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솔미 남궁
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1 J Koren So Food Si Nutr 한국식품영양과학회지 39(3), 33~39(2010) DOI: /jkfn 녹차추출물이에탄올투여에의한초기간손상에미치는영향 김동춘 2 정승욱 2 박평심 1 1 조선대학교의학연구원 2 조선대학교의과대학생화학교실 Effets of Green Te Extrt on Aute -indued Heptotoxiity in Rts Dong Chun Jin 2, Seung Wook Jeong 2, nd Pyoung-Sim Prk 1 1 Institute of Medil Siene, Chosun University, Gwngju , Kore 2 Dept. of Biohemistry, College of Mediine, Chosun University, Gwngju , Kore Astrt The liver is the mjor trget of ethnol toxiity nd oxidtive stress plys role in development of loholi liver disese. This study ws performed to investigte the effets of green te extrts () on ute ethnol-indued heptotoxiity in rts. Experimentl nimls were divided into groups, ontrol,, ethnol, nd +ethnol tretment, with 5 rts in eh group. (6 g/kg ody weight (BW)) nd (200 mg/kg BW) were treted y gvge. At 1 hour, 3 hours nd 20 dys (6 g/kg BW every 2 dys for totl 10 doses) fter ethnol nd/or tretments, nimls were killed; hepti tumor nerosis ftor-lph (TNF-α) nd glutthione level, serum sprtte minotrnsferse (AST), serum lnine minotrnsferse (ALT), hepti ntioxidnt enzymes (SOD, CAT, GPx) tivities nd hepti thiorituri id retive sustnes (TBARS) were mesured. At 1 hour nd 3 hours, hepti TNF-α levels were inresed signifintly in ethnol group nd ethnol+ group ut tht levels ws signifintly lower in ethnol+ group ompred with ethnol group. Hepti glutthione level ws deresed y ethnol tretment ut prevented the ethnol-indued glutthione derement. The levels of liver mrker enzymes (AST, ALT), liver ntioxidnt enzymes (SOD, CAT, GPx) nd lipid peroxidtion mrker (TBARS) were not hnged in rts of 1 nd 3 hours fter ethnol tretment. After 20 dys, deresed the hnges of liver mrker enzymes (AST, ALT) tivities nd TBARS level y ethnol. This study shows tht enefiilly modultes TNF-α nd glutthione levels in liver of ethnol dministered rts. The supplementtion ould e enefiil to liver y deresing erly hnges of iomrkers of liver dmge used y ethnol. Key words: green te extrt, ethnol, TNF-α, heptotoxiity, glutthione 서론술은세계적으로널리음용되고있는음료이지만계속적인음주는여러가지사회적문제를야기할뿐만아니라, 간염, 간경화증및간암등알코올성간질환을유발할수있다 (1). 음주후체내흡수된알코올의 80~90% 는간에서대사되는데, 간세포에서에탄올은 lohol dehydrogense(adh) 와 etldehyde dehydrogense에의해 etldehyde와 ette로전환되거나, 세포내망계의 mirosoml ethnol oxidizing system(meos) 에서산화되어 etldehyde를생성한다 (1,2). 음주로간에서생성된 etldehyde는반응성이높은화합물로다른물질과반응하거나, 유리기생성을증가시켜서간세포손상을유발할수있다 (1,2). 알코올을장기간섭취하면간의 SOD, tlse 및 GPx 등항산화효소활성도가감소되고 (3,), 글루타치온이 나비타민 C 및비타민 E 등항산화물질이감소되는데, 항산화력이감소된세포는유리기에의한산화적자극에쉽게손상될수있다 (5). 알코올섭취에의한간세포의유리기생성증가나항산화력감소는알코올성간질환유발과매우밀접한연관이있는것으로알려져있으므로, 산화적세포손상을방지할수있는항산화비타민 (A, C, E), L-rnitine 이나 et-rotene 및글루타치온등항산화물질이알코올성간손상방지제로연구되고있다 (6,7). 식물에함유된천연물은일반적으로독성반응에의한부작용이화학합성물질에비해적기때문에기능성식품및약품개발의소재로천연물에대한관심이증가하고있는데 (8,9), 포도잎, 강황및계수나무등식물의추출물이알코올에의한간손상을방지하는효과가있는것으로알려져있다 (10-12). 기호음료로세계적으로이용되고있는녹차 (Cmelli sinensis L.) 의항산화기능성이알려지면서녹차 Corresponding uthor. E-mil: psprk3687@hnmil.net Phone: , Fx:

2 3 김동춘 정승욱 박평심 잎에함유된데아닌, 아미노산및카테킨등의성분에대한기능성연구가진행되고있다 (13-15). Ostrowsk 등 (16) 은녹차추출물을 주간투여한흰쥐의간세포에서글루타치온과 GPx 활성을증가시킴으로써에탄올에의한지질과산화를감소시킨다고하였고, Augustynik 등 (17) 은녹차를 5주간복용시키면 SOD나 GPx의활성도를증가시키고비타민 A, C, E 등의감소를억제하여간세포를보호하는기능이있다고하였으며, Lee 등 (18) 은녹차카테킨의한종류인 epigllotehin gllte(egcg) 가배양한간종양세포 (HepG2 ells) 에서 gmm-glutmyl trnsferse(ggt) 활성을억제함으로써에탄올에의한간세포의독성을감소시킨다고하여녹차추출물이나카테킨이알코올에의한간세포독성을감소시킨다고하였다. 그러나녹차의에탄올에의한간독성을방지하는작용기전에대하여는여러가지가설이제시되고있으나아직까지명확하게규명되어있지는않다. 따라서본연구에서는알코올의간세포독성감소에미치는녹차추출물의작용기전을규명하기위한실험으로흰쥐에에탄올투여후초기간손상에미치는녹차추출물의영향을염증반응을유발하는것으로알려진 tumor nerosis ftor-lph(tnf-α) 와항산화작용에관여하는글루타치온의변화를측정하여관찰하였다. 재료및방법녹차추출물의제조녹차추출물은건조녹차잎을열수추출하고부분정제하여사용하였다. 건조녹차잎은녹차재배농원 ( 보성다원 ) 에서구입하여사용하였다. 녹차잎을분마시킨후가열한증류수 50 L에녹차잎분말 5 kg을첨가하여 2시간동안가열한후추출액을원심분리기 (J2-21, Bekmn, CA, USA) 에서 1500 rpm으로 15분간원심분리하고상층액을수집하였다. 수집한추출액을 o C에서 12시간동안방치하고난후원심분리기로 o C에서 1500 rpm으로 15분간원심분리하여수집한상층액을 60 o C 건조기에서완전히건조시킨후마쇄하여제조한분말을녹차추출물시료로사용하였다. 실험동물의사육실험동물은 Sprgue-Dwley(SD 체중 250±20 g, 수컷 ) 종흰쥐는한국실험동물센터에서구입하여사용하였다. 실험동물은 12시간명암주기, 온도 20±2 o C, 상대습도 60±5% 의환경에서사육하였다. 실험은 SD종흰쥐를대조군, 녹차추출물투여군, 에탄올투여군및에탄올+녹차추출물투여군으로나누었고, 녹차추출물과에탄올등시료의투여는실험동물을 12시간금식시킨후경구투여하였으며, 각실험군은 5마리씩나누었다. 대조군은수돗물 ml/rt, 에탄올투여군은 30% 에탄올 ( 수돗물에희석 ) ml/rt, 녹차추출물투여군은녹차추출물 50 mg 을첨가한수돗물 ml/rt, Tle 1. Experimentl design Experimentl groups + : green te extrt. Agents Wter 50 mg 30% ethnol 30% ethnol+50 mg Feeding volume (ml) 에탄올+녹차추출물투여군은녹차추출물 50 mg을첨가한 30% 에탄올 ml/rt를각각경구투여하였다 (Tle 1). 시료투여후 1시간및 3시간경과시에실험동물을희생시켜서혈액과간조직시료를채취하였다. 또한장기간 (20일간 ) 투여에의한변화를관찰하기위해서상기의실험조건에서상기의시료를 2일마다 1회씩 10회반복투여하고, 최종시료투여 3시간후실험동물을희생시켜서시료를채취하였다. 시료의채취 실험동물은 ethyl ether로마취시킨후복부대동맥에서채혈하고혈청을분리하여혈청시료로사용하였고, 간조직을절제하여즉시액체질소로냉동시킨후 -70 o C에보관하면서간조직시료로사용하였다. 혈액생화학적검사 혈청 sprte minotrnsferse(ast) 활성도는 AST 측정 kit(boehringer Mnnheim, Mnnheim, Germny) 를사용하였고, 혈청 lnine minotrnsferse(alt) 활성도의측정은 ALT 측정 kit(boehringer Mnnheim) 를사용하였으며, 이상의 kit를사용한결과는생화학자동분석기 (Hithi 77, Hithi, Tokyo, Jpn) 로측정하였다. 간조직 tumor nerosis ftor-lph(tnf-α) 및글루타치온 (glutthione) 량측정 흰쥐의간조직에 5배의냉각된 10 mm EDTA를함유한 0.1 M 인산염완충액 (ph 7.) 을첨가한후균질화시켜 20,000 g로 15분간원심분리한후상층액을 TNF-α와글루타치온측정시료로사용하였다. TNF-α의측정은 ELISA 방법에의한쥐 TNF-α 측정 kit(biosoure Interntionl In., Cmrillo, CA, USA) 을사용하여측정하였고, 글루타치온량은발색반응에의한글루타치온측정 kit(bioassy Systems, CA, USA) 를이용하여측정하였다. 간조직항산화효소활성도측정 흰쥐의간조직에 5배의냉각된 10 mm EDTA를함유한 0.1 M 인산염완충액 (ph 7.) 을첨가한후균질화시켜 20,000 g로 15분간원심분리한후상층액을효소활성도측정시료로사용하였다. Superoxide dismutse(sod) 활성도는 Flohe와 Otting(19) 의방법에의해서측정했다. 즉 0.1 mm EDTA와 0.2 mm KCN를함유한 100 mm phosphte

3 녹차추출물이에탄올투여에의한초기간손상에미치는영향 35 uffer(ph 7.8) 에 0.5 mm xnthine, 0.1 mm ytohrome C 및시료액을넣고혼합한후 xnthine oxidse 용액을가하여효소활성도를측정하였다. Ctlse(CAT) 활성도는 Aei(20) 의방법에따라측정하였다. 즉 50 mm phosphte uffer(ph 7.0) 에시료액을혼합하고 25 o C에서 3분동안방치한후 10 mm H 2O 2 용액을혼합하여즉시 20 nm에서 15초간변화되는흡광도를측정하였다. Glutthione peroxidse(gpx) 활성도는 Flohe 등 (21) 의방법으로측정하였다. 즉 100 mm phosphte uffer(ph 7.0) 에 100 mm EDTA, 100 mm GSH 및 glutthione redutse 를혼합하여 37 o C에서 5분간방치한후 15 mm NADPH, 5 mm H 2O 2 및시료액을가하여 30 nm에서 1분동안변화되는흡광도를측정하였다. 시료단백질량은 Lowry 등 (22) 의방법에의해서측정하였다. 간조직 TBARS량측정흰쥐의간 thiorituri id retive sustne (TBARS) 량은 Buege와 Aust(23) 의방법으로측정하였다. 즉 TBA 시약 1.0 ml에 utylted hydroxy toluene(bht) 을최종농도가 0.01% 가되게가하고혈액 0.1 ml를가하여잘혼합한후 98 o C로 15분간가열하고즉시냉각시켜 1000 g 로 15분간원심분리하여상층액을취해 535 nm에서흡광도를측정하였다. 통계분석실험결과는 SPSS 통계프로그램 (sttistil pkge for the soil siene version 12.0) 을이용하여평균 ± 표준오차로표시하였고, 일원배치분산분석 (one-wy ANOVA) 으로비교하여실험군간의통계적유의성은 Dunn's multiple rnge test를이용하여 p<0.05 수준에서검정하였다. 결과및고찰녹차추출물과에탄올이간 TNF-α에미치는영향녹차추출물이에탄올에의한간손상에미치는영향을알기위하여실험동물에 30% 에탄올과녹차추출물 50 mg/rt을투여한후 1시간및 3시간경과후간 TNF-α량을측정하였다. 간 TNF-α량은시료투여 1시간경과후에탄올투여군 (71.31±6.21 pg/mg protein) 의간 TNF-α량은대조군 (2.31±.52 pg/mg protein) 에비하여 195% 가증가되었고, 3시간경과후에는 188%, 20일경과후에는 157% 가각각증가되어에탄올투여로간조직의 TNF-α량이증가되는것을알수있으며, 간 TNF-α는에탄올투여 1시간경과군에서도유의하게증가되므로에탄올투여후초기에 TNF-α 량이변화됨을알수있다 (Fig. 1). Zhou 등 (2) 은생쥐를이용한실험에서간 TNF-α량은에탄올투여 1.5, 3 및 6시간후에각각측정한결과모두증가되었고, Zho 등 (25) 도생쥐를이용한실험에서 1.5와 3시간후간 TNF-α량이증가된다고하였는데, 본실험에서 TNF-α level (pg/mg protein) hour 3 hours 20 dys Time Fig. 1. Effets of green te extrts () on hepti TNF-α levels in ethnol dministered rts. Eh r represents the men±se of 5 nimls. Brs with different letters in the sme time re signifintly different t p<0.05. 도에탄올투여 1시간과 3시간후간 TNF-α량이증가되어이들의실험과유사한결과를나타냈다. TNF-α는간세포의세포사를유발하여독성물질에의한간세포의손상에중요한작용을하는것으로알려져있으며 (26,27), 에탄올투여후초기간세포 TNF-α 증가는간세포손상을유발할수있으며, TNF-α량증가억제는세포손상을예방하는효과가있을것으로추측된다. 따라서본실험에서에탄올과녹차추출물을혼합하여투여한후간 TNF-α량을측정한결과에탄올투여군에비하여 1시간경과후에는 38%, 3시간경과후에는 7%, 20일경과후에는 7% 가각각감소되어녹차추출물혼합투여로에탄올투여에의한간조직의 TNF-α량증가가억제됨을알수있다. 에탄올에의한 TNF-α 증가는알코올에의한간세포손상의중요한요인으로에탄올에의한급성간독성방지효과가있는 silymrin도에탄올에의한간세포 TNF-α량증가억제를간세포보호작용의주요기전으로보고하고있는데 (28), 본실험결과나타난에탄올에의한간조직 TNF-α 증가에대한녹차추출물효과는에탄올에의한간손상방지효과를나타내는데에중요한작용을할것으로추측된다. 녹차추출물과에탄올이간글루타치온에미치는영향 세포내에항산화작용을나타내는물질인글루타치온에미치는에탄올과녹차추출물의영향을관찰한결과간글루타치온량은 30% 에탄올투여 1시간경과후대조군 (8.17 ±5.25 μg/mg protein) 에비하여 23% 가감소되었고, 3시간경과후에는 37%, 20일경과후에는 5% 가각각감소되어에탄올투여로간조직의글루타치온량이감소됨을알수있다 (Fig. 2). 또한에탄올과녹차추출물을혼합하여투여한쥐의간글루타치온량은에탄올투여군에비하여 1시간경과후에는 16% 증가한 3.19±5.71 μg/g tissue을나타냈고, 3시간경과후에는 3%, 20일경과후에는 8% 가각각증가되어녹차추출물혼합투여로에탄올투여에의한간조직의

4 36 김동춘 정승욱 박평심 Glutthione level (µg/g tissue) hour 3 hours 20 dys Time Fig. 2. Effets of green te extrts () on hepti glutthione levels in ethnol dministered rts. Eh r represents the men±se of 5 nimls. Brs with different letters in the sme time re signifintly different t p<0.05. 글루타치온량감소가억제됨을알수있다 (Fig. 2). 글루타치온은세포내에산화적세포손상을방지하는항산화작용을가진물질로서 Ostrowsk 등 (16) 은흰쥐를이용한실험에서에탄올과녹차카테킨을 5주간투여한실험에서에탄올투여로간글루타치온량이감소되고녹차카테킨투여로글루타치온량의감소가억제된다고보고하였고, Song 등 (28) 도생쥐실험에서에탄올투여 20시간후간글루타치온량이감소된다고보고하여본실험과유사한결과를보고하였는데, 본실험에서는에탄올투여 1시간경과시에도간글루타치온량이감소됨을나타내고있어서글루타치온의감소가에탄올투여후초기에도감소됨을나타내고있다. 에탄올에의한간세포손상은간에서대사되는과정에생성된유리기가간세포의산화적손상을유발하는것으로알려져있는데, 항산화작용을나타내는글루타치온량감소는알코올에의한간세포의산화손상에중요한요인으로작용할것으로추측된다. 또한녹차추출물의간조직글루타치온량감소억제효과는녹차추출물이에탄올에의한간손상억제효과를나타내는데중요한작용을할것으로생각된다. Ostrowsk 등 (16) 은에탄올과녹차카테킨을 5주간투여한실험에서녹차카테킨투여로에탄올에의한글루타치온량의감소가억제된다고보고하였는데, 본실험에서는 1시간경과시에도녹차추출물투여군에서간글루타치온량감소가억제되었으므로녹차추출물을투여하면에탄올에의한초기간세포손상유발을방지하는효과가나타날것으로추측된다. 녹차추출물과에탄올이간항산화효소활성에미치는영향 SOD, tlse 및 GPx 등은체내에생성된산소유리기를제거하여세포를보호하는항산화효소로서본실험에서도 30% 에탄올을투여한후간항산화효소활성도변화를관찰하였다. 간 SOD 활성도는 30% 에탄올을투여한 1시간경과후 Tle 2. Effets of green te extrts on tivities of SOD in liver of ethnol-dministered rts + Enzyme tivities (U/mg protein) 1 hour 3 hours 20 dys 38.77± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±.39 Vlues re expressed s men±se of 5 nimls. : green te extrts. SOD: superoxide dismutse. One unit of tivity ws tken s the enzyme retion, whih gve 50% inhiition of ytohrome C redution in 1 min. Tle 3. Effets of green te extrts on tivities of tlse in liver of ethnol-dministered rts + Enzyme tivities (U/mg protein) 1 hour 3 hours 20 dys 85.71± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±13.01 Vlues re expressed s men±se of 5 nimls. : green te extrts. One unit of tivity ws tken s the enzyme retion, whih onsumed 1 μmole hydrogen peroxide in 1 min. 대조군 (38.77±5.25 U/mg protein) 과차이가없었고, 3시간및 20일경과군에서도 30% 에탄올이나녹차추출물투여군과유의한효소활성도차이를나타내지않아서에탄올이나녹차추출물투여로간 SOD 활성도에미치는영향은작은것으로추측된다 (Tle 2). 간 tlse 활성도는 30% 에탄올을투여한 1시간경과후대조군 (85.71±15.55 U/mg protein) 과차이가없었고, 3시간및 20일경과후에도 30% 에탄올이나녹차추출물투여군과유의한효소활성도차이를나타내지않아서에탄올이나녹차추출물투여로간 tlse 활성도에미치는영향은작은것으로추측된다 (Tle 3). 간 GPx 활성도는 30% 에탄올을투여한 1시간경과후대조군 (18.7±1.85 U/mg protein) 과차이가없었고, 3시간경과후에도 30% 에탄올이나녹차추출물투여군과유의한효소활성도차이를나타내지않았다 (Tle ). 20일경과후 30% 에탄올투여군의간효소활성도는대조군에비하여 31% 가감소되어에탄올투여로효소활성도가감소됨을알수있고, 30% 에탄올+녹차추출물투여군의 GPx활성도는 30% 에탄올투여군에비하여효소활성도가 5% 가높아서녹차추출물투여로간 GPx 활성도가증가됨을알수있다. Pri와 Suresh(10) 는 20% 에탄올을 5일간투여한흰쥐의간 SOD, tlse 및 GPx 활성도가모두감소된다고하였고, Kundu 등 (29) 은에탄올 (3.7 g/kg) 을 35일간투여하여간 SOD, tlse 및 GPx 활성도가모두감소된다고하였으나, 본실험에서는 SOD나 tlse 활성도는모든군에서효소활성도의차이를나타내지않았고, GPx는 1시간과 3시간군에서는차이가없었으나 20일투여군에서에탄올투여로감소를나타내서, 이들의실험결과와다른소견을나타냈다. 이러한

5 녹차추출물이에탄올투여에의한초기간손상에미치는영향 37 Tle. Effets of green te extrts on tivities of glutthione peroxidse in liver of ethnol-dministered rts + Enzyme tivities (U/mg protein) 1 hour 3 hours 20 dys 18.7± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±3.19 Vlues re expressed s men±se of 5 nimls. Vlues with different letters in the sme olumn re signifintly different t p<0.05. : green te extrts. One unit of tivity ws tken s the enzyme retion, whih onsumed 1 μmole glutthione in 1 min. 실험결과에탄올투여후초기에는간항산화효소활성에미치는영향은적으나장기간반복으로에탄올을투여하면간 GPx 활성도가감소됨을알수있고, 녹차추출물을병합투여하면에탄올에의한간 GPx 활성의변화를방지할수있을것으로추측된다. 녹차추출물과에탄올이간 TBARS 에미치는영향 에탄올을투여한간조직의산화적손상을관찰하기위해 TBARS량을측정한결과 30% 에탄올을투여한후 1시간경과및 3시간경과군에서는대조군과유의한차이가없었고, 20일경과군에서 30% 에탄올투여군이대조군에비하여 137% 가증가되었다 (Tle 5). TBARS는산화적세포손상의결과주로지질과산화물의증가를나타내는지표로서이용되고있는데 (3,6), 에탄올을투여할경우간지질과산화물이증가된다는많은보고가있다 (3,6,7,16,28). Ostrowsk 등 (16) 은흰쥐를이용한실험에서에탄올투여에의한간 TBARS량증가를녹차카테킨투여로억제된다고하였고, Augustynik 등 (17) 은 5주간에탄올을투여한실험에서녹차추출물이에탄올에의한간지질과산화물의증가를억제시킨다고하여녹차가에탄올에의한산화적손상을방지할수있다고하였다. 본실험에서 20일경과군에서간 TBARS 량은에탄올투여군에비하여에탄올+녹차추출물투여군에서 0% 더낮았는데, 이는에탄올투여에의한간 TBARS 의증가량이녹차추출물혼합투여로감소된것으로생각된다. 따라서에탄올에의한산화적간세포의산화적손상을에탄올 1회투여로는알수없지만 20일간장기적으로투여 할경우현저하게나타나므로에탄올은간세포의산화적손상을유발한다고할수있고녹차추출물은이러한에탄올의산화적간세포손상을억제하는작용이있다고추측된다. 녹차추출물과에탄올이혈청 AST 및 ALT 에미치는영향 에탄올을투여한간세포의손상을관찰하기위해혈청 AST와 ALT 활성도를측정한결과 30% 에탄올을투여한후 1시간경과및 3시간경과군에서는대조군과유의한차이가없었다. 20일경과군에서혈청 AST 활성도는 30% 에탄올투여군이대조군에비하여 78% 가증가되었고, ALT 활성도는 30% 에탄올투여군이대조군에비하여 167% 가증가되었다. 혈청 AST와 ALT는간세포손상을간접적으로측정하는지표로이용되고있는데 (1,2), 본실험에서에탄올투여후 20일경과군에서혈청 ALT와 AST가증가되어에탄올투여로간세포손상이증가되었음을나타내고있다 (Tle 6, 7). 또한 20일경과군에서혈청 AST 활성도는에탄올투여군에비하여에탄올+녹차추출물투여군에서 3% 더낮았고, 혈청 ALT 활성도는에탄올투여군에비하여에탄올+녹차추출물투여군에서 5% 더낮았다. 따라서에탄올에의한혈청 AST와 ALT 활성도는에탄올 1회투여로는변화되지않았으나 20일간투여할경우현저히높게나타나므로에탄올은장기간투여하면간세포의손상을유발한다고할수있고녹차추출물은에탄올의간세포손상을억제하는작용이있다고추측된다. 따라서녹차추출물의간세포손상억제작용은에탄올에 Tle 6. Effets of green te extrts on serum AST level of ethnol-dministered rts + AST level (IU/L) 1 hour 3 hours 20 dys 81.25± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±15.19 Vlues re expressed s men±se of 5 nimls. Vlues with different letters in the sme olumn re signifintly different t p<0.01. : green te extrts. AST: sprtte minotrnsferse. Tle 5. Effets of green te extrts on the levels of TBARS in liver of ethnol-dministered rts + TBARS level (μm/g tissue) 1 hour 3 hours 20 dys 0.81± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±0.26 Vlues re expressed s men±se of 5 nimls. Vlues with different letters in the sme olumn re signifintly different t p<0.05. : green te extrts. TBARS: thiorituri id retive sustnes. Tle 7. Effets of green te extrts on serum ALT level of ethnol-dministered rts + ALT level (IU/L) 1 hour 3 hours 20 dys 25.12± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±9.91 Vlues re expressed s men±se of 5 nimls. Vlues with different letters in the sme olumn re signifintly different t p<0.05. : green te extrts. ALT: lnine minotrnsferse.

6 38 김동춘 정승욱 박평심 의한간세포손상을억제할수있는물질로서유용하게이용될수있을것으로생각된다. 요 녹차추출물이에탄올에의한조기간세포에미치는영향을관찰하기위해흰쥐에에탄올과녹차추출물을투여하고 1시간및 3시간후흰쥐의간글루타치온과 TNF-α량, 간항산화효소활성도, 지질과산화물량및혈청 AST 및 ALT 활성도를측정하였다. 또한에탄올에의한만성간손상에미치는영향을관찰하기위해서에탄올과녹차추출물을 2 일간격투여 20일후흰쥐의간글루타치온과 TNF-α량, 간항산화효소활성도, 지질과산화물량및혈청 AST 및 ALT 활성도를측정하였다. 간글루타치온량은대조군에비하여에탄올투여군에서 1시간, 3시간및 20일경과후에모두감소되었고, 에탄올과녹차추출물혼합투여로간글루타치온량이에탄올투여군에비하여증가되어녹차추출물이에탄올에의한간글루타치온량감소를억제시킴을알수있다. 간 TNF-α량은에탄올투여 1시간, 3시간및 20일경과후증가되었고, 녹차추출물과에탄올혼합투여군은에탄올투여군에비하여 1시간, 3시간및 20일경과후모두감소되어녹차추출물투여로에탄올투여에의한간조직의 TNF-α량증가가억제됨을알수있다. 에탄올투여군의간조직 TBARS량을측정한결과에탄올을투여한후 1시간경과및 3시간경과후대조군과유의한차이가없었다. 에탄올투여군의간조직항산화효소 (SOD, tlse, GPx) 활성도를측정한결과에탄올을투여한후 1시간경과및 3시간경과후대조군과유의한차이가없었다. 에탄올투여군의혈청 ALT와 AST 활성도를측정한결과에탄올을투여한후 1시간경과및 3시간경과후대조군과유의한차이가없었다. 이상의실험결과녹차추출물은간에서에탄올에의해서조기에일어나는글루타치온량감소및 TNF-α량증가를억제시키는작용이있는것을알수있는데, 녹차추출물의이러한효과는녹차추출물이에탄올에의한간손상을억제하는데중요한작용을할수있을것으로기대된다. 녹차추출물에함유된에탄올에의한간손상방지물질의검색과글루타치온및 TNF-α에대한작용기전및특성에대한연구가계속된다면우수한간손상방지작용을가진물질이개발될수있을것으로추측된다. 문 약 헌 1. Willner IR, Reuen A Alohol nd the liver. Curr Opin Gstroenterol 21: Lieer CS metolism, irrhosis nd loholism. Clin Chim At 257: Polvrpu R, Spitz DR, Sim JE, Follnsee MH, Oerley LW, Rhemtull A, Nnji AA Inresed lipid peroxidtion nd impired ntioxidnt enzyme funtion is ssoited with pthologil liver injury in experimentl loholi liver disese in rts fed diets high in orn oil nd fish oil. Heptology 27: Lee JS Supplementtion of Puerri rdix wter extrt on hnges of ntioxidnt enzymes nd lipid profile in ethnol-treted rts. Clin Chim At 37: Nordmnn R Alohol nd ntioxidnt systems. Alohol Alohol 29: Wu D, Cederum AI Oxidtive stress nd loholi liver disese. Semin Liver Dis 29: Mdonough KH Antioxidnt nutrients nd lohol. Toxiology 189: Corns CM Herl remedies nd linil iohemistry. Ann Clin Biohem 0: Tpsell LC, Hemphill I, Coi L, Pth CS, Sullivn DR, Feneh M, Roodenrys S, Keogh JB, Clifton PM, Willims PG, Fzio VA, Inge KE Helth enefits of hers nd spies: the pst, the present, the future. Med J Aust 185: S-S Pri L, Suresh A Effet of grpe (Vitis vinifer L.) lef extrt on lohol indued oxidtive stress in rts. Food Chem Toxiol 6: Kumr RS, Ponmozhi M, Viswnthn P, Nlini N Effet of Cssi uriult lef extrt on lipids in rts with loholi liver injury. Asi P J Clin Nutr 11: Nnji AA, Jokelinen K, Tipoe GL, Rhemtull A, Thoms P, Dnnenerg AJ Curumin prevents lohol-indued liver disese in rts y inhiiting the expression of NF-kpp B-dependent genes. Am J Physiol Gstrointest Liver Physiol 28: G321-G Alshuler L Green te: Heling toni. Am J Ntur Med 5: Dullo AG, Duret C, Rohrer D Effiy of green te extrt rih in tehin polyphenols nd ffeine in inresing 2-h energy expenditure nd ft oxidtion nd ft oxidtion in humns. Am J Clin Nutr 70: Beltz LA, Byer DK, Moss AL, Simet IM Mehnisms of ner prevention y green nd lk te polyphenols. Antiner Agents Med Chem 6: Ostrowsk J, Luzj W, Ksk I, Roznski A, Skrzydlewsk E Green te protets ginst ethnol-indued lipid peroxidtion in rt orgns. Alohol 32: Augustynik A, Wszkiewiz E, Skrzydlewsk E Preventive tion of green te from hnges in the liver ntioxidnt ilities of different ged rts intoxited with ethnol. Nutrition 21: Lee SI, Kim HJ, Boo YC Effet of green te nd (-)-epigllotehin gllte on ethnol-indued toxiity in HepG2 ells. Phytother Res 22: Flohe L, Otting F Superoxide dismutse ssys. In Methods in Enzymology. Pker LS, ed. Ademi Press, New York, USA. Vol 105, p Aei H Ctlse. In Methods of Enzymti Anlysis. Bergmeyer HU, ed. Ademi Press, New York, USA. Vol 2, p Flohe L, Wolfgng A, Gunzler WA Assy of glutthione peroxidse. In Methods in Enzymti Anlysis. Pker L, ed. Ademi Press, New York, USA. Vol 105, p Lowry CH, Rsenrough NJ, Frr AL, Rndll RJ Protein mesurement with folin phenol regent. J Biol Chem 193: Buege JA, Aust SD Mirosoml lipid peroxidtion. In Methods in Enzymology. Pker LS, ed. Ademi Press, New York, USA. Vol 52, p

7 녹차추출물이에탄올투여에의한초기간손상에미치는영향 Zhou Z, Wng L, Song Z, Lmert JC, MClin CJ, Kng YJ A ritil involvement of oxidtive stress in ute lohol-indued hepti TNF-lph prodution. Am J Pthol 163: Zho J, Chen H, Li Y Protetive effet of iylol on ute lohol-indued liver injury in mie. Eur J Phrmol 586: Ding WX, Yin XM Dissetion of the multiple mehnisms of TNF-lph-indued poptosis in liver injury. J Cell Mol Med 8: Htno E Tumor nerosis ftor signling in heptoyte poptosis. J Gstroenterol Heptol 22: S Song Z, Deiu I, Song M, Lee DY, Liu Y, Ji X, MClin C Silymrin protets ginst ute ethnol-indued heptotoxiity in mie. Alohol Clin Exp Res 30: Kundu R, Dsgupt S, Bisws A, Bhtthry A, Pl BC, Bndyopdhyy D, Bhtthry S, Bhtthry S Cjnus jn Linn. (Leguminose) prevents lohol-indued rt liver dmge nd ugments ytoprotetive funtion. J Ethnophrmol 118: 0-7. (2009 년 12 월 22 일접수 ; 2010 년 3 월 3 일채택 )

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DBPIA-NURIMEDIA J Koren So Food Si Nutr 한국식품영양과학회지 4(8), 117~1112(211) http://dx.doi.org/1.3746/jkfn.211.4.8.117 급성알코올중독에서헛개나무추출물을포함한식품조성물의보호효과 최근호 1 김종관 2 권승택 2 1 삼성제약 ( 주 ) 2 네오팜 Protetive Effets of Food Inluding Hoveni