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1 J. Exp. Biomed. Sci. 11 (2005) Patterns of Antimicrobial Resistance and Detection of meca Gene from Methicillin Resistant Staphylococcus aureus Isolated from Healthcare Facilities and U.S. Military Hospital in Korea Chin-Su Sin 1, Gyu-Sang Lee 2, Kwan-Hun Lim 2 and Jong-Bae Kim 1,2 1 Department of Biomedical Laboratory Science, Graduate School of Health and Environment, 2 College of Health Science, Yonsei University, Wonju , Korea A total of 108 strains of MRSA (Methicillin-resistant Staphylococcus aureus) clinical isolates was collected from 121 st general hospital (U.S. military hospital), Korean healthcare facility from January to March in 2005 and Wonju Christian hospital in Antimicrobial susceptibility test by Vitek System and MIC test using oxacillin and cephalothin stripes by E-test were executed. PCR based detection of meca gene was performed on the all of MRSA clinical isolates, too. MRSA clinical isolates were characterized with antimicrobial resistance patterns, PCR based detection of meca gene and validation of the multiplex PCR strategy of SCCmec among clinical isolates. Key Words: MRSA, VITEK, E-test, MIC, meca, PCR, SCCmec 서 Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) 는 1961 년처음으로영국에서분리된이래현재는전세계에널리분포하고있으며, 원내감염의집단적발생뿐만아니라지역사회감염에서도그원인균으로분리되는빈도가증가하여문제가되고있다. 현재임상에서분리되는황색포도구균의 90% 이상은 penicillin에내성균주며 methicillin 내성균주의비율은나날이증가하고있다 (Kim et al., 1997, Hanssen et al., 2004, Ko et al., 2005). 미국의경우병원내에서분리되는전체황색포도구균 (Staphylococcus aureus) 중에서 methicillin 내성균주가차지하는비율은 1975년당시 2.4% 에불과하였으나 1999년에는 50% 이상으로급격히증가하였다 (Sakoulas et al., 2001; Matsumura et al,. 2002; Coombs et al., 2004; Shukla et al., 2004). 국내사정도마찬가지여서 1970년대에 5% 정도를차지하던 MRSA 비율이 80년대부터급격히증가하였고 1996년전국병원감염률조사연구에서병원에서분리되는황색포도구균중 methicillin 내성균주가차지하는비율은 83.7% 나타났다 (Lee et al., 1996; Chong et al., 1997; * 논문접수 : 2005 년 11 월 3 일수정재접수 : 2005 년 11 월 29 일 교신저자 : 김종배, ( 우 ) 강원도원주시흥업면매지리 234, 연세대학교보건과학대학임상병리학과 Tel: , Fax: kimjb@dragon.yonsei.ac.kr 론 Woo et al., 2000; Lee et al., 2001; Ko et al., 2005). 최근에는지역사회에서분리되는 MRSA 내성비율도점차증가하고있는실정이다 (Coombs et al., 2004; Shukla et al., 2004; Lu et al., 2005). MRSA 균주가증가하면서감염증또한심각한문제로대두되고있다. 특히병원내감염에서문제가되는데미국의자료에의하면 MRSA에의한병원내감염이 25% 에달하는것으로보고되었다. 국내의경우 1996년실시된병원감염률에대한연구에서 MRSA 균이원인균의 14.4% 를차지하였으며점차증가하는추세이다 (Lee et al., 1996, Lim et al., 1997, Sakoulas et al., 2001, Campbell et al., 2004, Ko et al., 2005). 한편유럽각국의 MRSA의비율은스칸디나비아지역은 1% 미만, 스페인, 프랑스, 이탈리아등지에서는 30% 로지역과국가에따라많은차이가있지만, 평균 12.8% 의높은비율로보고되어있다 (Felten et al., 2002; Robinson et al., 2003; Hanssen et al., 2004, 2005; Nathalie van der Mee-Marquet et al., 2004). 우리나라의경우대부분의대학병원과종합병원에서분리되는 MRSA는병원내감염중창상감염, 폐렴, 균혈증등의주요원인균으로작용하며, 전체병원감염원인균의 50% 내외를차지한다. 현재임상에서분리되는황색포도구균의 90% 이상은 penicillin 내성균주며 methicillin 내성균주인 MRSA 균은 beta-lactams, aminoglycosides, macrolides와같은많은항생제에내성을나타내며소수의항생제만이치료에유용하므로임상분리 Staphylococcus aureus 중에서 methicillin

2 내성여부의신속한검출과동정이필요하다. 그러나 methicillin 내성의발현은배지의온도, 염농도같은성장조건에영향을많이받으므로보통의항생제감수성검사로는판정이부정확한경우가많아문제점으로지적되고있다 (Hanssen et al., 2004; Ko et al., 2005). MRSA 균의 beta-lactam제에대한내성기전은 beta-lactam 계열항생제에대한친화성이낮은 penicillin-binding protein 2' (PBP2') 의유도생산에의한것으로써이단백질을 code하고있는것이 meca 유전자로밝혀졌다 (Hanssen et al., 2004). 한편 pbp-2a의발현을조절하는기능을나타내는조절유전자인 meci과 mecri 유전자가 meca 유전자의상부에존재하는것이밝혀졌으며이들조절유전자는각각 meca 발현억제단백을합성하는유전정보를지니고있다. 한편 mecri 유전자는세포내신호전달에관여하는 5' 말단부위와 penicillin 결함에관여하는 3' 말단부위로구성되어있음이밝혀졌다 (Coombs et al., 2004). 본연구에서는국내대학병원과국내에주둔하고있는미8군소속 121병원에서분리된 MRSA를대상으로항균제감수성양상에의한표현형및내성관련유전자인 meca에대한 PCR 반응으로유전형을비교분석하였다. 이러한연구를통해국내병원과미국인대상병원에서분리된 MRSA의항생제내성유형과분자생물학적인특성을분석비교함으로써유전형의분포와다양성을알아보고 1999년도강원도원주기독병원에서분리되었던 MRSA 38주를대상으로연도별항생제내성유형과이에따른분자생물학적인특성을비교하여포도상구균의항생제내성의변화형태를알아보고자하였다. 재료및방법 1. 임상검체로부터황색포도상구균 (S. aureus) 의분리 2004년 1월부터 2004년 3월까지서울에주둔하고있는미육군병원 121 st General Hospital과국내의서울과부산지역병원진단의학과 (Korean Healthcare Facility) 의가검물에서분리한 MRSA 임상분리균주각각 30주와 42주 ( 서울 17주, 부산 25주 ) 및 1999년강원도원주시에소재한원주기독병원에서분리된 MRSA 38주를사용하였다. 본실험에사용한 MRSA 균주가분리된가검물의내용은 Table 1과같다. 임상분리균주는 5% 면양혈액이포함된혈액배지에배양하고균주의동정은고전적인방법과 VITEK (Vitek System, Hazelwood Inc., U.S.A) GPI를사용하였다. 본실험에사용한 MRSA 균주는모두 catalase 검사및 coagulase 검사에서 (BD, BBL, Staphyloslide Latex Test) 양성결과를나타내었으며, 이들공시균주를 mannitol salt agar (MSA) 에도말후배양하였다. 2. 감수성실험항생제내성유형을파악하기위한항생제감수성실험은 VITEK System에의한최소억제농도 (minimum inhibitory concentration; MIC) 를이용하였다. 실험방법으로는실험균주를혈액배지에서 37, 18시간배양한후단일집락을백금이로취하여멸균된 0.45% 생리식염수 1.8 ml에부유한후, VITEK colorimeter에서최종탁도를 0.5 McFarland barium sulfate turbidity standard에맞추고교반기로 2~3초동안교반한다음이부유액을취하여 VITEK GPS card와 susceptibility card에접종하였다. 그리고 VITEK system에서요구하는방법및기준에따라 MIC를측정하였다. MIC에측정은 ampicillin, ampicillin/sulbactam, cefazolin, ciprofloxacin, erythromycin, gentamicin, nitrofrantoin, oxacillin, penicillin-g, clindamycin, tetracycline, vancomycin, trimethoprim/sulfamethoxazole 등의항균물질을사용하였다. 항균제감수성검사를위한표준균주로는 S. aureus ATCC 43300, S. aureus ATCC 및 Escherichia coli ATCC 25922를사용하였다. 한편 Oxacillin과 cephalothin strip (AB Biodisk, Solna, Sweden) 을이용하여 CLSI (Clinical laboratory standard institute) guideline에따라 Muller-Hinton agar에공시균주를고루도말하여배지양쪽에 oxacillin과 cephalothin strip를올려놓고 37 에서 18시간배양한후형성된증식억제대에해당하는 MIC를판정하였다. 감수성검사를위한표준균주는 VITEK system에서사용된표준균주와동일한균주들을사용하였다. 3. DNA 추출및정제세균의 genomic DNA를얻기위해서세균을 brain heart infusion (Difco, MI, U.S.A.) broth 4 ml에접종하여호기성상태로 37 에서 24시간배양하였다. 배양액을 Eppendorf tube 에 1.5 ml씩분주하고 12,000 rpm으로 10분간원침시킨후침전된 bacterial pellet을 DNA isolation kit (QIAamp DNA Mini Kit, QIAGEN Inc., Chatsworth, U.S.A.) 를사용하여 genomic DNA를추출, 정제하였다. 정제한 DNA의농도는 260/ 280 nm에서흡광도를측정하여계산하였다. 4. meca 유전자의중합효소연쇄반응 VITEK system을통하여확인된 MRSA 균주의 meca gene 에특이적인 oligonucleotide를고안하였다. NCBI (National Center for Biotechnology Information) web site ( nlm.nih.gov/) 를통해서 meca의 sequence를수집하고, 이를대상으로 meca sequence에대하여 multiple sequence alignment를시행하였다. 이결과를바탕으로 Primer 3 program ( 을이용하여 meca-f, meca-r의 PCR primer를고안하고주문제작 (Bionee Co. Daejeon, Korea) 하

3 Antimicrobial agents Table 1. Antimicrobial resistance patterns of MRSA clinical isolates by VITEK system Healthcare facility 121 st KHF Wonju Number of isolates AMP, AMS, CZ, OX, PEN AMP, AMS, CZ, OX, PEN, ERY AMP, AMS, CZ, OX, PEN, ERY, CC 3 3 AMP, AMS, CZ, OX, PEN, CIP 2 2 AMP, AMS, CZ, OX, PEN, ERY, CIP 1 1 AMP, AMS, CZ, OX, PEN, TET 1 1 AMP, AMS, CZ, OX, PEN, TET, ERY, GEN, CIP 2 2 AMP, AMS, CZ, OX, PEN, TET, ERY, GEN, CIP, CC AMP, AMS, CZ, OX, PEN, TET, ERY, GEN, CIP, CC, SXT AMP, AMS, CZ, OX, PEN, TET, GEN, CIP, CC, SXT 4 4 AMP, AMS, CZ, OX, PEN, TET, GEN, CIP, SXT 1 1 AMP, AMS, CZ, OX, PEN, TET, CIP, SXT 1 1 AMP, AMS, CZ, OX, PEN, GEN, TET 2 2 AMP, AMS, CZ, OX, PEN, GEN, TET, ERY 1 1 AMP, AMS, CZ, OX, PEN, GEN, TET, CC 3 3 AMP, AMS, CZ, OX, PEN, GEN, TET, ERY, CC, CIP AMP, AMS, CZ, OX, PEN, GEN, TET, ERY, CIP 2 2 AMP, AMS, CZ, OX, PEN, TET, ERY, CIP 5 5 Total Abbreviations. AMP; ampicillin, AMS; ampicillin/sulbactam, CC; clindamycin, CIP; ciprofloxacilin, CZ; cefazolin, ERY; erythromycin, GEN; gentamicin, OX; oxacillin, PEN; penicillin, SXT; trimethoprim/sulfamethoxazole, TET; tetracycline 여본실험에사용하였다. 본실험에서고안한 primer와 Oliveira et al. (2005) 이고안한 primer (Table 4) 에대한민감도시험을시행하였다. 중합효소연쇄반응은 AccuPower PCR PreMix (Bioneer. Co. Daejeon, Korea) 를사용하여주형 DNA 농도를최초 30 ng으로시작하여 10 배씩순차적으로최종농도가 0.3 pg이되도록희석하여각각의주형 DNA 2 µl를첨가하고각각의 primer set를 20 pmole/µl를최종농도가 2 pmol이되도록넣은후멸균증류수로최종반응양이 20 µl이되도록하여 thermal cycler (GeneAmp PCR System 2700, Perkin-Elmer Cetus, Boston, MA, U.S.A.) 를사용하여 DNA의증폭을시도하였다. MECA-F, R primer는 47 에서 annealing 을실시하였다 (Oliveira et al., 2005). 반응이종료된후 0.5 µg/ml의 ethidium bromide를첨가한 1.5% agarose gel에전기영동하여 ultraviolet trans-illuminator (Vilber Louramat, Mame La Valle, France) 로각각의증폭산물들을비교관찰하였다. meca gene을검출하기위한중합효소연쇄반응은 meca-f, meca-r의 PCR primer를사용하여민감도시험과같은방법으로시행하였다. 결과 1. 황색포도상구균 (S. aureus) 의분리본실험에사용한모든균주는 catalase 검사와 coagulase 검사에서모두양성을나타냈으며, Mannitol salt agar (MSA) 에서배양한결과 mannitol을분해하여산을생성하는과정에서 ph indicator인 phenol red에의해노란색집락을나타내었다. 2. 항생제감수성검사결과비교분석 Vitek 자동분석기를사용한각각의항생제에대한 MIC를측정한결과모든임상분리균주들이 ampicillin, penicillin, ampicillin/sulbactam 그리고 oxacillin에대해내성을나타냈으며, nitrofurantoin과 vancomycin 에는모두감수성을나타내었다 (Table 1). 121 st General Hospital에서분리된 30주의 MRSA 균주들은 tetracycline, gentamicin, rifampin, trimethoprim/sulfamethoxazole 에감수성을나타내었으며, ciprofloxacin, clindamycin, erythromycin에각각 13%, 10%, 그리고 55% 의내성을나타내었다. 서울지역병원에서분리된 MRSA 균주들은 tetracycline, gen

4 Table 2. MIC of MRSA clinical isolates by E-test Healthcare facilities Antibiotics MIC (Minimum inhibitory concentration) >4 >8 >16 >32 >64 >128 >256 oxacillin st cephalothin Number of isolates 30 KHF Wonju oxacillin cephalothin oxacillin cephalothin Total 83 Table 3. Oligonucleotide sequences used for amplification in this study Oligonucleotide Sequence (5' to 3') Tm ( ) Expected size (bp) of PCR product meca-f GGTGAAGTAGAAATGACTGA meca-r CTCATATGCTGTTCCTGTAT MECA-F* TCCAGATTACAACTTCACCAGG MECA-R* CCACTTCATATCTTGTAACGCG *Oliveira et al. (2005) tamicin, ciprofloxacin, clindamicin에모든균주들이내성률을나타냈으며, erythromycin에서는 94% (16균주), rifampin에서 17% (3균주), trimethoprim/sulfamethoxazole에서는 58% (10균주 ) 의균주가내성을나타내었다. 또한같은기간부산지역병원에서분리된 MRSA 균주들의내성률은 tetracycline에서 64% (16균주), gentamicin에서 60% (15균주), rifampin에서 4% (1균주), trimethoprim/sulfamethoxazole에서 20% (5균주), erythromycin에서 72% (18균주), clindamycin에서 56% (14균주 ), ciprofloxacin에서 68% (17균주) 의내성을보였다. 한편 1999년원주에서분리된 MRSA 균주들은 tetracycline에대부분 (98%) 감수성을나타내었으며 trimethoprim/sulfamethoxazole에서는모두감수성을나타내었다. 또한 gentamicin, ciprofloxacin, clindamycin, erythromycin, rifampin에서는각각 75%, 93%, 90%, 95%, 그리고 5% 의내성률을나타내었다 (Table 2). 121 st General Hospital에서분리된 30주와한국병원에서분리된 17주, 그리고원주기독병원에서분리된 36주를 oxacillin과 cephalothin strip를사용하여 MRSA 분리주들에대한 MIC를비교하였다. 121 st General Hospital에서분리된 MRSA 균주에서는대부분의균주가 oxacillin에대한 MIC가 8 µg/ ml 이하인반면, 한국병원과원주기독병원에서분리된균주에서는모든균주들이 256 µg/ml 이상의강한내성을보였다. 또한 cephalothin에서는 121 st General Hospital 분리균주 30균주중 27개의분리균주가 4 µg/ml 이하의내성을나타낸반면한국병원에서분리된균주들은대부분 64 µg/ml 이하의내성을나타냈다. 이로서 121병원과국내병원에서분리 된균주간에는내성도의현저한차이를볼수있었다. 반면 1999년원주기독병원과 2004년도에한국병원에서분리된 MRSA 균들의내성도는 oxacillin 약제에서는모두가 256 µg/ ml 이상의강한내성을보였고 cephalothin에서는 64 µg/ml 이상의내성을보였다. 1999년과 2004년도에분리된균주들의내성률을비교하여본결과 oxacillin에서는모두 256 µg/ ml 이상의강한내성을보여주었으나, cephalothin에서는 2005년도에분리주중약 80% 의균주가 128 µg/ml 이상의내성을나타내었으며, 1999년도에는 58% 가 128 µg/ml에내성을나타내었다 (Table 2). 3. 중합효소연쇄반응에사용된 PCR primer 의민감도시험 MRSA의 meca gene을검출하기위해고안된 PCR primer 와 Oliveira et al. (2005) 이사용한 PCR primer들을 (Table 3) 비교해본결과이번실험에서새롭게고안한 primer는 3 pg DNA에서도양성반응을나타내었으나기존에사용되었던 primer는 30 pg DNA에서양성으로나타났다. 따라서본실험에서고안한 meca primer set가기존의 Oliveira et al. (2005) 이사용한 primer에비하여 10배이상 meca 유전자검출에민감한것으로나타났다 (Fig. 1). 4. 중합효소반응을이용한 meca 유전자검출이번실험에서고안한 primer를사용하여중합효소연쇄반응을시행한결과양성대조군으로사용된 S. aureus ATCC 43300과 108균주의임상분리균주에서 meca gene primer를

aureus ATCC 43300; 30 ng), lane 2~6; ten-fold serial dilution of template DNA. Fig. 2. PCR amplification of meca gene for MRSA clinical isolates.

5 Fig. 1. Sensitivity test for PCR amplification of meca gene. Left; primer designed for this study (meca-f, R), right; primer used in reference (MECA-F, R) lane M; 100 bp DNA ladder (Takara), lane N; negative control, lane 1; template DNA (S. aureus ATCC 43300; 30 ng), lane 2~6; ten-fold serial dilution of template DNA. Fig. 2. PCR amplification of meca gene for MRSA clinical isolates. Lane M; 100 bp DNA ladder (Takara Bio Inc, Japan), lane P; positive control (S. aureus ATCC 43300), lane 1~14; MRSA clinical isolates, lane N; netative control. 사용한 PCR에서예상하였던 339 bp의 PCR 산물이검출되었다 (Fig. 2). 고 1959년 methicillin이 penicillin resistant Staphylococcus auresus 감염증에사용된이래 1961년에영국에서 MRSA가임상검체에서처음으로발견된이래유럽을비롯하여전세계적으로 MRSA는중요한병원감염의중요한원인균이되고있다. 본연구에서는국내에주둔하고있는미군들의임상가검물에서분리된 MRSA 균주와국내병원환자들의가검물에서분리된 MRSA 임상분리균주들간의항생물질에대한내성을비교분석하였으며 MRSA를유발하는 meca gene의검출을시도하였다. 2005년 1월부터 4월까지서울에소재한미8군소속 121 st General Hospital laboratory에서분리한 30주의 MRSA 임상분리균주와국내병원 (Korean health facility, KHF) 에서분리한 42주의 MRSA 임상분리균주, 그리고 1999년강원도원주시소재의원주기독병원에서분리한 36주의 MRSA 임상분리균주를대상으로하였다. 연구결과 2005년 121 st General Hospital에서분리한 MRSA 임상분리균주들이 tetracycline, gentamicin, trimethoprim/sulfamethoxazole에모두감수성을나타내었으며서울지역에서분리한모든 MRSA 임상분리균주들은모두내성을나타낸것은 MRSA 임상분리균주들간의내성도의차이가확연하게 찰 다른것으로나타났다. 그리고 clindamycin과 ciprofloxacin의경우 121 st General Hospital에서분리한 MRSA 임상분리균주들은약 10% 이하의내성률을나타내고있으나서울지역병원에서분리한 MRSA 임상분리균주들은 100% 의내성을나타내고있다. 또한서울지역병원에서분리된 MRSA 임상분리균주들이같은시기부산에서분리된 MRSA 임상분리균주들에비해항균제에대한내성도가약 10~40% 정도로강한내성도를나타내고있다. 1999년도원주에서분리된 MRSA 임상분리균주들이 2005년도부산지역에서분리된 MRSA 임상분리균주들에비해 5~20% 정도의강한내성을나타낸반면 trimethoprim/sulfamethoxazole와 tetracycline에서는모두감수성, 그리고 2% 의내성률을나타내었다. 본연구의결과로시기에따른항생제의내성도와지역적인차이에따라부산과서울그리고국내에거주하는외국인에서분리한 MRSA 임상분리균주들에대하여항생제에따라내성도의차이를알수있었다. 이러한 MRSA 임상분리균주의항생제에대한내성도의지역별차이는국내에서의항균물질남용의결과항생제에대한내성률이심각한상황에이르고있음을의미한다고할수있다. 미국의경우병원내에서 200만명의환자들이감염되고있으며이감염의 60% 는내성세균에의한감염으로그중 40% 는 MRSA에의한것으로알려져있다. MRSA 감염은 1998년에 12% 이던것이 2003년에는 43% 로증가되었으며 Ko et al. (2005) 에의하면 MRSA 임상분리균주는 ciprofloxacin에 14%, clindamycin에 3%, tetracycline에 3%, 그리고 trimethoprim/sulfamethoxazol에 1% 의내성률을나타내었으며 vancomycin, gentamicin, nitrofurantoin, 그리고 rifampin에는전부감수성임을보고한바있다. 그리고미국내의군인지역병원의외래환자에서분리된 MRSA 임상분리균주들중 91% 는 erythromycin에내성임을보고한바있으나본연구에서는 55% 의내성률을나타낸것은병원입원환자와외래환자의모든검체를대상으로차이를보인것으로사료되며, ciprofloxacin, tetracycline, gentamicin, rifampin, 그리고 clindamycin 내성률은약간의미세한차이를보일뿐이다. E-test를이용한 MIC 측정에서는 121 st General Hospital에

6 서분리한 MRSA 임상분리균주에서는대부분의균주가 oxacillin의경우 MIC가 8 µg/ml 이하인반면, 국내병원들과원주기독병원에서분리한 MRSA 임상분리균주에서는모두 256 µg/ml 이상에서강한내성을나타내었으므로집단간의 MRSA 임상분리균주들의내성도의차이를알아볼수있었다. 그리고 cephalothin의경우는 121 st General Hospital 31주중 27주의 MRSA 임상분리균주의 MIC가 4 µg/ml 이하의내성을나타낸반면국내병원들에서는대부분의 MRSA 임상분리균주의 MIC가 64 µg/ml의내성을보여주었다. 이결과로서 121 st General Hospital과국내병원들에서분리한 MRSA 임상분리균주들간에는 oxacillin에대한내성도의차이를볼수있었다. 연도별국내병원들간의 MRSA 분리균주의경우 2005년도에분리한균주들과 1999년원주에서분리한 MRSA 임상분리균주들의내성도의변화는 oxacillin의경우모두가 MIC가 256 µg/ml 이상의강한내성을보이므로여전히강한내성률을나타내고있었으며, cephalothin에경우 1999년도에원주지역에서분리한 MRSA 임상분리균주에비해 2005년도에분리한 MRSA 임상분리균주에서내성률이높아진것으로나타났다. 분자생물학적검출방법인중합효소연쇄반응을시행하여총 108주의 MRSA 임상분리균주에서모든임상분리균주들이 meca 유전자가검출되어 MRSA 임상분리균주가 meca gene을가지는것으로사료된다. 결론적으로보아 3개의집단에서분류된 MRSA 임상분리균주를대상으로 VITEK system과 E-test를통하여시행한항생제에대한 MIC 결과는 121 st General Hospital에서분리한 MRSA 임상분리균주들과국내병원들에서분리한 MRSA 임상분리균주들과의항생제들간의내성률의큰차이점을발견함으로국내에서분리한 MRSA 임상분리균주는항생제에대한내성률이매우높은것으로나타났다. REFERENCES Campbell KM, Vaughn AF, Russell KL, Smith B, Jimenez DL, Barrozo CP, Minarcik JR, Crum NF, Ryan MA. Risk Factors for Community-Associated Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus Infections in an Outbreak of Disease among Military Trainees in San Digo, California, in J Clin Microbiol : Chong YS, Lee KW, Shin JW, Shin HB, Lim JB. Active of Arbekacin Against Methicillin-resistant Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa. J Infect Chemother : Coombs GW, Nimmo GR, Bell JM, Huygens F, O'Brien FG, Malkowski MJ. Pearson JC, Stephens AJ, Giffard PM. Genetic diversity among Community Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus Strains Causing Outpatient Infections in Australia. J Clin Microbiol : Felten A, Grandry B, Lagrange PH, Casin I. Evaluation of Three Techniques for Detection of Low-Level Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus (MRSA): a Disk diffusion Method with Cefoxitin and Moxalactam, the Vitek 2 System, and the MRSA-Screen Latex Agglution Test, J Clin Microbiol : Hanssen AM, Fossum A, Mikalsen J, Halvorsen DS, Bukholm G, Sollid JUE. Zissemination of Community-Acquired Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus Clones in Northern Norway: Sequence Type 8 and 80 Predominate. J Clin Microbiol : Hanssen AM, Kjeldsen G, Sollid JUE. Local Variants of Staphylococcal Cassette Chromosome mec in Sporadic Methicillin- Resistant Staphylococcus aureus and Methicillin-Resistant Coagulase-Negative Staphylococci: Evidence of Horizontal Gene Transfer?. Antimicrob Agents Chemother : Kim SM, Lee H, Peck KR, Song JH, Yang JW, Jin JH, Pai HJ, Oh MD, Choe KW. Genetic relatedness of Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus Isolates Recovered from 3 differnt Hospitals in Korea. Infection : Ko KS, Lee JY, Suh JY, Oh WS, Peck KR, Lee NY, Song JH. Distribution of Major genotypes among Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus Clones in Asian Countries. J Clin Microbiol : Lee HK, Pahk JY, Han KJ, Kim BK, Kang MW, Shim SI. Comparison of PCR Detection of meca with Standard Susceptibility Testing Methods to Determine Mechicillin Resistance in Clinical Strains of Staphylococci. Infection : Lee JS, Park O, Woo HJ, Jung HJ, Kim WJ, Kim MJ, Park SC. A Longitudinal Molecular Epidermiologic Study of Methicillin- Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) isolates from a University Hospital. Infection : Lu PL, Chin LC, Peng CF, Chiang YH, Chen TP, Ma L, Siu LK. Risk Factors and Molecular Analysis of community Methicillin-resistant Staphylococcus aureus Carriage. J Clin Microbiol : Matsumura LLSO, Choi E, Louie M, Simor AE. Evaluation of Three rapid Methods for Detection of Methicillin Resistance in Staphylococcus aureus. J Clin Microbiol :

7 Nathalie van der Mee-Marquet, Domelier AS, Girard N, Quentin Roland, and the Bloodstream Infection Study Group of the Relais d'hygiène du Centre. Epidemiology and Typing of Staphylococcus aureus Strains Isolated from bloodstream Infections. J Clin Microbial : Oliveira DC, Lencastre H. Multiplex PCR Strategy for Rapid Identification of Structural Types and variants of the mec Element in Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus. Antimicrob Agents Chemother : Robinson DA, Enright MC. Evolutionary Models of the Emergence of Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus. Antimicrob Agents Chemother : Sakoulas G, Gold HS, Venkataraman L, DeGirolami PC, Elio- poulos GM, Qian Qinfang. Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus: Comparison of Susceptibility Testing Methods and Analysis of meca-positive Susceptible Strains. J Clin Microbiol : Shukla SK, Stemper ME, Ramaswamy SV, Conradt JM, Reich R, Graviss EA, Reed KD. Molecular Characteristics of Nosocomial and Native American Community-Associated Methicillin- Resistant Staphylococcus aureus Clones from Rural Wisconsin. J Clin Microbio : Woo HY, Lee NY, Maeng SH, Han SH, Ihn KS, Lim SW, Seong SY, Kim IS, Choi MS. Molecular Epidermiological Study and Analysis of Genomic Diversity of mec Regulator Genes in meca Positive Methicillin-Resistant Staphylococci. J Infect Chemother :

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Microsoft PowerPoint - PDFCoTemp.PPT 주요유방염세균의검출및 항생제감수성검사 임숙경 1. 검사시료 1. 시료채취 유방염우유 2. 체세포수측정 3. 대상세균 - Staphylococcus aureus - Coagulase negative staphylococci -Escherichia coli 3. 균분리방법 E. coli CHEC Agar 직접도말 (37 18-24h) 보라색집락 EMB Agar