(Fig. 1). 원대한임상병리사회지 : 제 25 권 1 호 1993 최근분리된 Aeromonads 의감염양상및 항생제감수성에대한조사연구 김천전문대학임상병리과 경북대학교병원임상병리과 * 김영권 검경숙 *. 박성화 * Key wαds : Aeromonads infection, Antibiotic susceptibility..._ I. 서를르 았다 7) 그러나이들세균이장관질환을일으키는데 Aeromonadaceae 는담수및하수등에서범 세계적으로발견되며물고기, 개구리, 뱀및도 마뱀등의변온동물에서감염을일으키는그람 음성간균으로, 그크기는 1.0-4.0 x 0.4-1. 0μm 이고아포및협막을형성하지않으며, 통성 혐기성이고운동성양성으로형태학적으로슈도 어떤작용을나타내는것은분명한사실로알 려졌으며최근에는 1 차감염원으로간주되어 임상에서도관심이모아지고있다 13'-16) 따라서저자들은최근 8 년동안환장의검체 에서분리된 Aeromonads 의분리양상및항생 제감수성정도를조사하여보고하고자한다. 모. 나스과와장내세균과의세균과유사하다 1-6) 11. 재료및방법 이세균의생화학적인특성은 oxidase, catalase, lipase, gelatinase 및 caseinase 등의효소 를생산하고포도당등의탄수화물을발효하여 산또는산과가스를생성하며혈액한천배지에 서넓은용혈대를형성한다 7.8.9.10) Aeromonadaceae 는초기에사람에게는비병 원성으로생각되어오다가, 만성장염환자의 대변에서분리된이래최근에는면역이약화된 환자 (immunocompromised patients) 에서봉와 직염, 패혈증등을일으키는것으로보고되고 있으며, 그외에창상감염, 골수염, 요로감염 증등을일으키는병원감염의중요한원인균으 로인식되고있고, 특히면역학적으로정상인 숙주에게도위장관계에위장염을일으킬수있 는중요한원인균으로알려졌다 11-10) Aeromonadaceae 가생산하는독소로는외독 소의성질을갖는 enterotoxin, cytotoxin 및 hemolysin 등이발견되었지만이들독소들의병 검체는 1984 년부터 1991 년사이 8 년간경북대학교병원임상병리과에의뢰되었던환자의 겸체률통상적인방법에의해채취및배양하 였으며 1.4.5.17) 그개요는다음과같다. 혈액배양은 brain heart infusion(bhi) broth 50 mt2 에, 화농성겸체및기타검체는 thioglycollate broth 15 mt2 에증균시켜혈액한천배지와 MacConkey 배지에계대배양하였고, 객답은혈 액한천배지에직접접종하였다. 혈액한천배자에서완전용혈이뚜렷하며, 회 백색의집락을나타내고, MacConkey 배지에서 는연분홍색의납작하고비교적큰집락을나 타내면 oxidase 시험을실시하였으며, 증식된세 균에대한동정실험은 API 20E 와 API 20NE system 을이용하였고 l8), 항생제감수성검사는 Kirby--Bauer 의디스크확산법 19) 을실시하였다 원성작용기전에대해서는명확히밝혀지지않
Specimen BAP, MacConkey L Thioglycolla te broth (pus) Subc 띠 turej 껴 -hemolysis, grayish white colony. lactose non ferment (- ) oxidase test r Enterobacteriaceae (- ) { lndole ( +) antibiotic susceptibility test i NFB # (Pseudomonas) Vibrionaceae Aeromonadaceae (+ ) K/K NFB # (Pseudomonas) TSI K/ A (acid butt) Vibrionaceae Aeromonadaceae (+ ) vibrio polyvalent ( -) +, Vibrionaceae Aeromonadaceae NFB# (Glucose non fermentative gram negative bacilli) (DNase +) (Ariginine +) (Lysine -) (Ornithine -) (V-P +) (Salicin +) Fig. 1. Flow chart for identification of Aeromonas. m. 걸과 건 (1 7.1 %), 1989 년에 18 건 (1 5.4%), 1990 년에 28 건 (23.9%), 1991 년에 25 건 (2 1. 4%) 이었으며, 1. 연도벌및검체벌분리율조사 검체별분리율에대한조사에서는혈액배양에 서 31 건 (26.5% ) 으로가장많이분리되었으며, 연도별분리율에대한조사에서는 1984 년에 3 건 (2.6%), 1985 년에 6 건 (5.1 %), 1986 년에 6 건 (5.1 %), 1987 년에 11 건 (9.4%), 1988 년에 20 농양에서 26 건 (22.2% ), 복막염에서 25 건 (2 1. 4 %), 담즙에서 18 건 (1 5.4%), 객담에서 4 건 (3.4 %), 뇌척수액및소변에서각각 2 건 (1. 7% ), -124 -
늑막액과대변에서각각 1 건 (0.9% ) 이었으며, %) 로나타났다 (Table 1). 기타검체가밝혀지지않은겸체에서 7 건 (5.9 T able 1. Specimen sources and yearly distribution of Aeromonads. 꿇굶펀L 1984 1985 1986 1987 1988 1989 1990 1991 Total( %) Stool 1 1( 0.9) Pleural fluid 1 1 ( 0.9) Urine 1 1 2( 1.7) Cerebrospinal fluid 1 2( 1.7) Sputum 2 1 4( 3.4) Ascitic fluid 1 2 4 3 4 11 25(21.4) Bile 2 3 1 3 6 18(15.4) Pus 5 6 2 10 3 26(22.2) Blood 3 2 2 6 6 5 7 31(26.5) Others 1 1 1 1 1 1 7( 5.9) Total 3 6 6 11 20 18 28 25 117 (%) (2.6) (5.1) (5.1 ) (9.4) (17.1) (15.4) (23.9) (21.4) (100.0) 2. 연령별및성별분리율조사연령별분리율에서는 50..., 59세에서 48 건 (4 1. 0 %) 으로가장높게나타났고, 다음에 40..., 49 세에서 22 건 (1 8.8%), 30..., 39 세에서 14 건 (12.0 %), 20..., 29 세에서 11 건 (9.4 %), 60..., 69세와 기타에서각각 6 건 (5.1 %) 으로나타났으며, 70 세이상은 5 건 (4.3%), 10..., 19세에서는 4 건 (3.4 %), 1..., 9세에서는 1 건 (0.9% ) 으로나타났다. 성별분리율조사에서는남자가 62 건 (52.9 %), 여자가 55 건 (47.1%) 로남자가약간높게 냐타났다 (Table 2, Fig. 2). ~Year Age\Sex 1-9 10-19 20-29 30-39 40-49 50-59 60-69 70 others Sub total Total (%) T able 2. Yearly distribution of Aeromonads by age and sex. M : Male, F : Female 1984 1985 1986 1987 1988 1989 1990 1991 Sub. To M. F M. F M. F M. F M. F M. F M. F M. F M. F Total( %) 1 1 l( 0.9) 2 1 1 2 2 4( 3.4) 1 1 3 5 1 2 9 11( 9.4) 2 1 5 4 1 8 6 14 (12.0) 2 2 4 3 1 4 3 2 12 10 22 (18.8) 2 2 1 11 2 6 4 3 9 5 28 20 48(41.0) 2 3 3 6( 5.1) 1 1 3 2 5( 4.3) 1 1 1 4 2 6( 5.1) 2 3 3 2 4 10 1 13 7 8 10 9 19 15 10 62 55 3 6 6 11 20 18 28 25 117 117 (2.6) (5.1 ) (5.1 ) (9.4) (17.1) (15.4) (23.9) (21.4) (100.0) (100.0) -125 -
α% %N ωmπωωm 5 M.F M.F M.F M.F M.F M.F M.F M.F M.F 1-9 10-19 20-29 30-39 40-49 50-59 60-69 70< Others Fig. 2. Histogram of Aeromonads by age and sex. No. mmωmωω때m o 3-5 월 6-8 월 9-11 월 12-2 월 Fig. 3. Scatter diagram of Aeromonads by season. 와침연 L T able 3. Seasonal distribution of Aeromonads. 1984 1985 1986 1987 1988 1989 1990 1991 Total( %) 3-5 1 1 5 4 6 3 20 (17.2) 6-8 2 4 2 9 8 9 10 13 57(48.7) 9-11 2 1 4 2 10 7 27(23.1) 12-2 1 2 3 3 2 2 13 (11.0) Total 3 6 6 11 20 18 28 25 117(100.0) 3. 계절밸분리울조사건 (90.2% ) 이감수성, 2 건 (2.0% ) 이중등도감 수성, 8 건 (7.8% ) 이저항성을나타냈다. Cefox- 계절별분리율에대한조사에서는여름 (6- itin 에서 76 건 (74.5%) 이감수성, 4 건 (3.9% ) 이 8 월 ) 에 57 건 (48.7% ) 으로가장많이분리되었중퉁도감수성, 22 건 (2 1. 6%) 이저항성을나타 으며, 그다음으로가을 (9-11 월 ) 에 27 건 (23.1 %), 봄 (3-5 월 ) 에 20 건 (1 7.2% ), 그리고겨울 (1 2-2 월 ) 에 13 건 (11. 0%) 의순으로겨움에분 리율이가장낮은것으로나타났다 (Table 3, Fig 2). 4. 항생제감수성조사 항생제감수성시험에서 ampicillin 에 30 건 (29.4%) 이감수성, 6 건 (5.9% ) 이중등도감수 성, 17 건 (1 6.7%) 이저항성을나타냈다. Cephalothin 에는 32 건 (3 1. 4 %) 이감수성, 4 건 (3.9% ) 이중등도감수성, 66 건 (64.7%) 이저항성을 나타냈다. Cefotaxine ojl 는 78 건 (76.5%) 이감수 성, 5 건 (4.9% ) 이중등도감수성, 19 건 (1 8.6% ) 이저항성을나타내었다. Gentamycin 에는 92 T able 4. Antibiotic susceptibility of Aeromonads. Antimicrobial Susceptible Interme- Resistant agent (%) diate( %) (%) Ampicillin 30(29.4) 6( 5.9) 66(64.7) Amikacin 71(69.6) 14 (1 3.7) 17 (16.7) Cephalothin 32(31.4) 4( 3.9) 66(64.7) Cefotaxime 78(76.5 ) 5( 4.9) 19 (18.6) Gentamicin 92(90.2) 2( 2.0) 8( 7.8) Cefoxitin 76(74.5) 4( 3.9) 22(21.6) Colistìn 68(66.7) 24(23.5) 10( 9.8) Chloramphenicol 91(89.2) 2( 2.0) 9( 8.8) Carbenìcillin 3( 2.9) 21(20.6) 78(76.5) Tobramycin 86(84.3) 4( 3.9) 12 (11.8) -126 -
냈다. Chloramphenicol 에는 91 건 (89.2%) 이감 수성, 2 건 (2.0% ) 이중등도감수성, 9 건 (8.8% ) 이저항성을나타냈다. Carbenicillin 은 3 건 (2.9 %) 이감수성, 21 건 (20.6% ) 이중등도감수성, 78 건 (76.5% ) 이저항성을나타냈으며, tobramycm 에는 86 건 (84.3% ) 이감수성, 4 건 (3.9% ) 이중등도감수성, 12 건 (11. 3%) 이저항성을 나타냈다 (Table 4). N. 고찰 Aeromonadaceae 는주로담수, 토양, 하수 기에많이분리되었음을알수있다. 이것은 Aeromonas 감염이하수또는담수와관계가 있다는것으로사료된다. 겸체별분리율에서는 혈액배양이 31 건 (26.5%) 으로가장많이분리 되었고, 다음은농양에서 26 건 (22.2% ), 그리고 복수액에서 25 건 (2 1. 4 %), 담즙, 객담의순이었 는데, 이것은수인성으로인한소화기계감염 과물이나흙으로인한오염으로창상에감염을일으킨것으로생각된다. Aeromonas 는비교적병원성이낮은세균이 지만때로는패혈증도동반하는심각한감염올 일으키기도한다. 그예로박둥 13) 의보고에는 둥에서범세계적으로발견되며개구리, 뱀, 도 마뱀및물고기동의변온동물에서감염증을 일으키기도하며드물게는정상인의장관계에 서분리되기도한다. 이세균은썽크대, 배수관및증류수공급기둥에서도발견되고병원내 감염의원인체로알려졌다 1, 2, 4, 6, 17, 20) 과거에는이세균이장내세균으로잘못동 정되기도했으나최근에는간담도게질환, 백 혈병빛암의면역이약화된환자의증가로인 해기회감염균으로작용하는경우가많아임상 의관심이모아지고있다 2, 11, 14, 20) 저자들이 1984 년부터 1991 년까지 8 년간 117 명의환자검체로부터 Aeromonas 를분리하여 조사한결과연령별분리율분포에서는 50-59 세에서 4 1. 0% 로가장높게나타났고, 그다 음으로 40-49 세에서 18.85 로높게나타났다. 이는박둥 13) 이성별에관계없이보고한성별분 포에서상당수 (52%) 가 40-50 세에서, 홍등 15) 은 40-60 에서많이발생한다는결과와거의 일치하지만, 1986 년최등 3\ 1991 년김등 11) 은 20-29 세의남자에서많이발생한다는보고와 는상반된결과를나타냈다. 계절별, 월별분리율에대한조사에서는여 름 (5-8 월 ) 에 53 건 (45%) 으로가장많이분리 되었고다음으로가을 (9-11 월 ) 에 31 건 (26%) 순으로나타났다. 김, 박등의보고에서는 6 월 에서 9 월사이에, 홍등 15) 의보고에서는 4 월에 서 8 월사이에, Von Graevenitz 6 ) 는 5 월에서 9 월사이에상당수가분리되었다는보고틀을고 려해볼때, 담수에노출될기회가많은하절 m I Aeromonas 감염으로사망한환자 4 명중 3 명 이, 최동은 5 명의사망자중 4 명이, 홍등 15) 은 2 명의환자모두가패혈증으로사망했다는결 과를고려해봄으로써추의할수있다. 그리고 복막액과담즙에서분리되는경우는환자자신 이가지고있던세균에의한내인성감염으로 생각되며특별한창상이없는패혈증환자또 한소화기계에의한감염으로추측된다. 농성 겸체의분리는물이나흙에의해창상에농양 을일으키는것으로보아또다른요소의유무 에대해더자세한연구가필요하다고생각된 다. 내인성으로여겨지는 Aeromonas 의소화기 감염의존재여부를알아보는데는대변검체 에서도이세균이분리되어야하지만이세균 은 lactose 분해율이 50% 이상이어서 lactose 분해세균에대해서도주의갚게관찰할필요가 있다. 이들의분리를위해 Millership21), Von Graevenitz 등 2, 6) 의보고에의하면 alkaline peptone water 와 ampicillin 을첨가한 trypticase soy broth 등이추천되고있으며, 혈액한천배지를 사용할때장내세균용선택배지를추가하여사 용하므로써좀더좋은결과를기대할수있다 고보고하였다. 한편김등 ll), 최둥 l4), 박등 13) 은그람음성 간균및그람양성구균과의혼합감염이많은 것으로보고했으며, 저자들은혼합감염된유 사한균종들과의감별점을고안하였다 (Table 5). 항생제감수성검사에서는 ampicillin, carbenicillin, cephalothin 에대해서상당수가내성
Table 5. Biochemical characteristics of gram negative bacilli related with Genus Aeromonas Biochemical tests Enterobacteriaceae Vibrio Pseudomonas Aeromonas Plesiomonas BAP ( ß -hemolysis) V V + + MacConkey V V V + (lactose ferment) Oxidase + + + + TSl(butt acid) + + + + DNase V V + Arginine V + + + Lysine V + + Ornithine V + + Vibrio polyvalent + :# V : Variable, + : 90 % more positive, - : 90 % more negative 이었는데, 이는 ß -lactamase 의생성때문으로 생각되어지며 gentamycin, amikacin, colistin, tobramycin 등 aminoglycoside 계통에서는감 수성이높게나타나서기존의보고들과대체로 비슷하였으며 6. II. 13. 14.22.23.24) 최근혈액배양에서 Salmonella 보다 Aeromonas 의분리율이높아지 는경향이있어이점에대한지속적인관섬과 자세한역학적조사연구가수반되어야할것 으로사료된다. 2) 겸체별분리율에서는 blood 에서 31 건 (26. 5%) 으로가장많은분리율을보였고, 농양에 서 26 건 (22.2%), 복수액에서 25 건 (2 1. 4% ), 담 즙에서 18 건 (1 5.4%), 객담에서 4 건 (3.4 %), 뇌 척수액과소변에서각각 2 건 (1. 7%), 늑막액과 대변에서각각 1 건의분리율을보였다. 3) 연령별분리율에서는 50-59 에서 48 건 (4 1.0% ) 으로가장높게나타났으며, 70 세이 상 5 건 (4.3%), 1-9 세에서 1 건 (0.9%) 으로노 령자와소아에서비교적낮은분리율을보였 V. 요 t 저자들은 1984 년부터 1991 년까지 8 년간경 북대학교병원임상병리과에접수된 117 명의 검체로부터 Aeromonads 를분리하여다음과 같은결과를얻었다. 1) 연도별분리율에서는 1985 년에 6 건 (5.1 %) 이었으나 1988 년에 20 건 (1 7.1%), 1990 년에 28 건 (23.9% ) 으로점차적으로높은분리율을 보였다. -, 다. 4) 계절별분리율에서는여름 (6-8 월 ) 에 57 건 (48.7% ) 으로가장많이분리되었으며, 겨울 (1 2-2 월 ) 에 13 건 (11. 0%) 으로가장낮은것으 로나타났다. 5) 항생제감수성시험에서는 gentamicin 이 90.2 %, chloramphenicol 이 89.2%, tobramycin 이 84.3% 로높은감수성을보였고 carbenicillin 76.5%, ampicillin 과 cephalothin 은각각 64.7 % 의저항성을보였다. -128 -
Isolation and Antibiotic Susceptibility Results of Aeromonads from Clinical Specimens from 1984 to 1991 Kim, Young K won. Kim, Kyung Sook.,* Park, Sung Hwa.* Dept. of Clinical Pathology, Kimchun Junior College Dept. of Clinical Pathology, Kyungpook University Hospital* ABSTRACT 1) The frequency of annual isolation of Aeromonads continued to increase from 6 strains( 5. 1%) in 1985 to 20 strains(17.1%) in 1988 and 28 strains(23.9%) in 1990. 2) The frequency of isolation of Aeromonads continued by the specimens showed 31 strains (26.5%) from blood 26 strains(22.2%) from pus, 25 strains(21.4%) from ascitic fluid, 18 strains ( 1. 7 %) from urine and each 1 strains ( 0. 9% ) from pleural fluid and stool. 3) The frequency of isolation of Aeromonads by age groups showed 48 strains( 41.0%) from 50-59 group, 5 strains( 4.3%) from above 70 and 1 strains( 0.9%) from 0-9 group. 4) The frequency of seasonal isolation of Aer-omonads showed 57 strains( 48.7%) in the summer and 13 strains(11%) in the winter. 5) Antimicrobial susceptibility test against Aer-omonads showed 90.2%, 89.2% and 84.3% sensitivity to gentamicin, chloramphenicol and tobramycin, respectively, and 76.5% resistence to ampicillin and cephalothine. References 1. Ewing W. H, Hugh R: Aeromonas in manual of clinical microbiology. Edited by JP, Lennette, EH. spaulding, EH, and Truant, 2nd : am. Sco. Micro bioi. Washington, p. 230, 1974. 2. Von Gra venitz. A, Mensch. A. H : The genus Aeromonas in human bacteriology, Report literature. N. Engl, J. Med. 278:245, 1968. 3. Ernest. Jawets, Gerge F. broks et al : Medical microbiology. 18th ed, p.222, 1989. 4. Harris, R. L et al : Bacteremia caused by Aeromonas species in Hospitaliazed cancer patients. Rew, infect. Dis 7. 314, 1985. 5. Sydney M. Finegod, William J. Martin, Elvin G. Scott : Bailey and Scott diagnostic Microbiology p.148, 1978. 6. Von Gravenitz A : Aeromonas and Plesiomonas IN Lennette EH Balows A, Hausler W J Jr. et al : Manual of clinical microbiology, ed 4. Washington DC, American society for Microbiology p.278, 1985. 7. Scott D. Holmberg, M. D, Wendy L. Schell, M. S, George, R. Fanning, M. S : Aeromonas Intestinal Medicine. Vol105. No 5, 1986. 8. Gilardi, G. L. Bottone, M: Unusual from clinical specimen. 2. characteistics of Aeromonas species. Appl Microbial. 20:156, 1970. 9. Joklik, Willett, Amos, Willfert : Zinsser Microbiology, 19th ed p.484, 1988. 10. Koneman, Allen, Dowell, Sommers : Color atlas and textbook of Diagnostic Microbiology. p.161, 1979. -129-
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