서채혈하여혈당측정기 ACCU-CHEK(Rohe Dignostis, Mnnheim, Germny) 를이용해측정하였다. 실험동물은에테르로마취시켜개복후복부정맥에서혈액을채취하고, 신장을절제하였다. 채취된혈액의일부는즉시혈장을분리하여인슐린을측정하고, 나머지는응고시킨후혈청을분리하여중성지질, BUN 및 retinine 정량시료로사용하였다. 혈장인슐린은인슐린측정 kit(insulin ELISA kit) 을 Sigm-Alrih Co. 에서구매하여제조사의방법에

3 2 형당뇨병흰쥐에서녹차폴리페놀과비타민 C 병합투여효과 169 Tle 1. Physil n iohemil prmeters of experimentl nimls Prmeter NC 1) DC 2) Foo intke (g/24 h) Boy weight (g) FBG 3) (mmol/l) Plsm insulin (μu/ml) HOMA-IR 4) Triglyerie (mg/l) 12.8± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±19.8 1) NC: non-ieti ontrol. 2) DC: ieti ontrol. 3) FBG: fsting loo gluose. 4) HOMA-IR: homeostsis moel ssessment of insulin resistne. Vlues re men±sd (n=5). Mens with ifferent letters (,) in sme row re signifintly ifferent (P<0.05) y Dunn's multiple rnge test. 따라서반응시킨후 ELISA plte reer(ten, Männeorf, Switzerln) 로흡광도를측정하여계산하였다. 혈청중성지질, BUN 및 retinine 양은혈액자동분석기 (Hithi 7180, Tokyo, Jpn) 를이용하여측정하였다. 인슐린저항성지수인 homeostsis moel ssessment for insulin resistne(homa-ir) 는 Mtthews 등 (20) 의방법에따라서다음식에의해계산하였다. HOMA-IR=Insulin (μu/ml) Gluose (mmol/l)/ 22.5 신장효소활성측정절제된신장조직 0.2 g을취하여 2 ml의 0.1 M 인산염완충액 (ph 7.4) 을첨가하여균질화시킨후 γ-glutmyltrnspeptise(ggt) 와 lkline phosphtse(ap) 측정을위한시료로이용하였다. GGT 활성도는 Tte와 Meister (21) 의방법으로 γ-glutmyl-nitronilie로부터생성되는 p-nitronilie 양을정량하는방법으로, AP는 Tenenhouse 등 (22) 의방법에따라 p-nitrophenyl phosphte로부터생성되는 p-nitrophenol 양을정량하는방법으로측정하였고, 단백질은 Sigm-Alrih Co. 의단백질정량 kit(totl protein kit) 을이용하여측정하였다. 효소의활성은 μmoles/mg protein/h로표시하였다. 통계처리모든측정결과는평균 ± 표준편차 (men±sd) 로표시하였고, 실험결과는 SPSS(Sttistil Pkge for the Soil Siene, Ver. 12.0, SPSS In., Chigo, IL, USA) 통계프로그램을이용하여분산분석 (ANOVA) 을실시하였고, 시료간유의성은 Dunn's multiple rnge test에의해서 P<0.05 수준에서검증하였다. 결과및고찰흰쥐에서 2형당뇨병유발고지방식이와저용량스트렙토조토신으로유도된당뇨병흰쥐의체중, 식이섭취량및생화학적특성을관찰한결과는 Tle 1과같다. DC 군식이섭취량은 NC 군보다 54% 가증가하였고, 체중은 NC 군과 DC 군사이에유의한차이가없었다. DC 군의공복혈당은 22.1±1.2 mmol/l로 NC 군의 5.4±0.4 mmol/l에비하여약 4배가증가하였고, 혈장인슐린은 NC 군 8.3±0.7 μu/l, DC 군 8.1±0.7 μu/l로두군간에차이가없었으며, 인슐린저항성지수인 HOMA- IR은 NC 군에서 1.9±0.2, DC 군은 8.0±1.0으로 DC 군에서높게나타났고, 중성지질량은 DC 군에서 NC 군보다약 2.5배가증가하였다. 고지방식이와저용량스트렙토조토신투여는 2형당뇨병유발에이용되고있는데 (23,24), 본실험에서는 DC 군에서공복혈당이증가하고혈장인슐린의양은변화가없었으며, 인슐린저항성지수인 HOMA-IR이 DC 군에서높게나타나 2형당뇨병이유발된것으로사료된다. P60과 SA 투여 2형당뇨병흰쥐의생리적및혈액소견녹차폴리페놀과비타민 C가 2형당뇨병에미치는영향을관찰하기위해 P60과 SA를당뇨병흰쥐에 16주간투여한후관찰한식이섭취량, 음수량, 체중및혈액소견결과는 Tle 2와같다. 식이섭취량과음수량은 NC 군에비하여 DC 군에서 30% 와 137% 가각각증가하여당뇨병발생으로인하여식이섭취량과음수량이증가함을알수있었다. 당뇨병흰쥐에 P60이나 SA를투여한군과투여하지않은군 Tle 2. Effet of polyphenon 60 (P60) n soium sorte (SA) on physil n iohemil prmeters in experimentl nimls Prmeter NC DC DM+P60 1) DM+SA 2) DM+P60+SA 3) Foo intke (g/24 h) Flui intke (ml/24 h) Boy weight (g) FBG (mmol/l) Plsm insulin (μu/ml) HOMA-IR Triglyerie (mg/l) 21.6± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±16.5 1) DM+P60: ieti rts trete with P60 (0.1% in rinking wter). 2) DM+SA: ieti rts trete with SA (0.1% in rinking wter). 3) DM+P60+SA: ieti rts trete with P60 n SA (0.1% P60 n 0.1% SA in rinking wter). Vlues re men±sd (n=5). Mens with ifferent letters (-) in sme row re signifintly ifferent (P<0.05) y Dunn's multiple rnge test.

4 170 이병래 양훈 박평심 사이에식이섭취량과음수량의차이가없었고, 체중은각실험군들사이에유의한차이가없었기때문에녹차폴리페놀이나비타민 C 투여가식이섭취량이나음수량및체중에미치는영향은적은것으로사료된다. 공복혈당은 DC 군에서 NC 군의 5배로증가하였고, DM+P60 군은 DC 군보다 14% 감소하였고, DM+P60+SA 군은 DC 군에비하여 28% 정도감소하였으며, DM+SA 군은 DC 군과유의한차이가없어서녹차폴리페놀이나녹차폴리페놀과비타민 C 복합투여로혈당의감소가일어남을알수있었다. 혈청인슐린양은각실험군사이에유의한차이가없으며, 인슐린저항성지수인 HOMA-IR은 DC 군에서 8.6±0.5였고, DM+P60+ SA 군은 6.1±0.7로 DC 군보다유의하게감소하였으며, DM+P60 군과 DM+SA 군은 DC 군과유의한차이가없었다. 녹차폴리페놀과비타민 C 복합투여로공복혈당과 HOMA-IR이유의하게감소하여 2형당뇨병에서녹차폴리페놀과비타민 C 복합투여가혈당과인슐린저항성개선에효과를나타낼수있을것으로생각한다. 혈장중성지질량은 NC 군에비하여 DC 군에서 2.4배가증가하였으며, DM+ P60 군은 DC 군보다 21% 감소하였고, DM+P60+SA 군은 DC 군에비하여 42% 정도감소하였으며, DM+SA 군은 DC 군과유의한차이가없어서녹차폴리페놀이나녹차폴리페놀과비타민 C 복합투여로혈액중성지질량의감소가일어나며녹차폴리페놀과비타민 C 복합투여로중성지질감소량이더크게나타남을알수있었다. 이상의실험결과 2형당뇨병에서혈당, 인슐린저항성및혈청중성지질량개선에녹차폴리페놀과비타민 C 복합투여가녹차폴리페놀이나비타민 C 단독투여보다더큰효과를나타내는것으로생각한다. P60과 SA 투여 2형당뇨병흰쥐의공복혈당변화녹차폴리페놀과비타민 C가 2형당뇨병의공복혈당에미치는영향을관찰하기위해 P60과 SA를당뇨병흰쥐에투여하면서 16주간공복혈당을측정한결과는 Fig. 1과같다. NC 군의공복혈당은실험시작할때인 0주에 91±11 mg/l였으며 16주까지유의한변화를나타내지않았고, DC 군은 0주에공복혈당이 397±22 mg/l였으며 16주까지변화가없었다. DM+P60 군공복혈당은 0주 397±18 mg/l였으며 8주와 16주에 DC 군보다각각 10% 및 12% 가감소하였고 4주와 12주에는 DC 군과유의한차이를나타내지않았으며, DM+SA 군공복혈당은 0주에서 16주까지 DC 군과유의한차이가없었다. DM+P60+SA 군공복혈당은 DC 군에비하여 4주 18%, 8주 27%, 12주 29% 및 16주 31% 가감소하였다. Ngo 등 (25) 은 2형당뇨병환자를대상으로 12주간녹차 tehin을투여하면혈당이 134.1±5.6 mg/l에서약 8 mg/l 정도감소한다고하였고, Wein 등 (26) 은당뇨병생쥐모델인 / mie에 P g/kg을 4주간투여하였을때혈당의변화가없다고하여, 녹차폴리페놀단독투여에의한혈당의감소량은크지 Gluose level (mg/l) B A A A Weeks Fig. 1. Effets of polyphenon 60 (P60) n soium sorte (SA) on fsting loo gluose in ieti rts. Rts were ministere P60 n SA for 16 weeks, the fsting loo gluose were etermine fter 12 h fsting. NC, non-ieti ontrol; DC, ieti ontrol; DM+P60, ieti rts trete with P60 (0.1% in rinking wter); DM+SA, ieti rts trete with SA (0.1% in rinking wter); DM+P60+SA, ieti rts trete with P60 n SA (0.1 % P60 n 0.1% SA in rinking wter). Vlues re men±sd (n=5). Mens with ifferent pitl letters (A,B) re signifintly ifferent (P<0.05) in DM+P60+SA group. Mens with ifferent smll letters (-) re signifintly ifferent (P<0.05) t sme weeks. 않은것으로생각한다. 녹차폴리페놀은소화효소인 mylse나 α-glyosise 작용을억제하거나포도당흡수억제, 포도당신생억제작용등여러가지작용으로혈당을감소시키는것으로알려졌는데 (8,9,13,16), 본실험의결과 P60 투여당뇨병흰쥐의공복혈당량은 8주와 16주에는 10% 내외의감소가있었으나 4주와 12주에는감소가없어서녹차폴리페놀에의한혈당강하작용이크지않으며, 비타민 C가당뇨병에서혈당의변화에미치는영향은적은것으로생각된다. 그러나녹차폴리페놀과비타민 C 복합투여군의공복혈당은당뇨대조군, 녹차폴리페놀이나비타민 C 단독투여군에비하여모두감소하여 2형당뇨병에서녹차폴리페놀과비타민 C가혈당강하에상승작용을나타내는것으로사료된다. 비타민 C와녹차폴리페놀의혈당강하상승효과에대한명확한기전은아직알려지지않으며, Chen 등 (18) 은비타민 C가폴리페놀의안정성을증가시키는작용이있다고하였는데, 이러한폴리페놀안정성증가도효과증가의한요인으로작용할수있을것으로추측되며, 비타민 C와폴리페놀의혈당강하상승작용기전과용량에관한연구가계속되어야할것으로생각한다. P60과 SA 투여 2형당뇨병흰쥐의신장손상에미치는영향녹차폴리페놀과비타민 C가 2형당뇨병흰쥐의신장에미치는영향을관찰하기위해당뇨병흰쥐에 P60과 SA를 16주동안투여한후혈청 retinine, BUN 양과신장효소 GGT와 AP 활성도를측정한결과는 Fig. 2, 3 및 Tle 3과같다. 혈청 retinine 양은 DC 군에서 NC 군보다 284% 가증가한 1.23±0.12 mg/l였고, DM+SA 군은 DC 군과차 A

5 2 형당뇨병흰쥐에서녹차폴리페놀과비타민 C 병합투여효과 171 Serum retinine (mg/l) BUN (mg/l) Groups Groups Fig. 2. Effets of P60 n SA on serum retinine in ieti rts. Rts were ministere P60 n SA for 16 weeks, the serum retinine were etermine fter these tretments. NC, nonieti ontrol; DC, ieti ontrol; DM+P60, ieti rts trete with P60 (0.1% in rinking wter); DM+SA, ieti rts trete with SA (0.1% in rinking wter); DM+P60+SA, ieti rts trete with P60 n SA (0.1% P60 n 0.1% SA in rinking wter). Vlues re men±sd (n=5). Mens with ifferent letters (-) ove the rs re signifintly ifferent (P< 0.05) y Dunn's multiple rnge test. Fig. 3. Effets of P60 n SA on loo ure nitrogen (BUN) in ieti rts. Rts were ministere P60 n SA for 16 weeks, the BUN were etermine fter these tretments. NC, non-ieti ontrol; DC, ieti ontrol: DM+P60, ieti rts trete with P60 (0.1% in rinking wter); DM+SA, ieti rts trete with SA (0.1% in rinking wter); DM+P60+SA, ieti rts trete with P60 n SA (0.1% P60 n 0.1% SA in rinking wter). Vlues re men±sd (n=5). Mens with ifferent letters (-) ove the rs re signifintly ifferent (P< 0.05) y Dunn's multiple rnge test. 이를나타내지않았으며, DM+P60 군의 retinine 양은 DC 군보다 17% 감소하였고, DM+P60+SA 군은 0.69± 0.08 mg/l로 DC 군보다 43% 감소하였다. 혈청 BUN 양은 DC 군에서 NC 군보다 184% 가증가한 81.96±6.46 mg/l 였고, DM+P60 군과 DM+SA 군은 DC 군과유의한차이를나타내지않았으며, DM+P60+SA 군의 BUN 양은 DC 군보다 41% 정도가감소한 48.38±7.55 mg/l였다. 혈청 BUN과 retinine 양은신장기능을나타내는소견으로서시스플라틴과같은항암제에의한신장손상이나 (27) 당뇨병성신장손상이나타나면증가하는것으로알려졌는데 (28), 본실험결과에서도 DC 군의혈청 BUN과 retinine 양이증가하여신장손상이나타남을알수있었다. Khn 등 (27) 은항암제시스플라틴에의한신장독성이녹차추출물에의해서억제된다고하였고, Ah 등 (28) 은항산화물질인 ellgi i가 2형당뇨병흰쥐에서신장손상을억제한다고하였는데, 본실험에서당뇨병흰쥐에 P60을단독투여한경우 retinine은감소하지만 BUN은변화가없고, P60과 SA를복합투여했을때 retinine이나 BUN의증가를억제하기때문에신장손상방지효과가더클것으로생각된다. GGT와 AP는신장세뇨관의솔가장자리막 (rush orer memrne) 에많이존재하는효소로서세뇨관손상 시감소하는것으로알려졌다 (22,27). 본실험에서 DC 군의신장 GGT와 AP 활성도는 NC 군보다감소하여 DC 군에서신세뇨관손상이나타나고있음을보여주고있다. 녹차추출물이시스플라틴이나 gentmyin에의한신장 GGT와 AP 활성도감소를억제하는작용이있는것으로알려졌는데 (27,29), 본실험에서 DM+P60+SA 군의신장 GGT와 AP 활성도는 DC 군보다증가하여당뇨병흰쥐에녹차폴리페놀과비타민 C 복합투여로신장손상이억제됨을보여주고있다. Groeler 등 (30) 은비타민 C와폴리페놀을복합투여하면산화적손상을억제할수있다고하였고, Gee 등 (31) 은 2형당뇨병환자에비타민 C와비타민 E를복합투여하면알부민뇨증의개선에도움이된다고하였는데, 본실험에서도녹차폴리페놀과비타민 C의복합투여로녹차폴리페놀이나비타민 C를단독으로투여하였을때보다신장손상의억제효과가더증가함을확인할수있었다. 녹차폴리페놀과비타민 C의신장손상억제효과는 2형당뇨병환자에서초래될수있는당뇨병성신장합병증의예방에작용할가능성이있으므로이에대한계속된연구가필요하며, 당뇨병환자에서신장합병증을예방할수있는식품보조제로서개발가능성이높을것으로사료된다. Tle 3. Effets of P60 n SA on enzyme tivities in kiney of ieti rts Enzymes 1) Enzyme tivities (μmoles/mg protein/h) GGT AP 47.8± ± ± ± ± ± ± ± ± ±1.2 1) GGT: γ-glutmyltrnspeptise, AP: lkline phosphtse. Vlues re men±sd (n=5). Mens with ifferent letters (-) in row re signifintly ifferent (P<0.05) y Dunn's multiple rnge test.

6 172 이병래 양훈 박평심 요 녹차폴리페놀과비타민 C가 2형당뇨병에미치는영향을관찰하기위해고지방식이와저용량스트렙토조토신을이용하여당뇨병이유도된흰쥐에 polyphenon 60(P60) 과 soium sorte(sa) 를 16주간투여한후공복혈당, 혈장인슐린, 혈청중성지질, BUN 및 retinine과신장 GGT 와 AP 활성도를측정하였다. 당뇨병흰쥐에 P60이나 SA 투여로인한식이섭취량과체중의변화는없었다. 공복혈당은당뇨대조군 (DC 군 ) 에서대조군 (NC 군 ) 의 5배로증가하였으며, 당뇨 + 녹차폴리페놀 (DM+P60) 군은 14%, 당뇨 + 녹차폴리페놀 + 비타민 C(DM+P60+SA) 군은 28% 가 DC 군보다감소하였고, 당뇨 + 비타민 C(DM+SA) 군은 DC 군과유의한차이가없었다. 혈장인슐린양은각실험군사이에유의한차이가없으며, 인슐린저항성지수 HOMA-IR은 DC 군에서증가하였고 DM+P60+SA 군은 DC 군보다감소하였다. 혈청 retinine 양은 DC 군에서증가하였고 DM+ P60 군은 DC 군보다 17% 감소하였으며, DM+P60+SA 군은 DC 군보다 43% 감소하였다. 혈청 BUN 양은 DC 군에서증가하였고 DM+P60+SA 군은 DC 군보다 41% 감소하였다. 신장 GGT와 AP 활성도는 DC 군에서감소하였고 DM+P60+SA 군은 DC 군보다감소가적었으며, DM+SA 군은 DC 군과유의한차이가없었다. 이상의실험결과 2형당뇨병에서녹차폴리페놀과비타민 C 복합투여가혈당, 인슐린저항성및혈청중성지질량개선및신장손상방지효과가녹차폴리페놀이나비타민 C를단독으로투여하였을때보다더증가함을확인할수있었다. 녹차폴리페놀과비타민 C의혈당상승억제와신장손상방지효과에대한계속된연구가필요하며, 녹차폴리페놀과비타민 C는당뇨병환자에게혈당을조절하고신장손상을방지하는기능성식품제재로서개발가능성이있는것으로생각한다. 약 감사의글 이논문은 2014년도조선대학교학술연구비의지원을받아연구되었으며이에감사드립니다. REFERENCES 1. Interntionl Dietes Feertion IDF ietes tls. 6th e. Brussels, Belgium. p Akkti S, Sm KG, Tungh G Emergene of promising therpies in ietes mellitus. J Clin Phrmol 51: Philippe J, Rh D Treting type 2 ietes: how sfe re urrent therpeuti gents?. Int J Clin Prt 63: Bu PV, Liu D, Gilert ER Reent vnes in unerstning the nti-ieti tions of ietry flvonois. J Nutr Biohem 24: Mnh C, Slert A, Morn C, Remesy C, Jimenez L Polyphenols: foo soures n iovilility. Am J Clin Nutr 79: Grf BA, Milury PE, Blumerg JB Flvonols, flvones, flvnones, n humn helth: epiemiologil eviene. J Me Foo 8: Arts IC, Hollmn PC Polyphenols n isese risk in epiemiologi stuies. Am J Clin Nutr 81: 317S-325S. 8. Hnhinev K, Törrönen R, Boni-Pons I, Pekkinen J, Kolehminen M, Mykkänen H, Poutnen K Impt of ietry polyphenols on rohyrte metolism. Int J Mol Si 11: Weik NM, Pn A, Cssiy A, Rimm EB, Smpson L, Rosner B, Willett W, Hu FB, Sun Q, vn Dm RM Dietry flvonoi intkes n risk of type 2 ietes in US men n women. Am J Clin Nutr 95: Song Y, Mnson JE, Buring JE, Sesso HD, Liu S Assoitions of ietry flvonois with risk of type 2 ietes, n mrkers of insulin resistne n systemi inflmmtion in women: prospetive stuy n ross-setionl nlysis. J Am Coll Nutr 24: Wng Y, Ho CT Polyphenoli hemistry of te n offee: entury of progress. J Agri Foo Chem 57: Iso H, Dte C, Wki K, Fukui M, Tmkoshi A; JACC Stuy Group The reltionship etween green te n totl ffeine intke n risk for self-reporte type 2 ietes mong Jpnese ults. Ann Intern Me 144: Wolfrm S, Reerstorff D, Preller M, Wng Y, Teixeir SR, Riegger C, Weer P Epigllotehin gllte supplementtion llevites ietes in roents. J Nutr 136: Ishikw A, Ymshit H, Hiemori M, Ingki E, Kimoto M, Okmoto M, Tsuji H, Memon AN, Mohmmio A, Ntori Y Chrteriztion of inhiitors of postprnil hyperglyemi from the leves of Nerium inium. J Nutr Si Vitminol 53: Fukino Y, Shimo M, Aoki N, Okuo T, Iso H Rnomize ontrolle tril for n effet of green te onsumption on insulin resistne n inflmmtion mrkers. J Nutr Si Vitminol 51: Stroel P, Allr C, Perez-Ale T, Cleron R, Alunte R, Leighton F Myrietin, queretin n tehin-gllte inhiit gluose uptke in isolte rt ipoytes. Biohem J 386: Go M, Zho Z, Lv P, Li Y, Go J, Zhng M, Zho B Quntittive omintion of nturl nti-oxints prevents metoli synrome y reuing oxitive stress. Reox Biol 6: Chen ZY, Zhu QY, Wong YF, Zhng Z, Chung HY Stilizing effet of sori i on green te tehins. J Agri Foo Chem 46: Fores JM, Cooper ME Mehnisms of ieti omplitions. Physiol Rev 93: Mtthews DR, Hosker JP, Ruenski AS, Nylor BA, Treher DF, Turner RC Homeostsis moel ssessment: insulin resistne n et-ell funtion from fsting plsm gluose n insulin onentrtions in mn. Dietologi 28: Tte SS, Meister A γ-glutmyl trnspeptise from kiney. In Methos in Enzymology. Meister A, e. Aemi Press, New York, NY, USA. Vol 113, p Tenenhouse HS, Sriver CR, Vizel EJ Alkline phosphtse tivity oes not meite phosphte trnsport in the renl-ortil rush-orer memrne. Biohem J 190: 473-

7 2 형당뇨병흰쥐에서녹차폴리페놀과비타민 C 병합투여효과 Ree MJ, Meszros K, Entes LJ, Clypool MD, Pinkett JG, Gois TM, Reven GM A new rt moel of type 2 ietes: the ft-fe, streptozotoin-trete rt. Metolism 49: Srinivsn K, Viswn B, Asrt L, Kul CL, Rmro P Comintion of high-ft iet-fe n low-ose streptozotoin-trete rt: moel for type 2 ietes n phrmologil sreening. Phrmol Res 52: Ngo T, Meguro S, Hse T, Otsuk K, Komiko M, Tokimitsu I, Ymmoto T, Ymmoto K A tehin-rih everge improves oesity n loo gluose ontrol in ptients with type 2 ietes. Oesity 17: Wein S, Shrer E, Rimh G, Wolffrm S Orl green te tehins trnsiently lower plsm gluose onentrtions in femle / mie. J Me Foo 16: Khn SA, Priymv S, Khn W, Khn S, Frooq N, Yusufi AN Stuies on the protetive effet of green te ginst ispltin inue nephrotoxiity. Phrmol Res 60: Ah A, Gni AA, Mujee M, Siiqui WA Ellgi i, n NF-κB inhiitor, meliortes renl funtion in experimentl ieti nephropthy. Chem Biol Intert 219: Khn SA, Priymv S, Frooq N, Khn S, Khn MW, Yusufi AN Protetive effet of green te extrt on gentmiin-inue nephrotoxiity n oxitive mge in rt kiney. Phrmol Res 59: Groeler LK, Wng XS, Kim HB, Shnu A, Hossin F, MMhon AC, Witting PK Cosupplementtion with syntheti, lipi-solule polyphenol n vitmin C inhiits oxitive mge n improves vsulr funtion yet oes not inhiit ute renl injury in n niml moel of rhomyolysis. Free Ri Biol Me 52: Gee P, Poulsen HE, Prving HH, Peersen O Doulelin, rnomise stuy of the effet of omine tretment with vitmin C n E on luminuri in Type 2 ieti ptients. Diet Me 18:

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DBPIA-NURIMEDIA 한국식품영양과학회지 연구노트 Streptozotoin-Niotinmide 로유도된제 2 형당뇨모델쥐에서 조각자 (Gleditshie Spin) 추출물의항당뇨효과 박재희 1 추원미 1 이정민 2 박해룡 2 박은주 1 1 경남대학교식품영양학과 2 경남대학교식품생명학과 서론 년사망원인통계 에따르면당뇨병에의한사망률이인구 만명당 으로 위를차지하였으며 전국민의약 가당뇨병환자로보고되고있다