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1 J Dent Hyg Sci Vol. 15, No. 4, 2015, pp RESEARCH ARTICLE 시판탄산수에의한우치법랑질침식과침착효과 임도선ㆍ반유희ㆍ민영은ㆍ박진주ㆍ유예진ㆍ인소라ㆍ주현지ㆍ정선영ㆍ황영선 을지대학교보건과학대학치위생학과 The Effect of Carbonated Water on Bovine Enamel Erosion and Plaque Adhesion Do-Seon Lim, Yu-Hee Ban, Young-Eyn Min, Jin-Joo Park, Ye-Jin Yu, So-Ra In, Hyun-Ji Ju, Sun-Young Jung, and Young Sun Hwang Department of Dental Hygiene, College of Health Science, Eulji University, Seongnam 13135, Korea Due to the attractive benefits with regard to bone health, digestion, and hydration, carbonated water consumption have rapidly grown over the past few years. However, the acidic drink has latent potential for enamel erosion. The most experimental studies about the enamel erosion have focused on the carbonated beverages with sugar and artificial sweeteners. Here, we determined the enamel erosion potential by commercially available carbonated waters with bovine teeth. The erosion was verified by ph value, calcium concentration, and scanning electron microscope. Then plaque accumulation by bacterial adhesion was determined on the enamel erosion surface to measure roughness. In the present study, we observed that the increased calcium content after being immersed in carbonated waters result from the overall enamel erosion. There were no significant differences between general carbonated waters and mineral waters for erosive capacity. Therefore, commercially available carbonated waters are potentially erosive. In addition, oral bacteria strongly adhered to the erosive enamel surfaces thereby facilitating the development of dental plaque. Thus, it is urgently necessary to provide food safety information on the carbonated water as acidic drink to prevent the enamel erosion. Key Words: Carbonated water, Tooth erosion, ph, Dental plaque, Oral bacteria 서론 치아경조직손상의주된요인은치아침식증과치아우식증으로나눌수있다. 침식증은세균과는무관하게물리적혹은화학적작용에의해치질이상실되는것으로, 주로지속적마찰이나산에의해발생된다. 법랑질이산성환경에지속적으로노출되면법랑질의강도저하에따른치질의약화로, 정상적인칫솔질에도석회화염이쉽게용출되어소실된다. 탄산음료, 식초, 유기산이다량함유된과일등을지나치게섭취하거나과수원등에서일하는사람에게특히치아침식증의경향이보고되었다 1). 치아침식은보통법랑 질주위의수소이온농도가 ph 4.5 이하인조건에서발생하고, ph 에서는치아우식이용이하며, ph 5.5 이상에서는재광화가일어나는것으로조사되었으며 2), 치아침식으로거칠어진표면은치태침착을용이하게하여치아우식발생을증가시킬수있다. 또한, 치아침식증이방치될경우에는치관파괴와치아과민증및교합변형을일으킬수있고심한경우치수노출과농양을초래하여심한통증을일으키는수준까지진행될수있다 3). 공중보건사업의일환으로시행되고있는수돗물불소농도조정사업에의해치아우식증발생이감소되어국민건강보험재정안정화를이끌었던반면, 치아침식증유병률과 Received: July 6, 2015, Revised: July 24, 2015, Accepted: July 24, 2015 ISSN (Print) / ISSN (Online) Correspondence to: Young Sun Hwang Department of Dental Hygiene, College of Health Science, Eulji University, 553 Sanseong-daero, Sujeong-gu, Seongnam 13135, Korea Tel: , Fax: , kiteys@eulji.ac.kr Copyright 2015 by the Korean Society of Dental Hygiene Science This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution Non-Commercial License ( by-nc/4.0) which permits unrestricted non-commercial use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited.

2 J Dent Hyg Sci Vol. 15, No. 4, 2015 관련된위험요인을함유한탄산음료등의섭취빈도는급속히증가하는추세이고, 이로인한산성음료의치아침식우려는꾸준히제기되고있다 4). 일부선진국에서는산성음료에의한치아침식의심각성을보고하는연구들이발표되고있음에도불구하고 5,6) 산성음료의소비가계속증가된다면임상적으로도치아침식이더욱문제될것이라고주장을제기했지만, 여전히다양한산성음료개발은계속되고있고접근성이보다용이해져탄산음료등의소비량은날로증가하고있음을문제시하고있다 7). Meurman과 Murtomaa 8) 의연구에따르면 ph가낮은음료를오랜시간구강내머금고있거나음료를자주섭취할경우유치와영구치의표면경도가감소되었고, 두요인이동시에적용될경우치아침식상승요인으로작용한것으로보고되었다. 국내에서는탄산음료, 오렌지주스, 숙취해소음료등 9-11) 낮은 ph를가진다양한종류의음료를대상으로법랑질침식연구가다수수행되었는데, 특히 Youn 12) 이정상우치를이용한연구를보면 ph가낮으면서구연산이함유된음료가법랑질표면경도를현격히낮춰이로인한치아침식가능성을높이는것으로분석하였다. 위와같이산성음료들이치아에부정적인영향을끼친다는연구보고가증가함에따라대중들의인식변화도늘어나는추세이다. 하지만이와비슷한수소이온농도인 ph 5.5 정도의낮은 ph를가지고있는탄산수는물의대체음료로서일상적으로소비하고있는것과달리치아에미치는영향에대한국내의연구와대중의관심은미비한실정이다. 탄산수는물에이산화탄소가함유되어청량감이느껴지는음료수로, 정제된물에인위적으로탄산가스를주입한인공탄산수와천연적으로탄산가스를함유하고있는광천수로나뉘며, 향이가미되지않은것과대중의수요에맞춰향이가미된탄산수가개발되어시판되고있다. 최근생활수준의향상에따른소비유형의변화로건강에대한관심이더불어높아지면서음료또한건강에이로운것을선호하게되었으며, 그에따라탄산수또한건강음료라는인식으로그수요가증가하고있어 2013년도에비해 2014년도에 134.6% 의성장률을보이는등 13) 대중의섭취와관심도의증가추세를보이고있다. 외국의연구에서 Brown 등 5) 은복숭아향이가미된탄산수에발치한치아를 30분간침지만으로도법랑질표면침식이시작되는것을보고하였는데, 이런결과는무심코소비하고있는탄산수의섭취가치아에미칠수있는영향에대한대중의인식변화의필요성뿐만아니라폭발적으로증가하고있는탄산수소비와비교해부족한국내의연구적관심과다각적인대응의필요성을제시한다. 따라서본연구에서는첨가제가없는국내시판중인탄산수중 5종을대상으로탄산수의치아침식정도를알아보고, 이후침식표면에세균에의한치태침착정도를확인하였다. Table 1. Test Solutions 연구대상및방법 1. 연구재료건전한법랑질표면을가진소의영구절치를선별하여생리식염수에담가냉장보관하였다. 실험에사용된음료는시중에시판중인국내외탄산수 5종을실험군으로선정하였으며, 대조군으로는음성대조군인 3차증류수와양성대조군인무가당콜라 (Coca-Cola Zero; Coca-Cola Beverage, Cheonan, Korea) 를선정하였다 (Table 1). 2. 연구방법 1) ph 측정동일한온도에서측정하기위해 3차증류수, 무가당콜라, 탄산수를 6시간동안실온에방치한후개봉하고 ph meter (Thermo Scientific Orion 2-Star Plus; Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, USA) 를사용하여각음료의 ph를반복측정하여평균값을산출하였다. 2) 시편제작발거된소의영구절치의잔존조직및치석제거, 치면세마등의전처리과정을거친후 cutting disc (Saejong Ind., Siheung, Korea) 를사용하여소의영구절치법랑질을 5 5 mm 크기의절편으로각각채취하였다. 직경 10 mm, 높이 10 mm 원통형의 acrylic resin mold (Jet Acrylic Liquid; Lang Dental, Wheeling, IL, USA) 를제작하여법랑질표면만노출되도록포매한후, #600, #1,200의 silicon carbide 연마지 (Saejong Ind.) 와알루미나분말 (Dentsply Professional, York, PA, USA) 로연마하여평탄한표면의법랑질시편 84 개를제작하였다 14,15). 이는무작위분류되어각군의침지 Solution Name Manufacturer Control Distilled water Milli-Q Biocel Sytem Coca-Cola Zero Coca-Cola Beverage Carbonated Seagram's Coca-Cola Beverage water Trevi Lotte Chilsung Beverage Peacock Ilhwa S. Pellegrino Nestlé Perrier Nestlé 438

3 임도선외 : 시판탄산수에의한우치법랑질침식과침착효과 시간별실험에각각 3개시편이사용되어, 주사전자현미경 (scanning electron microscopy, SEM) 분석용으로총 42개, 칼슘농도측정및세균침착실험용으로총 42개의시편이적용되었다. 로표면을 3차례세척후 Coomassie Brilliant Blue G-250 dye (Bio-Rad) 로침식부분에침착된세균을염색하였고, 착색정도는 densitometric analysis (qantity one program, Gel Doc 2000 system; Bio-Rad) 를이용하여분석하였다. 3) 탄산수침지탄산수는실험직전개봉하여동일한멸균용기에 10 ml 씩분주하여사용하였다. 시편은 4시간, 12시간씩침지하였다. 음성및양성대조군도동일한조건에서시편침지를수행하였다. 7) 통계처리자료분석은 InStat Statistical Software Prism 5 (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA, USA) 를이용하여 one-way ANOVA로분석하였고 p값이 0.05 이하인경우통계적으로유의한것으로해석하였다. 4) 칼슘농도측정 O-cresolphthalein chromogenic method가적용된 calcium assay kit LS (Metallo Assay; MG Metallogenics, Funakoshi Co. Ltd., Tokyo, Japan) 를이용하여, 시편침지후의탄산수로용출된칼슘이온농도를측정하고자하였다. 칼슘농도는제조사에서제시한바에따라표준칼슘용액과병행실험하여칼슘과반응한 o-cresolphthalein을 570 nm 에서 96-well microplate reader (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) 로측정해평가하였다 16,17). 결과 1. 음료의 ph 실험에사용된음료는음성대조군인 3차증류수와양성대조군인무가당콜라를포함하여총 7종으로, 수소이온농도측정결과, 3차증류수를제외한탄산수 5종과무가당콜라에서 ph 5.5보다낮은수치를나타내었고, 개봉후 4시간과 12시간후탄산수 5종에서현저한 ph 증가가측정되었다 (Table 2). 5) 주사전자현미경 (scanning electron microscopy) 관찰 SEM (S-4700; Hitachi Ltd., Tokyo, Japan) 을이용하여 10 kv에서 500배와 1,000배의비율로 3차증류수군과비교하여법랑질표면탈회양상및정도를관찰하였다 18). 6) 세균침착 Streptococcus mutans 균주와 Streptococcus sorbinus 균주는한국생명공학연구원미생물자원센터로부터분양받았다. 배양된 Streptococcus mutans 균과 Streptococcus sorbinus 균을 brain heart infusion 액체배지 30 ml에접종시켜 24시간배양한후, 침식도실험이끝난시편을넣고 150 rpm 조건에서 24시간배양하였다. 시편을꺼내 3차증류수 Table 2. ph Values for Solutions Solution ph (time after opening) 0 h 4 h 12 h Distilled water Coca-Cola Zero Seagram's Trevi Peacock S. Pellegrino Perrier Fig. 1. Effect of carbonated water on calcium release from bovine enamel. Calcium concentration was analyzed in carbonated water after exposure of the bovine enamel to carbonated water. The bovine enamel specimens were immersed in carbonated waters for indicated time point for erosion. Distilled water and Coca-Cola Zero were used as negative and positive control. The concentration of calcium was determined according to the manufacturer s protocol and calculated as mg/dl. a p<0.001 vs. distilled water or 0 hour reaction time in same solution. b p<0.05 vs. 0 hour reation time in same solution. 439

4 J Dent Hyg Sci Vol. 15, No. 4, 2015 Fig. 2. Effect of carbonated waters on appearance of an enamel surface. The bovine enamel specimens were immersed in carbonated waters for indicated time point and were then evaluated using a scanning electron microscopy ( 1,000). 2. 음료 처리 후 칼슘 측정 4. 침식된 치면의 세균 침착 칼슘은 치아에서 가장 풍부한 미네랄 성분 중 하나이다. 탄산수에 시편을 침지한 후 시편에서 용출되었을 칼슘을 측 정하였다. 시간에 따라 3차 증류수에서 칼슘 농도 변화는 거 의 관찰되지 않았지만, 5종의 탄산수는 4시간 시편 침지 후 분석된 칼슘 농도가 무가당 콜라에서 분석된 농도의 약 50% 수준인 것으로 분석되었다( mg/dl). 12시간 시편 침지 반응에서도 여전히 칼슘 농도 증가가 관찰되었다 (Fig. 1). 시편 침지 후 탄산수에서 측정된 높은 수준의 칼슘 농도 가 치아에서 탈회된 결과임을 SEM을 통해 확인하였다. 치 아 침식으로 거칠어진 법랑질 표면에 치태 침착 정도를 확 인하고자, 구강 상주 세균 배양 과정에 침지가 완료된 시편 을 도입, 배양하고, 염색하여 세균 침착 정도를 확인하였다. 음성 대조군인 3차 증류수로 침지된 치면과 비교하여 탄산 수 5종에 침지된 법랑질 표면은 진한 coomassie 염색 정도 를 나타내었다(Fig. 3A). 이는 배양 실험 후 3회 세척에도 제 거되기 쉽지 않은 잔존 세균이 탈회되어 거칠어진 시편 표 면에 침착되어 나타난 결과이다. 침식 부분에 침착된 세균 의 착색 정도를 densitometer로 분석한 결과, 무가당 콜라와 피코크 시편의 경우 12시간 반응에서 세균 점착에 따른 coomassie 염색 정도가 다소 감소되었다(Fig. 3B). 3. 음료처리 후 법랑질 표면 관찰 탄산수에 침지된 시편의 치면을 SEM을 이용해 관찰하였 다. 음성 대조군인 3차 증류수에서 보여지는 치면과 비교하 여 탄산수 5종에 침지된 법랑질 표면은 전체적으로 거친 치 면 양상을 나타내었다. 특히 씨그램(Seagram s; Coca-Cola Beverage, Yangsan, Korea)은 균열이 동반된 치면 침식이 관찰되었고, 트레비 (Trevi; Lotte Chilsung Beverage, Gwangju, Korea), 피코크(Peacock; Ilhwa, Chungwon, Korea), 산펠레그리노(S. Pellegrino; Nestlé, San Pellegrino Terme, Italy), 페리에(Perrier; Nestlé, Vergèze, France)의 경우 양성 대조군인 무가당 콜라(Coca-Cola Zero)에 침지 된 시편의 치면 양상과 비슷한 침식 형태를 나타내었다(Fig. 2). 440 고 찰 탄산수 소비량은 2013년과 2014년 1년 사이에 134.6%라 13) 는 성장세를 보이며 급격히 증가하고 있고 2014년 국내 탄산수 시장은 195억 원에 달했다. 2015년은 지난해보다 성 장해 300억 원에 이를 것이라는 전망이 나와 이런 추세라면 5년 이내 1,000억 원을 넘는 시장 규모를 형성할 것이라는 분석이다. 탄산수는 탄산음료와 달리 당분, 색소, 합성 감미 료 등이 없고 함유된 탄산의 청량감으로 전세계적으로 널리 음용되고 있다. 한국탄산수협회 분석에 따르면 탄산수가 신

5 임도선외 : 시판탄산수에의한우치법랑질침식과침착효과 Fig. 3. Adhesion of oral bacteria to enamel erosion surface. (A) The bovine enamel specimens from Fig. 1 were cultured with Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus in brain heart infusion media for 24 hours. The bacteria adhere to specimens were stained with Coomassie Brilliant Blue G-250 dye. (B) For density quantification, pictures were acquired and captured into ImagePro imaging software and were calculated in pixel intensities. 체내미네랄균형유지에기여하고변비, 다이어트, 소화불량등에효과가있으며, 콜라나사이다등의탄산음료와달리자연생수이고무칼로리라는부분이소비자로부터적극적관심을얻는이유로보고있다. 최근에는탄산수완제품의가격부담에따라소다스트림과같은탄산수제조기를구입해셀프제조하는소비자들도늘어나고있고, 탄산수가나오는냉장고나스파클링정수기와같은생활가전제품도속속출시되고있어, 보다탄산수에대한접근성이용이해지는소비행태로진화되고있다. 과일주스, 이온음료, 탄산음료, 어린이음료등을대상으로한치아부식발생정도를분석한연구결과는 Youn 12), Shim과 Song 19) 과같은많은연구자에의해꾸준히보고되었다. Jeong 등 20) 과 Shin 21) 의연구에서음료의 ph가낮을수록치아표면경도가떨어지는것으로분석되었고, Lee 9) 의연구에서는진동을가해탄산가스를증가시킨콜라가진동을가하지않은것보다법랑질표면경도를심하게감소시키고있어, 탄산가스가직접적으로법랑질에영향을끼침을알수있다. 그럼에도불구하고, 가파른소비성장을보이고보다접근성이용이해지고있는탄산수음용이치아에미치는영향에대한실험적분석은미미하다. 더욱이국내제조품외에도다양한수입탄산수들의출시가세로소비자들의선택폭은상당히넓어져있어이들탄산수와치아건강에 441

6 J Dent Hyg Sci Vol. 15, No. 4, 2015 대한정보가더욱필요한시점이다. 이에본연구에서는대표적인탄산음료로음용되고있는콜라중무가당콜라를양성대조군으로하고, 시판중인탄산수중향이나맛이첨가되지않은플레인탄산수 5종을선택, 정상치아에대한침식유발여부및정도를확인하고, 그로인한세균침착정도를비교분석하였다. 탄산수는물의대체음료로인식되고있는특성이높아, 음용빈도가높고음용후에물양치를하는경향이매우낮다. 따라서법랑질침식정도측정을위해시간단위의탄산수노출시간을설정하였다. 시편은사람의영구치와우치의탈회속도가비슷하다는 Lee 22) 의연구를근거로우치를사용하였다. 실험결과, 탄산수 5종과무가당콜라는수소이온농도가치아에영향을끼칠수있는 ph 5.5보다낮게측정되었다. 시편을침지한탄산수에서칼슘이온이다량분석되었는데 SEM 상에서관찰된현저한침식양상에근거하여이는치아탈회에의한용출에서기인된것으로분석된다. 시편침지후시간에따른 ph 상승은용출된칼슘이온에의하기보다는탄산수개봉후지속적으로발생한탄산가스기화로해석된다. 5종탄산수의법랑질침식활성은용출된칼슘이온농도를기준으로비슷한수준을나타내어무가당콜라의침식활성의약 50% 수준이었고, ph 증가에도불구하고꾸준한표면침식활성이관찰되었다. 침식된법랑질의치태점착취약정도를알아보고자구강내상주균을배양후탄산수에노출된시편을넣고균을다시배양하여세균점착정도를확인하였다. 탄산수 5종에서무가당콜라에준하는세균염색정도가관찰되어, 탄산수에의한침식으로거칠어진표면발생이세균점착요인으로작용하여치태형성에매우취약해진다는것을알수있었다. 무가당콜라와피코크에침지한시편의경우세균점착정도가 12시간반응에서다소감소되었다. 이는높은침식활성으로탈회에의한칼슘용출은증가하였지만치아표면의균열이나침식정도가상대적으로심해마모된형태를취함으로써거친시편표면상실로인한세균부착이용이하지않은결과로해석된다. 본연구결과, 시판중인플레인탄산수 5종에서치아의침식유발에따른칼슘용출과그에따른치면세균침착이매우용이해짐을확인하였다. 따라서탄산수를물대체음료정도로생각하기보다는탄산음료에준하는범주로포괄인식하여음용하는것이바람직하다고생각한다. Brown 등 5) 의보고에서도산성음료대용으로음용하고있는과일향이첨가된탄산수들이치아부식의원인이될수있으므로, 단순히맛이가미된물정도로만인식하는소비자들에게잠재적치아부식능에대한언급이필요하다고제안하고있다. Lee 11) 의연구에서음료에첨가된칼슘농도가증가할수록치아침식능이감소되는결과를나타내고있다. 본연구에사용된탄산수 5종중피코크, 산펠레그리노, 페리에는다양한종류의미네랄이풍부한광천수로, 씨그램이나트레비와같은인공탄산수보다높은칼슘농도를보였다. 하지만본실험조건에서이들의치아침식능은인공탄산수와큰차이를보이지않았다. 또한광천수는칼슘, 나트륨, 칼륨, 마그네슘, 불소, 실리카, 철, 아연등천연미네랄성분이함유되어있는데 23), 코카콜라, 오렌지주스및구연산용액에 5 ppm의불소를첨가후 60분간의침지실험에서법랑질탈회억제효과를확인하였다 24). 하지만광천수의천연미네랄성분에의한탈회억제효과는탄산의탈회능을억제하지는못한것으로보인다. 구강내에는타액내칼슘과인산을치아에침착시키는자연적재광화와타액에의한산의중화가발생하므로 25) 탄산수노출에의한일방적인탈회기전으로만진행되지는않는다. 정상적인구강내환경에서치아의무기질은지속적인상실과침착을되풀이하며항상성을유지하고있다. 하지만어떤이유로든무기질교환평형이깨어질수있는상태가지속되면비가역적인치질의손실이발생된다. 치아주위용액의 ph나포화도가떨어지면치질에서탈회과정이발생하고빠져나온용액의칼슘과인이온이 dicalcium phosphate dihydrate (DCPD) 형태로침착이일어나표면하층을형성하므로우식병소로도작용한다 26). 지속적인치면노출과바르지못한음용법등은구강위생여건등과맞물릴경우법랑질침식과그에따른치태형성을가중시킬수있다. 단지물대용음료로서탄산수를지속적으로접근하는것은치아침식및치아우식위험성요인을초래할수있으므로이에대한소비자들의인식변화가필요할것으로생각된다. 요약 본연구는시판중인국내외제조플레인탄산수 5종을선정하여우치법랑질침식및그에따른세균침착정도를확인하였다. 탄산수에시편을침지후용출된칼슘농도를측정하고, SEM을이용하여법랑질표면의침식을관찰하였다. 이후 S. mutans 균과 S. sorbinus 균이접종된배지에시편을함께배양하여침식된시편의세균침착정도를확인하여다음과같은결론을얻었다. 실험에사용된탄산수 5종은수소이온농도가 ph 5.5보다낮았고, 치아의탄산수침지후칼슘의용출이확인되었다. SEM을이용한치면침식분석결과, 칼슘용출은탄산수에의한법랑질침식이원인임을 442

7 임도선외 : 시판탄산수에의한우치법랑질침식과침착효과 확인하였고, 두분석방법을통해인공탄산수와광천수간의뚜렷한침식활성차이는관찰되지않았다. 또한탄산수에의해유발된치아침식으로치면세균침착이용이해지는것으로확인되었다. 이런결과들로부터탄산수음용시치아침식이유발될수있으며그에따른구강내세균침착이가중될수있으므로, 탄산수음용시치아침식가능성에대한소비자의인식이필요하며, 탄산수를물대체음료정도로생각하기보다는무가당콜라와같은탄산음료에준하는범주로포괄하여음용하는것이바람직하다고생각된다. 감사의글 이논문은 2012년도정부 ( 교육부 ) 의재원으로한국연구재단의지원을받아수행된기초연구사업임 (2012R1A1A ). References 1. Kim J, Kim HY, Park DW, et al.: Oral & maxillofacial pathology. 1st ed. Komoonsa, Seoul, p.114, Thylstrup A, Fejerskov O: Textbook of clinical cariology: caries chemistry and fluoride-mechanisms of action, diet and the caries process. 2nd ed. Munksgaard, Copenhagen, pp , , Eccles JD: Dental erosion of nonindustrial origin. A clinical survey & classification. J Prosthet Dent 42: , Moss SJ: Dental erosion. Int Dent J 48: , Brown CJ, Smith G, Shaw L, Parry J, Smith AJ: The erosive potential of flavoured sparkling water drinks. J Paediatr Dent 17: 86-91, Parry J, Shaw L, Arnaud MJ, Smith AJ: Investigation of mineral waters and soft drinks in relation to dental erosion. J Oral Rehabil 28: , Shaw L, Smith A: Erosion in children: an increasing clinical problem? Dent Update 21: , Meurman JH, Murtomaa H: Effect of effervescent vitamin C preparations on bovine teeth and on some clinical and salivary parameters in man. Scand J Dent Res 94: , Lee KH: A study on the enamel erosion by carbonated beverage. Unpublished master's thesis, Pusan National University, Busan, Lee CY, Jung TS, Kim S: A study on the enamel erosion caused by orange juices. Unpublished master's thesis, Pusan National University, Busan, Lee HJ: Erosive effect of hangover beverages on bovine teeth. Unpublished master's thesis, The Graduate School, Chonnam National University, Gwangju, Youn HJ: Surface microhardness changes caused by commercial drinks on sound enamel of bovine teeth. Unpublished master's thesis, The Graduate School, Chonnam National University, Gwangju, NielsenKorea: 2014 Carbonated water sales trends. Retrieved Jaunary 25, 2015, from #nielsen(2014, October 7). 14. Jang KT: A study of the influences of acidic beverages on erosion of enamel and dentin. J Korean Acad Pediatr Dent 24: , Min JH: The addition of several calcium phosphates to a sports drink for inhibition of tooth erosion. Unpublished master's thesis, The Graduate School, Yonsei University, Seoul, Fujita T, Noguchi K, Terashima I: Apoplastic mesophyll signals induce rapid stomatal responses to CO 2 in Commelina communis. New Phytol 199: , Hisano K, Fujise O, Miura M, et al.: The pga gene cluster in Aggregatibacter actinomycetemcomitans is necessary for the development of natural competence in Ca (2+) -promoted biofilms. Mol Oral Microbiol 29: 79-89, Kim AR, Jeong MJ, Ahn YS, et al.: The interactive effect of these bacterial substrates on the growth of Streptococcus gordonii, Fusobacterium nucleatum and Porphyromonas gingivalis. J Dent Hyg Sci 15: , Shim JS, Song AH: A ph measurement study on commercial alcoholic drinks. J Dent Hyg Sci 12: , Jeong MJ, Jeong SJ, Son JH, et al.: A study on the enamel erosion caused by energy drinks. J Dental Hyg Sci 14: , Shin YH: Study on the primary teeth enamel erosion caused by children beverage. Unpublished master's thesis, School of Dentistry, Seoul National University, Seoul, Lee CK: Comparative study on the rate of dental enamel demineralization using quantitative light-induced fluorescence. Unpublished doctoral thesis, The Graduate School, Dankook University, Cheonan, Choi YJ, Lee HJ, Lee DH, et al.: Therapeutic effects and 443

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