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규리 손
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1 J Korn So Food Si Nutr 한국식품영양과학회지 3(6), 836~8() ttp://dx.doi.or/.376/jkn 추출조건에따른노랑느타리버섯추출물의항산화활성 이혜진 도정룡 정민유 김현구 한국식품연구원 Antioxidnt Ativitis o Plurotus ornuopi Extrts y Extrtion Conditions Hy-Jin L, Jon-Ryon Do, Min-Yu Cun, nd Hyun-Ku Kim Kor Food Rsr Institut, Gyoni 63-76, Kor ABSTRACT Pysioloil tivitis o xtrts orm Plurotus ornuopi wr xmind. DPPH rdil svnin tivity o wtr xtrt ws 7. prnt t m/ml, wi ws t ist mon ll xtrts. Totl polypnol ontnt o wtr xtrt ws 6.3 m/, wi ws t ist vlu or ll xtrtion onditions. Suproxid nion rdil svnin tivitis rnd rom 5.7 to.56 prnt t,, nd m/ml, wi wr ir tn t sori id tivity (56.9% t m/ml) (P<.5). ACE iniitory tivitis wr ir in tnoli xtrts tn in wtr xtrts. Nitrit-svnin ilitis undr idi onditions (ph. nd ph 3.) wr t most tiv mon ll t xtrts. Ts rsults will usul or undrstndin t pysioloil tivitis o Plurotus ornuopi. Ky words: Plurotus ornuopi, ntioxidnt tivity, xtrtion ondition 서 버섯은대형자실체를이루고있고대부분이담자균류와자낭균류에속하는고등균류이다 (). 우리나라에서식용으로이용되고있는버섯은느타리, 표고, 양송이및송이버섯등이주를이루고있으며 965년경부터인공재배법이널리보급되면서계절에구애받지않고식용으로이용할수있게되었고영양학적으로우수한식품으로인정받고있다. 그중느타리버섯은거의 종이온대및열대지역에서널리분포되어있으며, 현재재배면적과생산량이가장많은버섯중에하나이다 (,3). 버섯의이용이증가하고관심이높아짐에따라버섯에대한유효성분및효능에대한다양한연구가이루어지고있다. 느타리버섯의성분으로 lti id, oxli id, umri id, suini id, mli id, itri id, pyrolutmi id 등의유기산과지방산 (), trlos, luos, rutos, mnnitol, ritol, lyrol 등의유리당및당알코올류 (5) 의다양한성분연구및폴리페놀화합류의항산화능 (6) 에대해보고된바있다. 그밖에느타리버섯, 양송이버섯, 팽이버섯의물질함량분석 (7), 새송이버섯의항염증활성 (8), 식용및약용버섯의항산화및항암효과 (9) 등의연구가보고되었다. 론 Rivd 3 Frury ; Aptd 3 Mr Corrspondin utor. E-mil: yunku@kri.r.kr, Pon: 노랑느타리 (Plurotus ornuopi Rollnd vr. itrinopiltus) 는담자균류느타리과버섯으로여름부터가을에걸쳐활엽수의느릅나무고목, 쓰러진나무또는그루터기등에군생하는목재백색부후성버섯이다. 한국, 일본, 중국동북부, 소련의극동, 유럽및북아메리카에분포하며주로한국, 일본, 러시아에서상업적으로재배되고있다. 노랑느타리의일반성분으로는유리아미노산 3종, 무기질 종, vitmin D, ritol, mnnitol, lyrol 등이있으며, 당류는 luos, trlos, llulos, millulos, ptin, linin, ltin이, 효소로는 roxymtyllluls, 산성 prots 등이있다 (3). 노랑느타리버섯은부드러우면서도섬유질이많아질긴편이고밀가루냄새가나는것이특징으로노란색의플라보노이드는감기치료, 변비완화및진정효과가있으며, 항종양, 콜레스테롤수치강하, 면역증진등에도효과적이다 (). 본연구에서는다양한효능이알려진노랑느타리버섯의항산화활성을측정하고산업적이용가치증대및고부가가치상품개발의일환으로최적추출조건확립을위한기초자료로이용하고자한다. 재료및방법재료본연구에필요한노랑느타리버섯은연천에서건조상태로구입하여믹서기 (Hnil Eltri In., Soul, Kor) 로분쇄하여분말화하였다. 시료보관은 5 μm ms에내려

2 노랑느타리버섯추출물의항산화활성 837 분말입자를균일화한후. mm PE ilm에밀봉포장하여 - C에서보관하며실험에사용하였다. 마이크로웨이브추출마이크로웨이브추출장치 (MAP, Soxwv-, ProLo, Pris, Frn) 를이용하여건물중량과용매의비율을 :5으로하고추출용매의농도를물, 3%, % 그리고 9% 에탄올로각각달리하여추출하였다. 이때마이크로웨이브추출조건은에너지용량 9 wtt, 추출시간 5 min의동일조건으로추출하였다. DPPH 라디칼소거능추출물의 DPPH 라디칼소거능은 Blois() 의방법에준하여전자공여효과로나타나는각추출물에대한환원력을측정하였다. 즉노랑느타리버섯추출분말 m/ml, m/ ml 및 m/ml 농도의시료. ml에 - M DPPH (,-dipnyl--pirylydrzyl).8 ml와 99.9% 에탄올 ml를가하여총액의부피가 3 ml가되도록하였다. 이반응액을약 초간혼합하고실온에 분간방치한다. 반응액은분광광도계 (Sptrmx M, Molulr Dvis, Sunnyvl, CA, USA) 55 nm에서흡광도를측정하였고, 추출물의첨가구와첨가하지않은무첨가구의흡광도를통해백분율로나타내었다. 총폴리페놀함량총폴리페놀함량은 Folin-Dnis() 방법에의해측정하였다. 노랑느타리버섯추출분말 m/ml, m/ml 및 m/ml 농도의시료.5 ml에 N Folin-Cioltu rnt.5 ml를가하여혼합, 3분간정치후 % N CO 3 용액 ml를첨가하였다. 이혼합액을 시간동안반응후분광광도계 (UV/VIS sptromtr, Jso, Hioji, Jpn) 를사용하여 75 nm에서흡광도를측정하고, 표준물질 tnni id를이용하여작성한표준곡선으로부터총폴리페놀함량을구하였다. Suproxid dismuts(sod) 유사활성 SOD 유사활성은 suproxid에의해산화되는 pyrollol의산화속도를억제시키는원리로 Mrklund와 Mrklund (3) 의방법에준하여실시하였다. 노랑느타리버섯추출분말 m/ml, m/ml 및 m/ml 농도의시료. ml에 ph 8.5로보정한 Tris-HCl ur(5 mm tris[ydroxymtyl]minomtn+ mm EDTA) 3 ml와 7. mm pyrollol. ml를가하고실온에 분간방치후 N HCl. ml로반응을정지시킨다. 이반응액을분광광도계 (Sptrmx M, Molulr Dvis) nm에서흡광도를측정하여시료첨가및무첨가구간의흡광도차이를백분율로나타냈다. ACE 저해활성 ACE 저해활성은 Cusmn과 Cun의방법 () 을변형하여측정하였다. ACE 저해활성은 3 mm NCl- mm sodium ort ur(ph 8.3) 에 rit run ton powdr(sim-aldri, St. Louis, MO, USA) 를. / ml(w/v) 의농도로 C에서 시간동안추출한후, 원심분리 ( C, 8, rpm, 7분 ) 하여 ACE 조효소액을얻었다. 노랑느타리버섯추출분말 m/ml, m/ml 및 m/ ml 농도의시료 5 μl에 5 mm NCl- mm sodium ort ur(ph 8.3) μl를가하고 5 mm ippuryl-istidyl-luin(3 mm NCl- mm sodium ort ur(ph 8.3) 에용해 ) 5 μl를가한후 37 C에서 분간전배양하였다. 이반응액에 ACE 조효소액 5 μl를가한후 37 C에서 3분간반응시킨후.75 N HCl μl를가하여반응을정지시켰다. 여기에 tyl ton.5 ml를가하여섞어준후상등액 ml를취하였다. 분리시킨상등액을 C에서 시간동안건조시켜증류수 ml를가하여용해시킨다음분광광도계 (UV/VIS sptromtr, Jso) 를이용하여 8 nm에서흡광도를측정하여시료첨가및무첨가구간의흡광도차이를백분율로나타냈다. 아질산염소거작용아질산염소거작용 (nitrit svnin t) 은 Gry 와 Dun(5) 의방법으로측정하였다. mm NNO 용액. ml에노랑느타리버섯추출분말 m/ml, m/ml 및 m/ml 농도의시료. ml를가하고여기에. N 구연산완충액을사용하여반응용액의 ph를각각.(. N HCl), 3.,. 및 6.으로보정한다음반응용액의부피를 ml로하였다. 이를 37 C에서 시간동안반응시킨다음 % ti id 용액 5 ml, Griss 시약 (3% ti id에 % sulnili id와 % nptylmin을 : 비율로혼합한것 ). ml를가하여잘혼합시켰다. 이를 5분간실온에방치시킨후분광광도계 (Sptrmx M, Molulr Dvis) 를사용하여 5 nm에서흡광도를측정하여추출액첨가전후의잔존하는아질산염량을백분율 (%) 로표기하였다. 통계처리본실험은 3반복측정하여얻어진결과에대해 Sttistil Anlysis Systm(SAS vrsion 8.,, SAS Institut In., Cry, NC, USA) 을이용하여평균과표준편차의값을산출하였고 Dunn's multipl rn tst를통해유의성을검정하였다. 결과및고찰추출수율노랑느타리버섯시료와용매의비율 :5의조건으로이

3 838 이혜진 도정룡 정민유 김현구 9 Svnin tivity (%) i d i d j Totl polypnol ontnts (m/). d m/ml ). DW ) 3% EtOH % EtOH 9% EtOH sori id Fi.. DPPH rdil svnin tivity o Plurotus ornuopi xtrts wit xtrtion solvnts. Dt r xprssd s mn±sd (n=3). Mns wit t sm lttr on rs r not siniintly dirnt (P<.5). ) DW: distilld wtr. ) m/ml: Plurotus ornuopi xtrts powdr dissolvd in distilld wtr. m/ml ) DW ) 3% EtOH % EtOH 9% EtOH Fi.. Totl polypnol ontnts (m/) o Plurotus ornuopi xtrts wit xtrtion solvnts. Dt r xprssd s mn±sd (n=3). Mns wit t sm lttr on rs r not siniintly dirnt (P<.5). ) DW: distilld wtr. ) m/ml: Plurotus ornuopi xtrts powdr dissolvd in distilld wtr. 때추출용매는물, 3%, % 및 9% 에탄올로하였다. 추출방법으로는마이크로웨이브 9 wtt, 5분으로하고노랑느타리버섯으로부터추출한추출물을감압농축후동결건조하였다. 각추출물의수율측정결과물, 3%, % 및 9% 에탄올추출물이각각 5.55%, 35.65%, 3.75% 및.5% 로나타났다. DPPH 라디칼소거능 DPPH rdil은짙은보라색을띠는자유라디칼로항산화물질과반응하면지질과산화연쇄반응에관여하는산화성자유라디칼이억제되어안정한형태로돌아가면서짙은보라색이옅어짐에따라흡광도를통해간접적으로측정할수있다 (6,7). 추출용매를달리한노랑느타리추출물의분말을농도별 m/ml, m/ml, m/ml로녹인후 DPPH 라디칼소거능을측정하였다. 측정결과 Fi. 에서보는바와같이추출물의농도에따라유의적으로소거능이우수하였고, 추출용매에따라물추출물이농도별 3.5~ 7.% 로에탄올추출물에비해라디칼소거활성이우수한것으로나타났다. 표준물질인 sori id와비교하였을때 m/ml sori id보다는활성이떨어졌으나,. m/ml sori id보다 5~배의소거활성을보였다. Kn(8) 의연구에서팽이버섯의경우열수추출물 m/ ml의소거능이 95.% 로노랑느타리버섯에비해라디칼소거능력이우수하였으나, Kim 등 (9) 의 종버섯류보다노랑느타리버섯의활성이높게나타나는경향알수있었다. 총폴리페놀함량노랑느타리버섯추출물의총폴리페놀함량은 Fi. 와같다. 추출용매별총폴리페놀함량이.8~6.3 m/ 을함유하고있는것으로나타났고총페놀함량이농도의존적으로증가함을알수있었다. 또한추출용매에따라에 탄올추출물에비해물추출물에서총폴리페놀함량을많이포함하고있음을알수있었다 (P<.5). L 등 () 의연구결과민자주방망이버섯의경우총페놀함량이추출용매에따라물보다에탄올추출물에서페놀함량이더높은것으로나타나노랑느타리와는다른경향을보였으며, 총폴리페놀함량이약 m/으로노랑느타리버섯의페놀함량이약 배이상더많은것을알수있었다. 폴리페놀과플라보노이드는세포를공격하는유리라디칼 (ROS, OH, NO) 의산화작용을억제, 소거하는기능기를포함하고있다 (). 또한 Wn 등 () 에의하면 DPPH 라디칼소거능과총페놀성화합물의함량은밀접한상관관계가있음이보고된바있다. 이에근거하여노랑느타리버섯의전자공여능활성에따라총폴리페놀함량을많이포함하고있어상관관계성립을예측할수있었다. SOD 유사활성 SOD는세포내활성산소를과산화산소로전환시키는반응을촉매는효소이다. 이때 SOD에의해생성된과산화수소는 tls 또는 proxids에의해물과산소분자로전환되는효소중하나이다 (3). Fi. 3은노랑느타리버섯의 SOD 유사활성능을측정한결과이다. 실험결과노랑느타리버섯추출물의농도의존적으로 SOD 유사활성능이높은경향을보였고, 모든추출용매별유의적차이없이약 5% 이상의활성을나타냄을알수있었다. 표준물질인 m/ml sorii id와비교한결과.% 의활성으로노랑느타리 m/ml의 SOD 유사활성능이 배이상우수한것으로나타났다. 노루궁뎅이버섯의경우 () 본실험과같은조건의추출물의 SOD 유사활성이 77.% 로노랑느타리버섯의 suproxid nion rdil 소거능이다소떨어졌으나, stndrd인 sori id보다우수하다는같은결과를보였다.

4 노랑느타리버섯추출물의항산화활성 839 Svnin tivity (%) d d d d Svnin tivity (%). d d d d d m/ml ). DW ) 3% EtOH % EtOH 9% EtOH sori id Fi. 3. Suproxid nion rdil svnin tivity o Plurotus ornuopi xtrts wit xtrtion solvnts. Dt r xprssd s mn±sd (n=3). Mns wit t sm lttr on rs r not siniintly dirnt (P<.5). ) DW: distilld wtr. ) m/ml: Plurotus ornuopi xtrts powdr dissolvd in distilld wtr. m/ml ) DW ) 3% EtOH % EtOH 9% EtOH Fi.. ACE iniitory tivity o Plurotus ornuopi xtrts wit xtrtion solvnts. Dt r xprssd s mn±sd (n=3). Mns wit t sm lttr on rs r not siniintly dirnt (P<.5). ) DW: distilld wtr. ) m/ml: Plurotus ornuopi xtrts powdr dissolvd in distilld wtr. ACE 저해활성 ACE는 rnin에의해생성된 dpptid인 niotnsin Ⅰ로부터 C-말단의 dipptid를가수분해시켜혈관수축작용을하는 otpptid인 niotnsin Ⅱ를합성하는단계에관여하는효소이다. 즉 ACE 작용억제는혈관수축을막고체내수분저류를막아혈압강하효과를나타낸다 (5). 노랑느타리버섯의 ACE 저해활성측정결과는 Fi. 와같다. 모든추출조건에서 ACE 저해활성이농도의존적인경향을보이지않았고, m/ml 노랑느타리추출물의경우 35.99~57.% 로비교적낮은활성을나타냈다. Son 등 (6) 의능이버섯의경우 5.89~57.63% 의활성으로노랑느타리와비슷하거나다소높은 ACE 저해활성을보였으 나, 찔레영지버섯추출물 (7) 은 % 대의낮은활성으로노랑느타리버섯이혈압강하작용에효과가우수할것으로판단된다. 아질산염소거작용아질산염은식품이나의약품및잔류농약등에존재하는 min류와반응하여발암물질인 nitrosmin을생성한다. 이러한 min류를함유하고있는식품을섭취하였을때, 니트로화반응으로발암물질인 nitrosmin이생성될가능성이매우높고특히산성조건에서쉽게발생하는것으로알려져있다 (8,9). Tl 은노랑느타리버섯의아질산염소거능을측정한결과를나타낸것이다. 추출용매에따라 % Tl. Nitrit svnin ility o Plurotus ornuopi xtrts wit xtrtion solvnts Plurotus ornuopi Asori id Solvnt xtrtion ondition DW ) 3% EtOH % EtOH 9% EtOH Nitrit svnin ility (%) m/ml ) ph. ph 3. ph. ph ± ±.93 7.±..98± ± ±.95.8± ± ±.78.6± ±.8.8± ±.9.8± ±. 9.75± ± ± ± ±3.5 9.± ± ± ± ±.8.88±.6 5.5± ±..53± ±.5 Dt r xprssd s mns±sd (n=3). Mns wit t sm suprsript in row r not siniintly dirnt (P<.5). ) DW: distilld wtr. ) m/ml: Plurotus ornuopi xtrts powdr dissolvd in distilld wtr. 9.± ± ±.9 9.9± ± ± ±. 3.96± ± ± ± ±. 5.7±..8±.8 57.±.7 5.3± ±.7 5.±.5.8± ± ±.68 5.±..78±.89.3±8.5.6±.7.33±.7.75±5. d.9±.5.± ±3.9

5 8 이혜진 도정룡 정민유 김현구 에탄올로추출하였을때아질산염생성억제능력에가장우수하였고, 이때소거능은 m/ml 농도일때 36.56% 로나타났다. ph에따라산성에가까울수록아질산염소거능이높게나타났으며노랑느타리버섯의경우 ph 3.일때가장우수한경향을보였다. 표준물질과비교하였을때 m/ml 의 sroi id가.8% 의소거력을보임에따라노랑느타리버섯의아질산염소거력이우수함을예측할수있었다. Kwon(3) 의노루궁뎅이버섯경우 ph.에서 8% 의높은소거능을보여주었으나, 버섯과추출용매의비율이 :이므로본연구에서 :5 비율로추출하였으므로용매의비율을낮춘다면노랑느타리도노루궁뎅이버섯과같이높은소거력을보일것으로판단된다. 노랑느타리버섯은낮은산성조건에서활성이높게나타났으므로발암물질생성억제에효과가있는것으로사료된다. 요 노랑느타리버섯을물, 3%, % 및 9% 에탄올로추출용매를달리하여추출한추출물을각각농도를달리하여항산화및생리활성을측정하였다. 그결과 DPPH rdil 소거능은각추출물농도가 m/ml일때모든추출조건에서.3~3.5% 의다소낮은활성을보였다. 총폴리페놀함량은에탄올추출물에비해물추출물이더많은페놀을함유하고있었고이때물추출물이 6.3 m/으로가장많았다 (P<.5). SOD 유사활성측정결과추출조건에따른경향은보이지않았으나, 표준물질인 sori id와비교하였을때노랑느타리버섯의활성이 배이상높은것으로나타났다. ACE 저해활성의경우에탄올추출물의활성이높은경향을보였으나모든추출물이 35.99~57.% 로비교적낮은활성을보였다. 노랑느타리버섯의아질산염소거능측정에서는 ph 3.에서높게나타났고, 추출조건에따라 % 에탄올추출물의소거능이가장우수하였다. 이와같이노랑느타리의다양한항산화및생리활성을기초자료로한천연물유래의기능성소재발굴및연구활용이가능할것으로사료된다. 약 REFERENCES. Kim HS, H HC, Kim TS. 3. Rsr nd prospts in nw untionl musroom-trmll uiormis, Groor rondos, nd Hypsizius mrmorus-. Food Si Ind 36(): -6.. Yn HC, Son CH, Kwon MH Mylil nw mtril, ood untionl tnoloy. Hnlimwon, Soul, Kor. p Jo EK.. Pysioloil nd ntioxidnt tivitis o suritil wtr xtrts rom old oystr musroom (Plurotus ornuopi Rollnd vr. itrinopiltus). MS Tsis. Kyunnm Univrsity, Cnwon, Kor. p Hossin S, Hsimoto M, Coudury EK, Alm N, Hussin S, Hsn M, Coudury SK, Mmud I. 3. Ditry musroom (Plurotus ostrtus) mliorts troni lipid in yprolstrolmi rts. Clin Exp Prmol Pysiol 3: Brros L, Bptist P, Corri DM, Csl S, Olivir B, Frrir ICFR. 7. Ftty id nd sur ompositions, nd nutritionl vlu o iv wild dil musrooms rom Nortst Portul. Food Cm 5: Jun IC, Prk S, Prk KS, H HC, Kim SH, Kwon YI, L JS Antioxidtiv t o ruit ody nd mylil xtrts o Plurotus ostrtus. Korn J Food Si Tnol 8: Kim MS, Kim GH.. Contnts o nuli ids (nulosids nd mono-nulotids) in xtrts o Plurotus ostrtus, Arius isporus nd Flmmulin vlutips. Korn J Food & Nutr 3: Kim HJ, B JT, L JW, HwnBo MH, Im HK, L IS. 5. Antioxidnt tivity nd iniitiv ts on umn lukmi lls o dil musrooms xtrts. Korn J Food Prsrv : Qi Y, Zo X, Lim YI, Prk KY. 3. Antioxidnt nd ntinr ts o dil nd mdiinl musrooms. J Korn So Food Si Nutr : Yoo BH.. Prodution o β-lun usin mixd ultur o musroom mylium nd Triodrm koninii. MS Tsis. Inj Univrsity, Gim, Kor. p -5.. Blois MS Antioxidnt dtrmintions y t us o stl r rdil. Ntur 8: Folin O, Dnis W. 9. On pospotunsti-pospomolydi ompounds s olor rnts. J Biol Cm : Mrklund S, Mrklund G. 97. Involvmnt o suproxid nion rdil in t utoxidtion o pyrollol nd onvnint ssy or suproxid dismuts. Europn J Biom 7: Cusmn DW, Cun HS. 97. Sptropotomtri ssy nd proprtis o t niotnsin-onvrtin nzym o rit lun. Biom Prmol : Gry JI, Dun Jr LR Iniition o N-nitrosmin ormtion in modl ood systms. J Food Si : Co ML, L DJ, You SG.. Rdil svnin tivity o tnol xtrts nd solvnt prtitiond rtions rom vrious rd swds. On nd Polr Rsr 3: Torl J, Cillrd J, Cillrd P Antioxidnt tivity o lvoniods nd rtivity wit proxy rdil. Pytomistry 5: Kn HW.. Antioxidnt nd nti-inlmmtory t o xtrts rom Flmmulin vlutips (Curis) sinr. J Korn So Food Si Nutr : Kim HJ, B JT, L JW, Hwno MH, Im HG, L IS. 5. Antioxidnt tivity nd iniitiv ts on umn lukmi lls o dil musrooms xtrts. Korn J Food Prsrv : L YS, Joo EY, Kim NW. 6. Polypnol ontnts nd ntioxidnt tivity o Lpist nud. J Korn So Food Si Nutr 35: Qi Y, Zo X, Lim YL, Prk KY. 3. Antioxidnt nd ntinr ts o dil nd mdiinl musrooms. J Korn So Food Si Nutr : Wn SY, Cn HN, Lin KT, Lo CP, Yn NS, Syur LF. 3. Antioxidnt proprtis nd pytomil rtristis o xtrts rom Ltu indi. J Ari Food Cm 6: H JH, Jon MH, So YC, Yon CW, Kim JS, Kim HH, An JH, L HY.. Ennmnt o ntioxidnt tiv-

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Journal of Life Science 2011 Vol. 21. No. 8. 1120~1126 ISSN : 1225-9918 DOI : http://dx.doi.org/10.5352/jls.2011.21.8.1120 μ μ μ α β Journal of Life Science 2011, Vol. 21. No. 8 1121 μ μ 1122 생명과학회지 2011,