* 빨放 M * 싱양 찜 è m tt 윗 6 卷쩍 H ~H 1970 X 線잖身照射가마우스의血淸 Cholesterol ester 에미치는影響 앓北大學校용흉科大學放 ~t j;ij! 科學敎室 羅雨淵 禹 7c 亨 -Abstract- Effects of X - iradiation on the Levels of Serum Cholesterol in Mouse Woo Youn Ra, M. D. and Won Hyung Woo." M. D. Department 01 Radiology Kyungpook National University. School 01 Medic iηe Taegu, Korea 1n the view of the importance of esterified and free cholesterol in lipid metabolism, as well as serum transaminase activity in the Iiver, the present study was designated to elucidate the effects of whole body X-irradiation on the levels of esterified cholesterol, free cholesterol and activity of serum transaminase in mouse. Also, in order to observe p::>ssible radioprotective action of reduced glutathione(gsh), a combination of X- irradiation and injection of GSH was done to see the effects of GSH on Iipid metabolism. A total of 132 mice were divided into four groups as : Group 1. 42 mice with whole body X- irradiation of l, OOOr, Group rr. 42 mice which were injected with GSH(200mg/ 100gm Body Weight) prior to the X- irradiation, Group III. 42 mice which were injected with the same dose of GSH without the X- irradiation, and Group N. The normal. Total and free cholesterol were estimated by the method of Zak and serum transaminase activity was studied by the method described by Frankel. The results obtained were summarized as follows : 1. The rate of cholesterol ester/ total cholesterol showed a tendency of gradual decrease byx- irradiation both in Group 1 and Group rr with no significant difference between them. " 2.. The value of cholesterol ester/ total cholesterol at 24 hours post- irradiation revealed the lowest in both Group 1 and Group rr, and there were no noticeable differences between Group III and the normal. 3. Serum transaminase activities in all groups showed with in the normallimit, and there may have been no significant parenchymatous change in the liver. B 次 1. 絡論 n. 업驗材料빛 1'l 驗方양 本論文의찢릅는 1 969 年 11..11 22 티大韓放射 *lil 짧않會 짧 2 5 次쟁術大험席上에서짧 - 꽃되었응. ) Ill. 1't 驗成 m N. 考 察 V. 練 流 1. 續論 生 { 없에放射 *lil 이 j 照射되연쩌 Hr 뼈或은組織에化없짧 - 7
化가일어냐各種代짧特헤核歡 Æ 謝에混亂 1 일어난 다는것은이마잘알려져있으며 3) 最近에 Artom lj 은 ionizing radiation 10 ) 이 n 읍힘 f \,; 때 } 에도 *13 휩한彩쩔을미 친다는것을짧表하였고本數室의朴 10) 은 1 OOOr 의 X 練을마우스에全身照射하고 24 時間後에血淸 ch 이 esterol 을얹 IJ 定한結果正常에比하여總 cholesterol 에對한 cholesterol ester 個가低下된것을觀察한바있다 生體에서 cholesterol esterification 은여러가지職器 나組織에서일어나고있지만 9, 1 3) Hf 職에依하여血淸 ch 이 esterol 이主로調節된다는것도알려져있다. 따라 서딴職의機能에障합가오면血淸 ch이 esterol ester 植 가低下된다는것도報告되어있다 17) Gluìathione 은따職, ß 명職, 副 쩔빛腦等의正常細뼈 및組織內에 널리存在하고있으며이는 glutamic acid, cysteine 및 glycine 의세가지 amino acid 로이루어진 tripeptide 이고이중의 cysteine 이含有하고있는 -SH 盛가放射絲에對한保많 1'1' 메이있다고하며 lh 12) reduced glutathione(gsh ) 은 X 絲 照射直힘 í] 에授與해 야만 X 絲에對한 f* 짧 1'Fffl 이일어난다고한다 5.1 5) 따라서마우스에 X 짧全身照짜를한後 )J 읍휠代짧에 變化가있을것이라는것은쉽게批 ð\1j 할 수있는일이 며 GSH 를 X 綠照射直前에마우스에 * 양與하여 U 읍質 代짧에마치는影쩔을剛察하는것은 하겠다. 9 햇味있는일이라 以上과같은見地에서꿇者는마우스플材料로허 - 고 X 綠으로서 l'tll 回에 1 OOOr 全身照射를한群과 X 값全 身照射直前에 GSH 플授뱃한群 및 GSH 만을授與한 群에있어서血淸 cholesterol 중 esterified form 이차치 하는比率을照 射後時閒의經週에따라 SGO- T 빛 SGP-T 와함께 ìjl lj 定히였으며그結果를얻었기에報告 하는바이다. J) 實驗材料 ll. 實驗材料및實驗方法 寶驗動物은짧北大學校隨科大學에서 G 폐育中인體重 20gm 前後의健康한마우스 132 1 뜨을性의區別없이 用하였다. 本 1'f 驗에使用한 GSH 는 Nutritional Biochemical Coorporation 짧品이다. ll) 實앓方法 j'f 驗動찢은다음의 4 群으로나누었닥 I! [J 第 1 群 : 1. OOOr 의 X 綠을 單回에照 射한群 (42 JZ!<) 第 2 群 : GSH 40mg 을題股內投與하고 1. OOOr 의 X 綠을單回에! 照射한群 (42 JZ!<) 第 3 群 : GSH 40m g 만을順降內 f 뚱與한群 (42 따 ) 使 第 4 群표常對照群 ( 6 면 ) i) X 線照射 1'f 驗떼j 物은 Plexiglass 썼의圓? 왜 ll* 答댐에 넣고木數 室의 Picker 社없 X 總深部 照射裝置로서 200Kv, 10 ma, 1mm Al, 및 0.5mm Cu filter 와 target-object distance 50cm, field size 20X20cm 의條件으로 1. OOOr 을單回에照射하였다 ii) GSH 의投與 GSH 는마우스體重 100gm 當 200mg 을 KRP 溶被 (P. H. 7. 4) O. 5ml 中에溶解되도록하여줬驗動勳願臨 內에 tubercu1in 注射器로서 x - 綠照射 5 分前에注入하였 다. iii) 血淸探取 各 rt 驗群에서各各 0.5, 1, 2. 6, 12, 24 빛 48 時間 에서 cervical decapitation 으로血被을採取하였으며血 ìiii은放置허-였다가血淸을遠心分離하였다. iv) CholesteroI 의測定 血淸 0.5ml 로부터 FoJch G ) 및 Alblink') 의方法으로 n읍質을抽出하고 Zak 'O) 의方法에依하여總 ch이 esterol 및 free chdesterol 을 ;Eiù: 히였다. v) Transaminase 의測定 SGO- T, SGP- T 活性度는 Sigma 社 19) 의方法에따라 ð\1j 定하였다. m. 實驗 成績 1) 血淸 free cholesterol 正펴 對照助物群 1. OOOr 을單回에照射한群, GSH 플 X 絲照 射 直前에뼈股內애注入한群빚 GSH 만을 題뾰內注入한群의 時間의 經過에 따른血濟 free cholesterol 의變化플 mg % 로表示하연第 1 表및第 1 圖와같다. 표 I 까對照群 32. 0::t3. Omg% 에比하여第 1 群 I![J 1 OOOr 을많回에照 i 射한群에서는 O. 5. 1. 2, 6, 12, 24 빛 48 時間에서各各 28. 8::t2. 4, 32. 5::t2. 7, 30. 3:t1. 6 35. S::t2. 4, 36.3::t3.8, 41. 8::t1. 7, 빛 34. O::t1. 9mg% 로서照射後 6 時間에서부터핸 1m되는順向을보이다가 24 時間에가장높은댄를보였다. 第 2 群인 1. OOOr,X 綠照射直前에 GSH 를願따內에注入한群에서는時間 의經迎에따라各各 32. 5:t2. 9, 32. 3::t1. 6. 31. S::t1. 7, 32. S::t3. 1. 31. 3::t3. 4, 37. 5::t2. 4, 및 34. O::t 1. Erng% 로서따驗斯떠 j 中別變폐 j 을보이지않았고, 다만 24 時 間에서 37. 5::t2. 4πg % 로서 Jt 較的높은 ' fi 따흘보였다. 第 3 群인 GSH 만을뼈뾰內에注入한群에서는時間의 經過에따라各各 30. 6::t2. 0, 28. 2::t 1. 5, 31. 2::t 1. 2, 27. 7::t 1. 6, 27. 5::t 1. 4, 33. 0::t3. 1, 빚 27. 9::t1. 4mg% 로 8
t able i. CÌ1ange of $ 하 üm Choiestetol Frêê in X- irradlated M o u s 깅 Hour 0 6 12 24 48 * G. S. H. :Reduced glutathione Figures represent the mean :1:standard error MG 100 80 60 ---0 X-IRRAOIATION.---. O.B. H. + x - RRAOIA끼 X---X G.S.H s. E 40I1ll...J;.~~ ~ 득 =.== 二 ~=--~ 짧흉 = 드 ~ ï 20 12 6 12 24 48 EXPERIMENTAL DURATlON (H R. Table 2. Fig. 1. Change of Serum CholesteroI Free in X-Irradiated Mouse Change of Serum Esterified Cholestorol in X- irradiated Mouse Hour 0 n -1 U ηu l i 6 12 24 48 * G. S. H. Reduced qlutathione Fiqures repre3ent thpresent the mean :1:standard error. 서若千낮은 f 直이였으나 1'1: 驗뼈댐 j 中別짧따 } 을보이 37.3:1:2.0. 38.5:1:4.4. 33. 5:1:2. 3. 28.5:1:2. 6 빚 32. 1 지 않았다 :1:1. 6mg% 로서 241 양間에따驗期間中가장낮은 { 直를보 2) 血淸 es terif ied ch olesterol 였다第 3 群인 GSH 만을題뾰內注入한群에서는時間 第 2 表및第 21 댐에서보는바와같이第 1 햄인 X 값의經迎에따라各各 38. 5:1: 1. 8. 35. 5:1: 1. 9. 39. 0:1:2. 3. 없며照射群에서는正뺨對照群 35.0:1:1. 9mg% 에比히 3 8. 5 :1: 1. 7. 36. 0:1: 1. 6. 38.5:1:3. 4 및 37.3:1: 1. 8m g% 로서 여時問의經過에따라各各 34. 0:1:4.3. 36. 5:1:2. 7. 35. 0 正?5- 對照群에 J.t 하여若千높은 f 直플보였으나特왔할 :1:1. 8. 36. 9:1:1. 5. 34.2:1:3.4. 31.3:1:2.3 빛 31. 2:1:2. 4 만한差를볼수없었다. 깐 mg% 로서 X 級照射後 1 2 1 광! 펌까지差씻를보이지않았 3) esterified cholesteroi 의總 cholesterol 에對으나 24 時間과 48 時間에서낮아지는個向을보였다. 第한 tt 2 群인 GSH 플 X 經照射直前에 l 따 l 따內에注入한뼈 - 血淸 "1 l 總 cholesterol 과 esterified cholesterol 의比는 에서는빠間의經過에따라各各 40.0 :1: 2.6. 38. 3:1:1. 4. 第 3 表빚웰 31 템와같다. 9
MG 10 8 60 ---0 ~ -IRRADI ~ 낀 써 Q--- 8 G S. H. + X -IRFlAOIATION x--.-x 'G.S.H S. E 4아轉드 ; 씀르는 ~. ~ * 프드드 ----* 20 12 6 12 --L-. 24 48 Fig. ll. EXPERIMENTAL DURATION (HR.) Change of Serum Esterified Cholesterol in X- Irradiated Mouse Tab!e 3. Change of Serum Cholstrol Ester/ Total Cholesterol Ra tio in X- irradiated Mouse * G. S. H.; Redu~"d glutathione Figures represènt the mean:!:standard error % 헤 -- 0 X-1RRADIATlOI'J ~ --a G. S. H. +- X-IRRADIATlON 빠x---x G.S. H. o 빠 - * 1 1 1 i 선 --,===F 二二 -T 톨 -r 20 l-j...l o 1 2 6 12 24 E XPERI M E NT,β L. DU RATION ( HR.) ----~ 48 Fig. m. C α ang e of SerU!l1 Ci101esterol Ester/Total Cholesterol Ra tio in X- irradiated Mousé 第 1 群인 X 線單回照射群에서는正常對照群 58.2 :!:4.5% 에比하여時間의經過에따라各各 54. 1:!:6. 7. 52. 4:!:5. 4, 53. 6:!:2. 9, 50. 7:!:7. 4, 47. 2:!: 6. 3. 42.7:!: 5. 6 및 47. 6:!:4. 1 이었으며대체로낮은뼈를나타냈으 며 X 總照져 'r 後 24 時間에가장낮은 { 直플보였다. 第 2 群인 GSH 를 X 짧照射直前에 J1íH 칭內에注入한 n U
Table 4 Change of Serum Transaminase Activitÿ ln X- irradiated 1\1ousé [ ] X 一 irradi at ion 1, OOOr G f * G O p i Q υj i G. S. H. & X- irrad iation S.G.P- T J G. S.H. S. G. O-T G.S.H 0 0. 5 1 2 6 mμ없ω%30. 0:t3. 9 30. 3:t3. 3 33. 6:t3. 9 29. 5:t1. 9 36. 2:t3. 5 29. 2:t4. 2 37. 3:t2. 9 27. 7:t2. 3 64. 8:t4. 8 69. 7:t3. 4 69.3:t4.2 74. 5:t3. 2 72. 0:t2. 6 65. 5:t1. 9 72. 3:t3. 5 65. 5:t4. 7 30. 0:t3. 9 30.5:t4.3 25. 5:t3. 1 26. 0:t1. 9 28. 0+2.3 25.3:t3.5 26. 3:t2. 4 29. 3:t4. 4 64. 8:t4. 8 76. 3:t2. 3 77. 3:t3.9 68. 7:t1. 3 77. 6:t4. 2 68. 3:t4. 7 74. 5:t2. 6 76. 3:t3. 1 3. 00:t3. 9 64.8:t4. 8 24. 5:t1. 6. I 74. 0:t2. 0 29. 0:t3. 0 70. 5:t1. 6 26. 5:t4. 4 59.-0':t1.6 22. 0:t1. 4 64.'O:t1. 2 27. 5:t1. 6 I ' 63. 0:t2. 0 24. 5:t1. 6 1. 61.. 0:t4. 0 28.0:t1.5-70. 5:t1. 6 * Serum Glutamic Pyruvic Transaminase ** Serum Glutamic Oxaloacetic Transaminase Figures represent mean::tstandard error (Sigma unit) 10 S. G. O. ()--o )( -IRRA01ATlON. --. G. S. H + X- IRRADIATION X-- XG.S. H eo~, 1 I 1 T \ 1' ----l[<--- --"'-- -- 톨 뼈 ~:~~ --=~-τ 며 60γ if---- - --'f- E 3 (f) J ====-~? ::r 4 짧듬 ; 프프 $ 二 =x=r 二늘곽 ') 1 2 6 ~. ----1-... 12 2 4 -'- 48 EXPERIMENTAL DURATION (HR. ) Fig. N. Change of serum Transaminase Activity in X- irradiated Mouse 群에서는 rr 풍間의經過에따라 55.2:1=8.4, 54. 3:t7. 5, 53. 9:t4. 9, 51. 8:1=5. 8, 51. 7:t6. 6, 43.2:1=7.1 및 48. 6:t 3. 8% 로서대체로 IE 쩌對照群에比해서낮은個이며第 1 群과같은個向을보여주나第 1 群보다若千높은 f 펴 를나타내고있다 - 第 3 群인 GSH 만을 I 따 l 흩內에注入 한群에서는 l 댐 - 間의經過에따라各各 55. 7:t6.5, 57.6 :t4.4, 55.7:1=4.9, 56.9:t8.1, 56. 9::t4. 6, 54.0 :t 7.2 및 57. 7:t5. 9% 로서때驗期間中有 ii 한差플보이지않았 다 4) SGO-T 및 SGP-T 各群에있어서암驗期間中의 活性度는第 4 表및第 41 펴와같다. SGO-T 및 SGP-T 의 øp 第 1 群인 1, OOOr 의 X 絲을照射한群에서는 SGO- T 가正常對照群 64. 1?:t4. 8 Sigma unit 에比해서앉驗 期 폐中 65. 5::t4. 7 에서 74. 5:t3. 2 施圍內에있었으며 SGP-T 는正땀對照群 30. 0:t3. 9 Sigma unit 에 比해 서 27. 7:t2. 3에서 37. 3:t2. 9의 $M웹內에 있어서有意한 變행I을볼수없었다. 第 2 群인 GSH 를 X 綠 照 射 直前에 n쟁 & 효內에注入한 群에서는 SGO- T 는 68. 3:t4. 7에서 77. 6:t4. 2 範圍內에, SGP-T 는 25. 3:t3. 5에서 30. 5:t4. 3의範圍內에있어서 正常對照詳에比하여有意 한差를볼수없었다. 第 3 群인 GSH 만을服 l흩內에注入한群에서는 SGO- T 는 59. 6:t1. ( 에서 74. 0:t2. 0의 íll7i~ 협內에 SGP 一 T 는 ~2. 0 :t1. 4에서 29. C:t3. C 範國內에있어서正常對照群의그 것과比較해서有意한差가없었다 IV. 考 察 Klein Bl, Revesz 14l 빚그外많은쩌究者들의 홈f 究結 : 뽕 4, 1 8) X~ 과 같은放射綠 JlIil 射로서 生體의 kìjl뼈및 - 11-
組織에各種代때에甚한障害 7} 招來되고特히核歡代 보였으나그測定個는 X 線照射만의 群과 GSH 順용內 짧에는淑甚한變化가招來되어 D.N.A. 合成이않著하 게姐害되고그結架細뼈分짧이 柳폐될 뿐아니파나 아가서는짧白質代빼및 解廳作用에도 큰影챙을준다 는事 n 을考! 성한다면 )j=f 鐵에서의 ch:>lesterol esterification 을主管하는各種 enzyme system 에도 X 練은적 지않는影썽을미치리라는것은쉽게 推 ftu 할수있다. 따라서 :2jζ f1 驗에서와같이마우스에 1, OOOr 의 X fjr 全 身照射後 12f랴間에서 24 時問에 이르기까지血淸 Cholesterol ester 個의相對的低下와 free Cholesterol 뼈의 上昇은 X 級照射가血淸 cholsterol ester 의 主供給原 인 Jl:f 職組織 웬l뼈內에서 Cholest er이에서 free fatty acid 를結合시켜주는機轉에어떤彩經을준다는것을 말하는것이고陽管에있어서의 Cholesterol ester 의 f휩 動으로因하여 이루어지는 cholesterol esterification 은 血淸 U앓딸에는크게影쩔을마치지 않는것으로!t:'t정된 다. GSH 를 X 짧照射를받기 直前에 l뼈 ~ 內에 注入한 結果 ( 第 2 群 ) 얻은 總 cholesterol 에 對한 cholesterol ester 의比는低下되나그測定뼈가 X 썼全身照射만의 第 1 群과 GSH 만을題뾰內에注入한 第 3 群의 中間에 있다는것은 GSH 가放射綠에對한生 1뽑의化學的保짧 1'1' 用이있다는것을 4, 7, 12, 1 6) 말하는것이다. B규 î'l: 質염BH힘의 破壞 R흉가장삶敏한反應을 이르키는 血웹中 SGO- T 와 SGP-T 의活性度가正렘對照群의그 것과比해서別差많플볼수없는것은 f1 驗期間中에 esterified cholesterol 의 測定뼈에 低下는있어도 Jt1' 첼 質細뼈의破짧가없다는것을意味하는 것.E.. 로 生짧된 다 y. 結論 X 綠全身照射가마우스의血淸 ch이 esterol ester 에 미치는影챙을보기짧하여 1 32 m; 의 마우스를 1, 000r의 X 絲만을單回에照射한群, GSH 를 1. OOOr 의 X 綠照 射直前에마우스의題뾰內에注入한群의 3 群에對하여 血淸 cholesterol ester 와總 Cholester이의 Lt와 SGO- T 및 SGP-T 의活性度를 0. 5, 1, 2, 6, 12, 24, 빚 48 時 間의經過에따라測定하여다음과같은結論을얻었다 1) 1, OOOr 의 X 線을마우스에 照射한 後 血淸 總 cholester 量에對한 cholesterol ester 의比는 1'f 驗 期間 中낯아지는 f힘向을보였고 24 時間에가장낮은植를보 였다. 2) GSH 플 X 線 照射順前에마우스 n칭뾰內에注入 한群에서는總 cholesterol 에對한 ch이 esterol ester 의 比는 X 綠 照射만의群과같이 역시낮아지는 1없向을 注入만의합의 0 1' 間에있었다 3) GSH 만을마우스題뾰內에投與한群에서는總 ch이 esterol 에對한 cholesterol ester 의比에變動을볼수없었다. 4) 血淸中 SGO- T, 및 SGP-T 의活 { 生度는各 î'l: 驗群에서有껑 한變化는없었다. REFERENCES 1) Artom, C. : 10η iziη~g Radiation, Artherosclerosis aη d Liþid Metabolism iη Pigeoη s. Radiat. Resc., 26:165, 1965. 2) Alblink, M.].: The Microtitratioη 01 Total Fatty Acids 01 Serum with Notes 0η the Estimation 01 Tr썽 lyceride., f. Liþid Resc., 1:53, 1959. 3) Bac.q, Z. ]I.'I. and. and Alexander, P.: F.μη da m eη ta ls 01 Radiobiology, Pergamon Press, Londoη, 1961. 4) Bacq, Z. M. and Alexander, P.: 1ηψortance lor Radioþrotection 01 Rectioη 01 Cells to Sulfhydr:y l and Di sμ llid e Comþouη ds. Nature, 203:162, 1964. 5) Eldjarn, L., 18th Aηη. SYlηþ.F.μη d. Cancer Resc. & Cell Rad. Biol., U,η iver. Texas, 1964. 6) Folch, ]., Lees, M and Sloane Stanly, G. H.: A Simþle Method lor the the Isolatioη aη d Pμ rilication 01 Total Liþids Irom Animal Tissμ es. ]. Biol. Chem., 226:497, 1957. 7) Jellum, E. : 1nt er actioη 01 Cysteamine and Cystein Derivatives with Nucleic Acids and Nucleoþroteins. 1nt. f. Rad Biol., 9:185, 1965. 8) Klein, G. and Revesz, L.: Quaη titative Studies on the Multiþlication 01 Neoþ!astic Cells in Viz,o. 1. Gro!ν th Curves 01 the Ehrlich and MC1M Ascites Tμ mors. ]. Nat. Caη cer 1:η st. 14:229, 1953. 9) Paoletti, R. : Liþid Pharmacology. Academic Press, New York, 1964. 10) Park, ]. S. : Persoη al Communication. 11) Phil, A. and Eldjarn, L.: Advannced η Radiobiology. Oliver aη d Boyd, Edinburgh, 1957. 12) Phil, A. and Edjarn, L. : Pharmacological Asþects 0110η izing Radiation aη d Chemical Protection in Mammals. Pharmacol. Resc., 10:437, 1958. 13) Poppêr, C. H. and Schaffer. F. : Liver. Strμ cture and Fu η ction. The Blakistoη Division, McGrow- - 12 -
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