<33365FC0B1C7F62DBDC520B1D5C1D C6C75732E687770>

Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society Vol. 16, No. 8 pp. 5343-5350, 2015 http://dx.doi.org/10.5762/kais.2015.16.8.5343 ISSN 1975-4701 / eissn 2288-4688 신균주 Bacillus amyloliquefaciens NBF11-1 을이용하여발효한청국장의항산화효과 김한수 1, 윤현 2* 1 조선대학교대학원보건학과, 2 한려대학교임상병리학과 The Antioxidant Effect of Cheonggukjang, Fermented Using the New Strain, Bacillus amyloliquefaciens NBF11-1 Han Soo Kim 1, Hyun Yun 2* 1 Department of Health science Graduate School of Chosun University, 2 Biomedical laboratory science of Hanlyo University 요약본연구의목적은대나무줄기표면에서처음발견하였으나, 아직까지는연구가미흡한신균주 Bacillus amyloliquefaciens NBF11-1의생리활성효과를알아보기위하여청국장전통발효균주인 Bacillus subtilis NG24를대조군으로하여항산화효과에대한비교분석을실시하였다. 청국장추출물의항산화실험결과에서 Total Polyphenol 추출물함량의측정결과는 B.subtilis NG24에비해 B.amyloliquefaciens NBF11-1 시료에서유의하게증가하였다 (p=0.032). SOD 유사활성과 DPPH radical 소거능및 NO radical 소거능에서 B.subtilis NG24에비해 B.amyloliquefaciens NBF11-1을포함한시료에서농도가증가함에따라유의하게증가하였다 (p<.05). 추가적으로, 각항산화실험의 IC 50 은 B.subtilis NG24에비해 B.amyloliquefaciens NBF11-1 시료에서 SOD 유사활성 (p=0.045), DPPH radical 소거능 (p=0.041), NO radical 소거능 (p=0.019) 과같이유의한차이로감소하였다. Abstract This study aims to compare and analyze the antioxidant effect of Cheonggukjang's traditional fermentation strain, Bacillus subtilis NG24 which was a control of the study, in order to see the biological activity effect of the new strain, Bacillus amyloliquefaciens NBF11-1 that was first found in the surface of the bamboo stem, but hasn't been insufficiently researched. In the antioxidant activity experiment of the Cheonggukjang extract, the B.amyloliquefaciens NBF11-1 sample showed a significant increase in the total polyphenol extract content, compared to B.subtilis NG24(p=0.032). Also, compared to B.subtilis NG24, the sample containing B.amyloliquefaciens NBF11-1 showed a significant increase in SOD-like Activity, DPPH radical scavenging, and NO radical scavenging, as the concentration rose(p<.05). Additionally, IC 50 in each antioxidant activity experiment significantly decreased in the B.amyloliquefaciens NBF11-1 sample like SOD-like Activity(p=0.045), DPPH radical scavenging(p=0.041), and NO radical scavenging(p=0.019), compared to B.subtilis NG24. Keywords : Antioxidant activity; Bamboo; B.subtilis; B.amyloliquefaciens; Cheonggukjang. 1. 서론 나변질의원인이되는미생물의증식을억제하기위한노력이계속되고있다 [1,2]. 그러나최근건강지향적인최근생활수준의향상과함께식품산업이발달함에소비자의욕구에따라기존의화학적합성보존료의사따라유통및저장과정에서발생하기쉬운식품의부패용을기피하고합성보존료의지속적인사용이인체에부 * Corresponding Author : Hyun Yoon(Hanlyo Univ.) Tel: +82-10-2635-9076 email: yh9074@yahoo.co.kr Received May, 4 2015 Revised (1st June 2, 2015, 2nd June 8, 2015) Accepted August 6, 2015 Published August 31, 2015 5343

한국산학기술학회논문지제 16 권제 8 호, 2015 작용을일으킬수있는안정성문제가제기됨에따라 [3], 인체에무해하면서변패를억제하고유통시한을늘릴수있는천연자원의이용개발이시도되고있으며, 특히식물성한약재및약용식물유래항균활성및생리활성물질에대한연구가활발히진행되고있다 [4]. 2001년세계보건기구 (WHO) 와국제식량기구 (FAO) 의합동전문가위원회에서 Probiotics를 살아있는미생물로적당한양을섭취하면건강에유익한세균을포함한식이보충제 라고정의하였으며 [5], Prebiotics란 Probiotics의미생물의생육을촉진하는물질을의미하는것 이며, 대두에는 oligosaccharide, lactitol, lactulose 등이있다 [6]. 항산화활성은식품성분의대표적기능성으로알려졌으며생체내에서 DNA 손상, 암유발, 노화등다양한질병의원인과관련성이있는유리자유기에의한손상을방지함으로써생체를보호하는중요한기능성으로주목받았다 [7]. 대두는다양한생리활성을나타내는것으로알려져있으며 [8,9], 우리나라에서는대두를이용한대표적인발효식품인청국장은된장, 간장, 고추장등과함께오래전부터행해져온가공공정의일환으로식품에좋은발효식품으로상용되어왔다. 예전부터된장과간장은대두를발효시킨메주를염수에넣어다시발효시켜제조하는데 1년정도의기간이소요되는데비해청국장은가을부터겨울철에고온에서단시간발효숙성시켜제조되었다 [10]. 청국장과같은발효식품은맛과향, 조직감등을부여하기위해미생물작용을통해젖산및초산, 알코올발효과정을지나식품의저장성향상, 단백질, 필수아미노산및비타민등이풍부한식품이되고, 독성물질파괴및생리활성물질생산, 소화증진등의효과가있다고보고하였다 [11]. 전통발효균주로인정받는고초균 (Bacillus subtilis) 은호기성으로다양한가수분해효소를생산하며, 이러한균주를이용해발효시켜만든청국장은대표적인대두발효식품이다. 이식품은발효과정을거치면서고초균에의해생산되는단백질및탄수화물가수분해효소, 기능성펩타이드, 고분자점질물등의생리활성물질을포함하고있다 [12]. 이러한점질물은발효제품의품질특성에중요한영향을미치며, γ-pga는미생물고분자물질의일종으로면역증진효과, 당뇨효과, 항산화효과 [13], 항암효과등의기능을가지고있고, 보습성이뛰어나화장품으로도각광받고있는기능성소재이다 [14]. 신균주 Bacillus amyloliquefaciens NBF11-1은대나무줄기표면에서처음발견되었으며, 16S rdna 염기서열구조분석에근거하여분자계통학적유연관계에의해분리된균주 [15] 로써 proteolytic, lipolytic, amylolytic과 cellulolytic 효과에관한 plate 분석에의한결과에서식품의부패와인체에병원성을일으키는미생물인 Listeria monocytogenes와 Yeast, Candida albicans 등에대한항균효과가있다고알려져있다 [16]. 아직까지 B.amyloliquefaciens NBF11-1에대한연구는거의없지만, B.amyloliquefaciens NBF11-1이발견된대나무에대한몇몇보고서에서는대나무가신경보호효과와면역기능강화, 항산화효과, 항암및항균효과, 가수분해효과등의여러생리활성기능이있다고보고하고있다 [15, 17-19]. 그러나대나무줄기표면에서발견된 B.amyloliquefaciens NBF11-1은발견이된지얼마지나지않았기때문에이균주에대한연구는아직까지미비한실정이고, B.amyloliquefaciens NBF11-1이청국장의여러가지생리활성기능에어떠한영향을주었는지는아직은알수가없다. 따라서본실험에서는청국장발효의대표적인균주로잘알려진 B.subtilis NG24를이용한청국장을대조군으로정한다음대나무표면의줄기끝부분에서발견된신균주 B.amyloliquefaciens NBF11-1을이용한청국장을실험군으로하여두가지군의항산화효과를비교분석함으로써신균주인 B.amyloliquefaciens NBF11-1의청국장발효에의한생리활성에대한기초자료로사용함을목적으로한다. 2. 재료및방법 2.1 실험재료본실험에사용한대두 ( 국산 ) 는용두농업협동조합 ( 무안 ) 에서 1 kg을구매하여실험에사용하였다. 2.2 실험균주본실험에서청국장발효에이용되고있는대표적인균주 B.subtilis NG24와대나무에서표면끝부분에서처음분리된신균주 B.amyloliquefaciens NBF11-1을사용하였다. 목포대학교생물학과미생물학실험실에보관중인청국장발효균주 B.subtilis NG24와신균주 5344

신균주 Bacillus amyloliquefaciens NBF11-1 을이용하여발효한청국장의항산화효과 B.amyloliquefaciens NBF11-1 균주를이용하여 37, 24시간계대배양을통하여활성화한다음신속히항산화실험에사용하였다. 2.3 시약및기기실험에사용한기기로는 Shaking incubator, UV/Visible spectrophotometer, freezing dryer와 Rotary vacuum evaporator 외일반실험기구들을사용하였다. 총폴리페놀측정시약은 Folin-Ciocalteau phenol을사용하였고, 표준시약으로 Gallic acid와 10% Na 2CO 3 을사용하였다. SOD(superoxide dismutase) 유사활성측정시약은 tris-hcl buffer와 10 mm pyrogallol, 1.2 N HCl 을조제하여사용하였다. DPPH(2.2 diphenyl 1-picryl hydrazy) radical에대한소거능측정시약은 100 μm의 DPPH(Sigma Co.) 용액을사용하였다. NO(nitric oxide) radical 소거능측정시약은 1 mm NaNO 2 용액, 0.1 N HCl 용액, 2% acetic acid, Griess 시약을사용하였고, 추출용시약은 70% ethanol을사용하였다. 2.4 B.subtilis NG24와 B.amyloliquefaciens NBF11-1의 MHB 배양액 MHB(Mueller Hinton broth) 를 10 ml씩두개를제조한다음 B.subtilis NG24와 B.amyloliquefaciens N11-1 을이용하여배양되어있는 slant broth tube에서 Loop 로채취하여각플라스크에넣는다. 진탕배양기를이용하여종균액을 37, 24시간배양한다음 5 ml tube에각 100 μl씩 24시간배양하였다. 2.5 B.subtilis NG24와 B.amyloliquefaciens NBF11-1에의한 FS 조제 FS(Fermented Soybean) 의제조방법은대두 ( 콩 ) 를 500 g을세척하여 3배의증류수를넣고실온, 24시간을침지하였다. 침지하여불린대두를멸균기에서 115, 25분간증자하고다시 50-60 로냉각하였다. 대두는 100 g씩 5개의비커에나누어담고전날배양한종균액을전체의 1 %(w/w) 가되도록접종하였다. 균주를접종한대두를 37 에서 24시간동안발효시켜 -70 에서 24시간냉동시킨후동결건조하였다. 동결건조된시료 100 g은 3배의 70% ethanol로실온에서 24시간 3회반복하여진탕한후상층액을추출하였다. 추출액은여과지 (Whatman No.2) 로여과하여불순물을제거하고진공 농축기에서 40 로감압 농축한후사용하였다. 2.6 항산화실험 2.6.1 Total Polyphenol compound 함량측정 Total Polyphenol 함량은 Folin-Denis법을응용하여측정하였다 [20]. 균주 B.subtilis NG24와 B.amyloliquefaciens NBF11-1을이용한각각 5개의 FS 추출물시료 5 mg/ ml을 80% Methanol 0.5 ml와증류수 2 ml에용해시키고 2 N Folin-ciocalteau phenol reagent 100 μl를가하였다. 37 에서 30분혼합한후 10% Na 2CO 3 100 μl을첨가하고 96 well plate에 200 μl씩분주하였다. 각각의시료는 725 nm에서 UV/Visible spectrophotometer로흡광도를측정하여표준곡선으로부터함량을구하였다. 표준물질은 Gallic acid를증류수에 5 mg / ml로희석후흡광도를측정하여얻은표준검량곡선으로부터총폴리페놀추출량의결과를나타내었다. 2.6.2 SOD 유사활성 SOD 유사활성실험은 superoxide에의해산화되는 pyrogallol의산화속도를억제시키는원리를이용하였다 [21]. B.subtilis NG24와 B.amyloliquefaciens NBF11-1 을이용한각각 5개의 FS 추출물시료 5 mg/ ml중에서 sample 10 μl을 ph 8.5로보정한 tris-hcl buffer 50 mm tris(hydroxymethyl) 130 μl와 10 mm pyrogallol 10 μl를 tube에넣고 150 μl혼합하였다. 혼합물은 5 에서 20분간방치한후 1.2 N HCl 10 μl로반응을정지시켰다. 그리고 500 μg / ml, 1000 μg / ml, 2000 μg / ml씩첨가한 FS 추출물은 96 well plate에각각 200 μl씩맞춘후 420 nm에서 UV/Visible spectrophotometer를이용하여흡광도를측정하였다. Control은 tris buffer 130 μl와 pyrogallol 20 μl를첨가하여 5 에서 20분반응시켰다. 반응물은 1.2 N HCl 10 μl를첨가하여반응정지를시킨후흡광도를측정하였다. IC 50(Inhibition concentration 50) 값은첨가한 SOD 유사활성도가산화적장애를 50% 제거시키는추출물의농도를의미한다. SOD 유사활성은계산식을이용하여 FS 추출물시료에의한첨가구와무첨가구사이의흡광도차이를백분율로산출하여측정하였다. SOD 유사활성능 (%) = ( 1 - 추출물有첨가구의 Sample/ 추출물無첨가구의 Control) 100 5345

한국산학기술학회논문지제 16 권제 8 호, 2015 2.6.3 DPPH radical 에대한소거능측정 B.subtilis NG24와 B.amyloliquefaciens NBF11-1을이용한 FS 추출물시료를이용하여각각의추출물에대한 DPPH radical에대한소거능측정을실시하였다 [22]. 즉, 희석한시료 10 μl을 Methanol 90 μl에용해시켜 0.3 mm DPPH 용액 100 μl와혼합하여잘교반하여 30 분동안암실에서보관하였다. 그리고 500 μg / ml, 1000 μg / ml, 2000 μg / ml씩첨가한 FS 추출물은 96 well plate 에각각 200 μl씩맞추고 30분간암소에서반응시켜 UV/Visible spectrophotometer를이용하여 517 nm에서흡광도를측정하였다. IC 50 값은첨가한 DPPH radical의 50% 를억제하는추출물의농도를의미한다. DPPH radical에대한소거능은계산식을이용하였고, FS 추출물시료에의한첨가구와무첨가구의흡광도는 SOD 유사활성실험과같은방법으로측정하였다. 수를 0.4 ml첨가하여동일하게행하였다. 아질산염소거작용은계산식을이용하여 FS 시료의첨가의유무에따른 NO 백분율을흡광도로측정하였다. 2.7 자료분석방법본연구의자료분석은 Window용 SPSS(Ver. 18.0) 을사용하였다. 발효균주 B.subtilis NG24와 B.amyloliquefaciens NBF11-1을이용하여발효시킨청국장의생리활성 ( 총폴리페놀, SOD 유사활성, DPPH radical에대한소거능, NO radical 소거능 ) 은대조군과실험군모두각각 5개의시험관에서측정한값을평균 ± 표준편차 로나타내었다. 대조군과실험군의평균비교는 t-검정을시행하였고, 유의수준은 p<0.05로설정하였다. 2.6.4 NO radical 소거능측정 NO radical 소거능측정은 Gray & Dugan의방법을응용하여실시하였다 [23]. B.subtilis NG24와 B.amyloliquefaciens NBF11-1을이용한각각의 FS 추출물시료 5 mg / ml를증류수에희석된시료 100 μl와 1 mm NaNO 2 용액 100 μl와 0.1 N HCl 100 μl를사용하여 ph 1.2로조정한반응용액을가해 1 set(c) 를준비하였다. 이용액을 37 에서 1시간배양한후 1 set(a) 는반응액 200 μl에 2% acetic acid 1 ml, griess reagent 80 μl를가하여혼합하였고, 1 set(b) 는 1 set(a) 에 griess 시약대신증류수 80 μl를가하여혼합하였다. 그리고 500 μg / ml, 1000 μg / ml, 2000 μg / ml씩첨가한 FS 추출물은 96 well plate에각각 200 μl씩맞춘다음실온에서 15분동안반응시키고 570 nm에서 UV/Visible spectrophotometer를이용하여잔존하는아질산염양을구하였다. A-C N(%) = ( 1 - ) 100 B N : NO 소거율에대한항산화활성 (%) A : 1 mm NaNO2 용액에시료를첨가하여 1시간반응시킨후의흡광도 B : 1 mm NaNO2 에시료대신증류수를첨가하여 1시간반응후의흡광도 C : 시료흡광도 (1 set) IC 50 값은첨가한아질산염의 50% 를소거하는추출물의농도를의미한다. 대조시험으로 Griess 시약대신증류 3. 결과 3.1 B.subtilis NG24와 B.amyloliquefaciens NBF11-1에의한 FS의항산화실험 3.1.1 Total Polyphenol compound 측정 B.subtilis NG24와 B.amyloliquefaciens NBF11-1을이용하여발효시킨 FS 추출물에함유된총폴리페놀의추출량은 Table 1과같다. Table 1. Total polyphenol compound of ethanol extracts of FS Sample ( μg / ml ) Total polyphenol ( mg / ml ) NG24 NBF11-1 p-value FS 34.2±0.03 35.5±0.16 0.032 FS 의추출물시료에함유된총폴리페놀의추출량은 B.subtilis NG24 (34.2±0.03 mg / ml ) 에비해 B.amyloliquefaciens NBF11-1 (35.5±0.16 mg / ml ) 로발효시킨시료에서총폴리페놀의추출량이유의하게증가하였다 (p=0.032). 3.1.2 SOD 유사활성 B.subtilis NG24와 B.amyloliquefaciens NBF11-1을이용하여발효시킨 FS의 SOD 유사활성결과는 Table 2 와같다. SOD 유사활성은 500 μg / ml에서는유의한차이 5346

신균주 Bacillus amyloliquefaciens NBF11-1 을이용하여발효한청국장의항산화효과 를보이지않았으나 (p=0.539), 1,000 μg / ml (p=0.015) 과 2,000 μg / ml (p=0.011) 에서균주의양이증가함에따라 B.subtilis NG24 에비해 B.amyloliquefaciens NBF11-1 시료에서유의하게증가하였고, IC 50 은 B.subtilis NG24 (1134.5±1.4 mg / ml ) 에비하여 B.amyloliquefaciens NBF11-1 (1026.7±2.3 mg / ml ) 에서유의하게감소하였다 (p=0.045). Table 2. SOD-like activity of ethanol extracts of FS Sample ( μg / ml ) SOD-like activity ( mg / ml ) NG24 NBF11-1 p-value 500 42.6±1.0 42.3±0.8 0.539 1000 45.1±1.5 48.7±1.2 0.015 2000 48.1±0.4 53.0±0.4 0.011 IC 50 values 1134.5±1.4 1026.7±2.3 0.045 3.1.3 DPPH radical 소거능측정 B.subtilis NG24와 B.amyloliquefaciens NBF11-1을이용하여발효된 FS의 DPPH radical 소거능의결과는 Table 3 과같다. DPPH radical 에대한소거능은 500 μg / ml (p=0.029) 에서 1,000 μg / ml (p=0.034), 2,000 μg / ml (p=0.026) 까지모두에서균주의양이증가함에따라 B.subtilis NG24 에비해 B.amyloliquefaciens NBF11-1 시료에서유의하게증가하였고, IC 50 은 B.subtilis NG24 (793.7±3.7 mg / ml ) 에비하여 B.amyloliquefaciens NBF11-1 (696.4±1.8 mg / ml ) 에서유의하게감소하였다 (p=0.041). Table 3. DPPH radical Scavening activity of ethanol extracts of FS Sample ( μg / ml ) DPPH radical Scavening activity ( mg / ml ) NG24 NBF11-1 p-value 500 31.5±0.5 35.9±0.6 0.029 1000 57.1±0.9 65.1±0.9 0.034 2000 69.7±0.7 79.6±0.4 0.026 IC 50 values 793.7±3.7 696.4±1.8 0.041 3.1.4 NO radical 소거능측정 B.subtilis NG24와 B.amyloliquefaciens NBF11-1을이용하여발효된 FS 추출물시료의 NO radical 소거능의결과는 Table 4와같다. NO radical 소거능은 500 μg / ml (p=0.021) 에서 1,000 μg / ml (p=0.029), 2,000 μg / ml (p=0.035) 까지모두에서균주의양이증가함에따라 B.subtilis NG24에비하여 B.amyloliquefaciens NBF11-1 시료에서유의하게증가하였고, IC 50 은 B.subtilis NG24 (296.9±1.2 mg / ml ) 에비하여 B.amyloliquefaciens NBF11-1 (276.5±1.6 mg / ml ) 에서유의하게감소하였다 (p=0.019). Table 4. NO radical scavening activity of ethanol extracts of FS Sample ( μg / ml ) NO radical scavening activity ( mg / ml ) NG24 NBF11-1 p-value 500 50.4±0.7 52.6±0.3 0.021 1000 60.5±0.4 64.5±0.4 0.029 2000 77.8±0.4 78.9±1.1 0.035 IC 50 values 296.9±1.2 276.5±1.6 0.019 4. 고찰및결론 본연구의목적은대나무줄기표면의끝부분에서발견하였으나아직까지는연구가미흡한신균주인 B.amyloliquefaciens NBF11-1의항산화기능을분석하기위하여청국장의대표적인발효균주인 B.subtilis NG24를대조군으로하여항산화기능의비교분석실시하였다. Fiordiligie[16] 의연구에서는 B.amyloliquefaciens NBF11-1의추출물에서잠재적인 aglycone형태로존재하는생체이용성이우수한물질인 isoflavone이다량존재한다고하였고, Lauan 등 [25] 의연구에서는 Peptidases 및 proteases 와같은대사산물이 B.subtilis 보다 B.amyloliquefaciens에서훨씬풍부하다고하였다. 또한, Kim[28] 의연구에서는 B.subtilis NG24와유연관계가가장가까운 B.subtilis HH28을이용한청국장보다 B.amyloliquefaciens KC41 을이용한청국장의 γ -polyglutamate 와 isoflavone-glycosides 및 β-glucosidase 의활성이높다고하였고, amino nitrogen 의함량은 B.amyloliquefaciens KC41이 450.0 mg%, B.subtilis HH28은 291.6 mg% 로 B.amyloliquefaciens KC41의함량이더많은걸알수있었다. Ahn 등 [27] 의연구에서는단백질및가수분해중간생성물에작용하여생리활성을촉진하는 proteases가 B.subtilis에서는 179.6 5347

한국산학기술학회논문지제 16 권제 8 호, 2015 Unit/mL/min로나타난반면 B.amyloliquefaciens에서는 201.9 Unit/mL/min로높게나타났다. 또한, Yoon 등 [29] 의연구에서는 B.amyloliquefaciens와 B.subtilis를이용한녹차의발효에서 B.amyloliquefaciens를이용한녹차발효액은항산화효과가있다고알려져있는모든카테킨류인 EGC, EC, EGCG, ECG 중에서 EGC와 EC는감소하였지만 EGCG와 ECG는증가하였다. 그러나, B.subtilis를이용한녹차발효액은오히려모든카테킨류 (EGC, EC, EGCG, ECG) 가감소하였다. 이와같이 B.amyloliquefaciens를이용한발효식품이 B.subtilis를이용한발효식품보다여러가지생리활성측면에서증가하였고, 항산화기능면에서도더높게나타났다. 본항산화효과연구의결과에서 B.subtilis NG24를이용하여발효한청국장에비하여 B.amyloliquefaciens NBF11-1을이용하여발효한청국장의총폴리페놀의추출량이많았다. 또한, 균주첨가량이증가할수록 SOD 유사활성과 DPPH radical 및 NO radical 소거능이유의하게증가하였고, IC 50 values는 SOD 유사활성과 DPPH radical 및 NO radical 소거능에서유의하게감소하였다. 이와같은결과는 B.subtilis NG24를이용한발효에비하여 B.amyloliquefaciens NBF11-1을이용한발효가항산화에대한활성측면에서증가했기때문으로사료된다. 본연구에서는대나무의줄기표면의끝부분에서발견되었으며, 아직잘알려지지않은새로운균주인 B.amyloliquefaciens NBF11-1로청국장을발효하였기때문에이균주를이용한청국장의발효가 B.subtilis NG24를이용한청국장의발효보다어떠한종류의항산화물질이더많이존재하는지는명확히알수는없었다. 그러나, 천연항산화물질과항균물질을가지고있다고알려져있는 B.amyloliquefaciens의새로운균주인 B.amyloliquefaciens NBF11-1은대두가발효되는과정에서 B.subtilis NG24보다청국장점질물의기능중항산화효과면에서우월한효과를나타낸것으로사료된다. 따라서, 향후의연구에서는 B.amyloliquefaciens NBF11-1을이용한발효가청국장점질물의기능중항균기능에어떠한영향을주는지와어떠한활성물질이있는지에대한비교연구가필요하다고사료된다. References [1] J. H. Bae. Antimicrobial effect of Ulsatilla koreana extracts on food-borne pathogens, Kor J. Nutr, Vol. 37, pp. 655-661, 2004. [2] K. S. Chung, J. Y. Kim, Y. M. Kim. Comparison of antibacterial activities of garlic juice and heat-treated garlic juice, Korean J. Food Sci. Technol, Vol. 35, pp. 540-543, 2003. [3] C. J. Shim, G. H. Lee, J. H. Jung, S. D. Yi, Y. H. Kim, M. J. Oh. Isolation and identification of antimicrobial active substances from Rhodiola sachlinensis, Korean J. Food. Preserv, Vol. 11, pp. 63-70, 2004. [4] S. Y. Jang, H. J. Choi, N. Y. Ha, O. M. Kim, Y. J. Jeong. Study on the antimicrobial effects of citrus peel by different extract methods, Korean J. Food Preserv, Vol. 11, pp. 319-324. 2004. [5] FAO/WHO. Working Group Report on Drafting Guidelines for the evaluation of probiotics in food. London, Ontario, Canada, April 30 and May 1, 2001. [6] M. B. Roberfroid. Prebiotics and probiotics: are they functional foods?, The American journal of clinical nutrition, Vol. 71, pp. 1682-1687, 2000. [7] S. J. Jung, J. H. Lee, H. N. Song, N. S. Seong, S. E. Lee, N. I. Beak. Screening for antioxidant activity of plant medicinal extracts, Korean J. Soc. Appl Biol Chem, Vol. 47, pp. 135-140, 2004. [8] P. A. Hammerschmidt and D. E. Pratt. Phenolic antioxidants of dried soybeans, J. Food Sci, Vol. 43, pp. 556-559, 1978. DOI: http://dx.doi.org/10.1111/j.1365-2621.1978.tb02353.x [9] D. E. Pratt and P. M. Bibrac. Source of antioxidant activity of soybean and soy products, J. Food Sci, Vol. 44, pp. 1720-1722, 1979. DOI: http://dx.doi.org/10.1111/j.1365-2621.1979.tb09125.x [10] Z. M. Zin, A. Abdul-Hamid, A. Osman. Antioxidative activity of extracts from Mengkudu (Morinda citrifolia L.) root, fruit and leaf, Food Chem, Vol. 78, pp. 227-231, 2002. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/s0308-8146(01)00402-2 [11] M. Ongena and P. Jacques. Bacillus lipopeptides: versatile weapons for plant disease biocontrol. Trends. Microbiol, Vol. 16, pp. 115-125, 2007. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.tim.2007.12.009 [12] H. H. Lee and S. Y. Lee. Cytotoxic and antioxidant effects of taraxacum coreanum Nakai and T. officinale WEB extracts, Korean J. Medicinal Crop Sci, Vol. 16, pp. 79-85, 2008. [13] N. K. Lee and Y. T. Hahm. Antioxidative characteristics of browning reaction products of glucose- 5348

신균주 Bacillus amyloliquefaciens NBF11-1 을이용하여발효한청국장의항산화효과 γ-poly-glutamate(glu-γ-pga) obtained from amino-carbonyl reaction, Korean J. Food Sci. Technol, Vol.37, pp.812-815, 2005. [14] C. J. Shim, G. H. Lee, J. H. Jung, S. D. Yi, Y. H. Kim, M. J. Oh. Isolation and identification of antimicrobial active substances from Rhodiola sachlinensis, Korean J. Food. Preserv, Vol. 11, pp. 63-70, 2004. [15] A. Arguelles-Arias, M. Ongena, B. Halimi, Y. Lara, A. Brans, B. Joris, P. Fickers. Bacillus amyloliquefaciens GA1 as a source of potent antibiotics and secondary metabolites for biocontrol of plant pathogens, Microb. Cell. Fact, Vol. 8, pp. 63, 2009. DOI: http://dx.doi.org/10.1186/1475-2859-8-63 [16] P. Fiordiligie. Extracellular Enzyme and Antibiotic Substance Production of Bacillus amyloliquefaciens NBF11-1 and Bacillus pumilus NBF11-14 Isolated from the Surface of Bamboo Culms. Department of Biotechnology. Korean. National Uni. 2009. [17] Y. Ito, Y. Akao, M. Shimazawa, N. Seki, Y. Nozawa, H. Hara. Lig-8, a highly bioactive lignophenol derivative from bamboo lignin, exhibits multifaceted neuroprotectve activity, CNS Drug Rev, Vol. 13, pp. 296-307, 2007. DOI: http://dx.doi.org/10.1111/j.1527-3458.2007.00017.x [18] T. Seki, K. Kida, H. Maeda. Immunostimulation mediated antitumor activity of bamboo(sasa senanesis) leaf extracts obtained under vigorous condition, Evidence-based Complementary and Alternative Medicine, Vol. 7, pp. 447-457, 2010. DOI: http://dx.doi.org/10.1093/ecam/nen026 [19] Y. Lin. A. C. Collier, W. Liu, M. J. Berry, J. Panee. The inhibitory effectofbamboo extracton the developmentof 7,12 dimethylbenz[a]anthracene (DMBA) induced breast cancer, Phytother. Res, Vol. 22, pp. 1440-1445, 2008. DOI: http://dx.doi.org/10.1002/ptr.2439 [20] O. Folin and W. Denis. On phosphotungastic -phosphomolybdic compounds as color reagents, J. Biol. Chem, Vol. 12, pp. 239-249, 1912. [21] S. Marklund and G. Marklund. Involvement of the superoxide anion radical in the antioxidation of pyrogallol and a convenient assay for superoxide dismutase, Eu J. Biochem, Vol.47, pp.469-474, 1974. DOI: http://dx.doi.org/10.1111/j.1432-1033.1974.tb03714.x [22] L. P. Leong and G. Shui. An investigation of antioxidant capacity of fruits in singapore markets, Food Chemistry, Vol. 76, pp. 69-75, 2002. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/s0308-8146(01)00251-5 [23] J. I. Gray and L. R. Dugan. Inhibition of n-nitrosamine formation in model food system, J. Food Sci, Vol. 40, pp. 981-984, 1975. DOI: http://dx.doi.org/10.1111/j.1365-2621.1975.tb02248.x [24] N. K. Lee and Y. T. Hahm. Antioxidative characteristics of browning reaction products of glucose-poly-γ-glutamate(glu-pga) obtained from amino-carbonyl reaction, Korean J. Food Sci, Technol Vol. 37, pp. 812-815, 2005. [25] M. C. Lauan, I. L. Santos, J. K. Lim. Comparative Study of Extracellular Proteomes for Bacillus subtilis and Bacillus amyloliquefaciens. Major in Food Biomaterials, Kyung Book National University, Daegu, South Korea. Vol. 31, pp. 30-37, 2013. [26] J. H. Kim, C. E. Hwang, C. K. Lee, J. H. Lee, G. H. Kim, et, al. Characteritics and Antioxidant Effect of Garlic in the Fermentation of Cheonggukjang by Bacillus amyloliquefaciens MJ1-4, J. Microbiol. Biotechnol. Vol. 24, pp. 959-968, 2014. DOI: http://dx.doi.org/10.4014/jmb.1311.11088 [27] Y. S. Ahn, Y. S. Kim, D. H. Shin. Isolation, Identification, and Fermentaion Characteristics of Bacillus sp. with High Protease Activity from Traditional Cheonggukjang, Korean J. Food Sci. Technol. Vol. 38, pp. 82-87, 2006. [28] M. S. Kim. Selection of Microorganisms for Cheonggukjang Fermentation and its Functional Cheonggukjang Manufacturing. Resources and Technol, The Graduate School. Yonsei Uni. 2013. [29] H. Yun, H. J. Oh, S. W. Choi. Diffference of Catechins Extracted Level When Fermented Sun-dried Salt and Green Tea, Korean J. Contents. Vol. 12, pp. 278-285. 2012. DOI: http://dx.doi.org/10.5392/jkca.2012.12.11.278 김한수 (Han-Soo Kim) [ 정회원 ] < 관심분야 > 보건학, 혈액학, 임상화학 2015 년 2 월 : 목포대학교생물학과 ( 이학석사 ) 2016 년 2 월 : 조선대학교보건학과 ( 박사과정 ) 2008 년 8 월 ~ 현재 : 해남한국병원진단검사의학과실장 5349

한국산학기술학회논문지제 16 권제 8 호, 2015 윤현 (Hyun Yoon) [ 정회원 ] 2010 년 8 월 : 목포대학교생물학과 ( 이학석사 ) 2014 년 2 월 : 조선대학교보건학과 ( 보건학박사 ) 2010 년 9 월 ~ 현재 : 한려대학교임상병리학과교수 < 관심분야 > 보건학, 미생물학, 면역학 5350