Ann Clin Microbiol Vol. 7, No., June, http://dx.doi.org/5/acm..7..5 pissn -55 eissn -65 Characterization of Salmonella spp. Clinical Isolates in Gyeongsangbuk-do Province, to 3 Oh-Geun Kweon, Jin Seok Kim, Gou-Ok Kim, Chang-Il Lee, Kwang-Hyeon Jeong, Junyoung Kim Division of Microbiology, Gyeongsangbuk-do Provincial Government Institute of Health and Environment, Division of Enteric Diseases, Center for Infectious Diseases, Korea National Institute of Health, Cheongwon, Korea Background: Extended-spectrum cephalosporins and fluoroquinolones are important antimicrobials for treating invasive salmonellosis, and emerging resistance to these antimicrobials is of paramount concern. Methods: A total of 3 Salmonella spp. clinical isolates recovered in Gyeongsangbuk-do from to 3 were characterized using antibiotic resistance profiles and pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). Results: A high prevalence of multidrug-resistant isolates, mainly showing an ampicillin, nalidixic acid, chloramphenicol resistance pattern, was observed. Four extended-spectrum β-lactamase (ESBL)-producing isolates (3 CTX-M-5 isolates and CTX-M-7 isolate) were found. The bla CTX-M-7 gene was carried by an IncF conjugative plasmid in the S. Infantis isolate. The bla CTX-M-5 gene were carried by an IncF ( isolates) or IncHI ( isolate) conjugative plasmid in S.. In addition, a single mutation of GyrA, Ser3Thr ( isolates), Asp7Tyr (9 isolates), Asp7Gly ( isolates), and Asp7Leu (3 isolates), was detected in nalidixic acid-resistant Salmonella spp. isolates. XbaI PFGE analysis of all isolates revealed more than 9 different pulsotypes. The most common S. PFGE pattern (SEGX.3) was associated with a larger number of cases of invasive salmonellosis than all other patterns. Conclusion: The information from our study can assist in source attribution, outbreak investigations, and tailoring of interventions to maximize disease prevention. (Ann Clin Microbiol ;7:5-57) Key Words: Drug resistance, Extended-spectrum beta-lactamase, Nalidixic acid, Pulsed-Field Gel Electrophoresis, Salmonella INTRODUCTION 살모넬라균은수인성ㆍ식품매개성감염질환의대표적인원인병원체로장티푸스와비장티푸스살모넬라로크게분류되며사람과동물에게위장염이나패혈증등의질병을일으키고있다 []. 편모항원, 균체항원, 협막항원에따라약,6개의혈청형으로구분되고이중일부혈청형이사람에게감염을일으키고있다 []. 비장티푸스성살모넬라속균은오염된식품이나물을섭취하거나동물과의접촉등이주요감염원으로알려져있다 [3,]. 99년대후반에들어서면서부터국내ㆍ외에서살모넬라속균을비롯한장내세균에의한감염환자가급증하고있다. 특히미국에서만매년 만명정도가살모넬라균에감염되고이중 37여명정도는사망까지이르는것으로알려져있다 [5]. 국내 에서도매년,여건의살모넬라속균감염사례가꾸준히보고되었으나현재까지그발생원인과감염경로는대부분밝혀지지않았다. 주목할만한점은이병원체들에서치료용항균제에내성이계속해서증가되고있다는것이며최근국내에서분리되고있는살모넬라균들의경우에도 β-lactam 계열, quinolone 계열등 -5계열의항균제에대해내성을갖고있는경우가점점늘어나고있어치료에있어어려워질뿐아니라항균제가남용될것이우려되고있다 [6]. 현재전세계적으로살모넬라균같은식중독원인균에서도 extended-spectrum β-lactamase (ESBL) 의생산확인및분류등에대한연구나 quinolone계항균제에대한주요내성기전등항균제내성의기전에관한연구가활발히이루어지고있으며, 이내성주간의유전학적연관성에관한연구도활발히진행되고있다 [7-9]. 최근집단급식시설의증가와식품유통구조의대형화로감 Received February,, Revised May,, Accepted May, Correspondence: Junyoung Kim, Division of Enteric Diseases, Center for Infectious Diseases, Korea National Institute of Health, Korea Centers for Disease Control and Prevention, 7 Osongsaengmyeong (i)-ro, Osong-eup, Cheongwon 363-7, Korea. (Tel) -3-79-, (Fax) -3-79-9, (E-mail) jun9@hanmail.net c The Korean Society of Clinical Microbiology. This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution Non-Commercial License (http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.) which permits unrestricted non-commercial use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited. 5
Oh-Geun Kweon, et al. : Characterization of Salmonella spp. in Gyeongbuk 5 염성설사질환이나식중독의대규모발생의가능성이여전히높은실정이고이경우광범위한항균제의사용으로병원체의항균제내성이더욱증가될가능성도같이높아지게된다. 그러나국내에서의항균제내성에대한연구는주로병원내감염의경우로집중되어있으며대규모집단발생을일으키는살모넬라균같은식중독병원체에대해서는항균제내성에관한연구정도가다소미진한형편이다. 현재항균제내성균주에의한감염환자발생은환자개인의건강뿐아니라가계경제에지장을주며지역이나국가경제에도많은타격을줄수있다. 또이런내성관련유전자들이인간에게치명적인감염질환을일으키는병원체로전달된다면그또한심각한위협이될수밖에없다. 따라서본연구에서는 -3년경북지역의설사환자에서분리된살모넬라균을대상으로항균제내성양상과기전을파악하고, 균주들간의유전학적연관성을확인하고자하였다. MATERIALS AND METHODS. 균주의분리및동정 년부터 3년까지경북지역의, 3차종합병원 군데에내원한설사환자의분변으로부터살모넬라균을분리하였다. 분리균의동정은 Edward와 Ewing의방법 [] 을참고하여 Vitek compact (biomérieux, Marcy l'eltoile, France) 를이용하였다. 예비확인균주에대하여살모넬라진단용항혈청을이용하여혈청형을조사하였으며, O군및 Vi 항혈청은국립보건연구원 (KNIH) 에서공급받고 H 항혈청은 BD Difco (Difco, Detroit, MI, USA) 사의제품을사용하였다.. 항균제감수성시험항균제감수성시험은 microbroth dilution 방법에따라 Sensititre의 KRCDCF 패널 (TREK Diagnostic Systems, Westlake, OH, USA) 을사용하여최소억제농도 (minimal inhibitory concentration, MIC) 를확인하였다. 대상항균제는 ampicillin (AMP), ceftriaxone (CRO), cefotaxime (CTX), imipenem (IPM), amikacin (AMK), cefoxitin (FOX), ampicillin/sulbactam (SAM), nalidixic acid (NAL), ciprofloxacin (CIP), tetracycline (TCY), chloramphenicol (CHL), gentamicin (GEN), trimethoprim/sulfamethoxazole (SXT), amoxicillin/clavulanic acid (AMC) 의 종이고, 감수성시험의정도관리를위해서 Escherichia coli ATCC 59 균주와 Klebsiella pneumoniae ATCC 763 균주를사용하였다. 각항균제에대한감수성및내성결과는 Clinical and Laboratory Standard Institute (CLSI) [] 의기준에따라판정하였다. 3. ESBL 유형탐색분리균주의 ESBL 및 plasmid-mediated AmpC β-lactamase 유형은 TEM- 및 DHA, SHV, OXA, CMY-, CTX-M-I, CTX-M-II, CTX-M-IV group에특이적인 primer를이용한 multiplex PCR 방법으로확인하였다 []. CTX-M 유형의 ESBL 생산이확인된균주에서는 bla CTX-M 유전자를 CTX-M-I 및 CTX-M-IV group에특이적인 primer [3] 를이용하여 PCR로증폭시킨뒤, 자동염기서열분석기 ABI 37 sequencer (Applied Biosystems Foster City, CA, USA) 를이용하여염기서열을확인하였고, NCBI의 BLAST 프로그램 (www.ncbi.nlm.nih.gov/blast) 을이용하여 GenBank에등록된염기서열과비교하여최종유형을결정하였다.. Plasmid replicon 유형확인 ESBL 생산균주의 plasmid 유형은 Enterobacteriaceae에서주로관찰되는 plasmid family의 replicon에특이적으로결합하는 쌍의 primer set을이용하여 multiplex PCR 기법으로확인하였다 []. 5. gyra, parc 유전자의돌연변이확인 Quinolone계내성의주원인이되는 DNA gyrase와 topoisomerase IV에서의돌연변이여부를확인하기위하여이효소들을암호화하는 gyra 유전자와 parc 유전자의염기서열중 quinolone계내성과관계되는돌연변이가빈발하는부위인 quinolone resistance determining region (QRDR) 을 PCR로증폭시켜염기서열을분석하고변이여부를확인하였다 [5]. 6. Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) PFGE 시험은제한효소 XbaI (Roche, Mannheim, Germany) 을사용하여미국질병통제센터 (CDC) 에서운영하는 PFGE network (PulseNet) 의 PFGE 표준실험법 [] 에따라실시하였다. 전기영동은 CHEF-Mapper system (Bio-rad, Hercules, CA, USA) 에서.% Seakem Gold agarose gel에넣어 TBE, 6V/cm, o C,.-63. 초 switch time의조건으로 시간동안실시하였다. 각 PFGE 유형사이의연관관계는 BioNumerics (Applied Maths, Ghent, Belgium) system 을사용하여분석하였다. Banding patterns의분석은 Dice coefficient와.5% tolerance 를적용하였고, dendrogram은 unweighted pair group method with arithmetic averages (UPGMA) 방법으로작성하였다. RESULTS. 살모넬라혈청형 부터 3 년까지경북지역 개병원에내원한설사환자
5 Ann Clin Microbiol ;7():5-57 Table. MIC 5 and MIC 9 of antibiotics for Salmonella spp. isolates (n=3) Antibiotics Breakpoints MIC 5 (μg/ml) MIC 9 (μg/ml) No. (%) of isolates S I R Ampicillin Ceftriaxone Cefotaxime Cefoxitin Ampicillin/Sulbactam Amoxicillin/Clavulanic acid Imipenem Amikacin Gentamicin Nalidixic acid Ciprofloxacin Tetracycline Chloramphenicol Trimethoprim/Sulfamethoxazole S S S S S S S S S R R R () 6 (6.7) 6 (6.7) 3 () () 5 (3.3) 3 () 3 () () 3 (3.3) 3 () 3 (76.7) 9 (63.3) (93.3) (6.7) 5 (.7) (6) (3.3) (3.3) (33.3) 6 () 7 (56.7) 7 (3.3) (36.7) (6.7) Table. MICs of Salmonella spp. isolates Strain Serotype MICs (μg/ml) of antibiotics AMP CRO CTX FOX SAM AMC IMP AMK GEN NAL CIP TCY CHL SXT 3 5 6 7 9 3 5 7 9 3 5 6 7 9 3 Typhi Sandiego Senftenberg Bardo Thomson Paratyphi B Infantis Paratyphi B Stanley.5 (I) Abbreviations: AMP, Ampicillin; CRO, Ceftriaxone; CTX, Cefotaxime; FOX, Cefoxitin; SAM, Ampicillin/Sulbactam; AMC, Amoxicillin/ Clavulanic acid; IMP, Imipenem; AMK, Amikacin; GEN, Gentamicin; NAL, Nalidixic acid; CIP, Ciprofloxacin; TCY, Tetracycline; CHL, Chloramphenicol; SXT, Trimethoprim/Sulfamethoxazole. Values in boldface indicate higher value than the breakpoint of CLSI.
Oh-Geun Kweon, et al. : Characterization of Salmonella spp. in Gyeongbuk 53 에서분리된살모넬라속균주들은총 3주였으며, A 병원에서 주, B 병원에서 주, C 병원에서 6주, D 병원에서 주가확인되었다. 분리된균주의혈청형은총 종이었으며, S. 가 3주 (3.3%) 로가장많았고, S. 이 주 (6.7%) 로확인되었다. S. Paratyphi B가 주 (6.7%) 였고, S. Bardo, S. Infantis, S. Sandiego, S. Senftenberg, S. Stanley, S. Thompson, S. Typhi가각각 주 (3.3%) 씩분리되었다.. 항균제감수성경향분석분리된살모넬라속 3균주에대한 종항균제의감수성시험결과는 Table 과 에요약하였다. 전체살모넬라속균의내성률은 AMP가 6% 로가장높았고, NAL (56.7%), CHL (36.7%), SAM (33.3%), TCY (3.3%) 순으로내성률이관찰되었다 (Table ). GEN, CRO, CTX, SXT 항균제에는 % 이하의내성률을나타내었고, FOX, AMC, IMP, AMK, CIP의다섯가지항균제에는모든균주가 % 감수성을나타내었다. 살모넬라속균주에서 AMP 과 NAL의 MIC 5 과 MIC 9 모두각각 μg/ml, μg/ml으로서높은 MIC 분포를보였지만, 나머지항생제의 MIC 5 은각항균제의내성판단기준 (breakpoint) 을넘지않았다. 혈청형별항균제내성양상은 S. (n=3) 의경우모든균주 (%) 에서 NAL에대한내성이관찰되었고, AMP.6%, CHL 6.5%, SAM 6.% 의내성률을보였다. 특히, 3세대세팔로스포린계열항균제 (CRO와 CTX) 에내성을보이는 균주중 3주가 S. 이었다. S. 은검사한 균주중 균주 (5%) 에서 AMP 내성이관찰되었고, 3균주 (37.5%) 가각각 NAL, GEN, TCY에대해서내성을보였다 (Table ). 분리균중 균주 (7%) 가적어도한가지이상의항균제에내성을나타내었으며, 3가지계열이상의항균제에내성을보이는다제내성은 균주 (6%) 에서관찰되었다. 특히, AMP에내성을보이는 균주모두에서다제내성이관찰되었다 (Table ). 혈청형 S. 의.6% (/3), S. 의 5% (/), S. Infantis (/) 와 S. Paratyphi B (/) 균주들도다제내성균이었다. 반면, 그외기타혈청형균주들은모든약제에대하여감수성을보였다. 3. ESBL 유전형및 Plasmid replicon 확인대상균주중 AMP, CRO, CTX에내성을나타낸 개균주에대하여 PCR과염기서열분석을통해 ESBL 유형및 plasmid replicon을확인하였다. Multiplex PCR로확인된 ESBL 유형은 S. 3개균주의경우 CTX-M-I group이었고, S. Infant에서는 CTX-M-IV group 유전자가확인되었으며, 추가로 TEM- β-lactamase도확인되었다. CTX-M-II group 및 SHV, OXA, DHA, CMY형유전자에대하여 PCR 양성반응을보이는균주는없었다. S. 3균주에서검출된 CTX-M-I group은모두 bla CTX-M-5 으로확인되었으며, S. Infant 균주의 CTX-M-IV group은 bla CTX-M-7 과염기서열이일치하였다 (Table 3). ESBL 및기타항균제내성의전파과정의원인을확인하기위하여 bla CTX-M 유전자를가지는 균주의 plasmid replicon을확인한결과, 하나의 S. 균주 (6번) 에서는 IncHI 유형이, 번과 번 S. 및 번 S. Infant 균주에서는 IncF 유형이확인되었다 (Table 3). Table 3. Molecular characteristics of Salmonella spp. resistant to third-generation cephalosporins and quinolones Strain Serotype bla CTX-M gene Other bla gene Plasmid replicon Mutations in QRDR gyra parc 5 6 7 3 5 3 7 S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. S. Infantis S. Paratyphi B S. S. S. S. CTX-M-5 CTX-M-5 CTX-M-7 CTX-M-5 TEM- IncHI IncF IncF IncF Asp7 Leu Asp7 Tyr Asp7 Tyr Asp7 Tyr Asp7 Tyr Asp7 Tyr Asp7 Gly Asp7 Gly Asp7 Tyr Asp7 Leu Asp7 Tyr Asp7 Gly Ser3 Thr Asp7 Gly Asp7 Leu Asp7 Tyr Asp7 Tyr
5 Ann Clin Microbiol ;7():5-57. Quinolone 항균제의내성기전확인 Quinolone계항균제에대한내성기전연구를위하여 NAL에내성이확인된 7균주 (S. 3주, S. 3주, S. Paratyphi B 주 ) 에대하여 gyra와 parc 유전자의 QRDR 염기서열을분석하였다. 모든균주에서 NAL 내성을유도하는것으로알려진 GyrA의 3번째혹은 7번째아미노잔기에변이가관찰되었다. 3번아미노위치의 serine이 threonine (Ser3 Thr) 으로치환된 S. Paratyphi B 균주를제외하고, 균주에서 는 7번째 aspartic acid에서변이가관찰되었으며, S. 3균주에서는 leucine (Asp7 Leu) 으로, S. 9균주, 균주에서는각각 tyrosine (Asp7 Tyr), glycine (Asp7 Gly) 으로치환되어있었다 (Table 3). 하지만, 모든 NAL 내성균주에서 parc 유전자의변이는확인되지않았다. 5. 살모넬라속균주들간유전학적연관성분석살모넬라속균 3주들이역학적으로관련이있는지알아보기위하여 PFGE를수행하였다. 혈청형별로 XbaI-PFGE 유형을분 Fig.. Clustering of XbaI digested PFGE patterns for Salmonella spp..
Oh-Geun Kweon, et al. : Characterization of Salmonella spp. in Gyeongbuk 55 석한결과, S. 7주, S. 6주 ( 각 주 ), S. Paratyphi B 주가 % 의유연관계를보였다 (Fig. ). S. 3주에서는총 6개 PFGE 유형이확인되었고, 유형간유사도는 9.3% 였다. 국내펄스넷코리아의 S. PFGE Data Base 자료와비교한결과, SEGX.3형 (7주, 53.%) 이주요유형으로확인되었고, 균주 (5.%) 는 SEGX.9 유형으로국내에서는처음으로확인되었다. S. 주는 5개 PFGE 유형으로 SPXX.96, SPXX., SPXX.7 이각각 균주씩이확인되었고균주간연관관계는 97.3-56.9% 였으며, 이중 SPXX.96은국내에서처음으로확인된유형이다. S. Paratyphi B는 주모두 SKYX.3 유형으로확인되었고 S. Bardo, S. Infantis, S. Sandiego, S. Senftenberg, S. Stanley, S. Thomson, S. Typhi의다른혈청형에대해서도유전학적정보를확보하였다. ESBL을생산하는 S. 3균주의 PFGE유형은 SEGX., SEGX.와 SEGX.9 로각각다르게나타났다. DISCUSSION 일반적으로살모넬라속균감염질환에는항균제를사용한치료를하고있지는않지만합병증이의심되는영ㆍ유아와노인, 면역억제제치료중인환자등의경우에는 quinolone계나 3세대 cephalosporin계항균제등을 차치료제로사용하고있다 [7]. 그러나최근국내외에서는이계열항균제들에대해내성을보이는살모넬라속균이지속적으로보고되고있는실정이며특히, 국내살모넬라균에대한내성경향에대한보고에따르면 년을기점으로 AMP나 NA를중심으로다양한종류의항균제에대한내성이급격하게증가하고있는것으로확인되고있다 [,9]. 이러한항균제내성의확산을방지하기위해서는특정항균제에어떤내성기전이관여하고있는지를확인하고어떤경로를통해서전파되는지를알아보는것에대한조사연구가필수적으로요구된다. 년부터 3년까지경북지역에서분리된설사원인병원체가운데 6.% 가살모넬라속균으로가장많이차지하는것으로확인되었고혈청형별분석결과, 가전체 3주로가장많았고 이 주, ParatyphiB가 주를차지하고있었으며 Bardoo, Infantis, Sandiego, Senftenberg, Stanley, Tompson, Typhi 각각 주씩이확인되었다. 우리나라에서분리된살모넬라균의 AMP 내성률은전국평균.6% 수준으로보고되고있고대부분의지역들이유사한수준을보이고있었으나경북지역에서는내성률이 6% 정도로확인되었고 CTX와 NA에대한내성률역시전국평균이각 9.5% 와 3.% 인데비해 3.3% 와 56.7% 로확인되어전체적으로경북지역살모넬라속균분리주가항균제에대한내성률이다소높은것으로판단되었다. CTX에내성을보이는살모넬라속균 주는모두 ESBL을생산하는것으로확인되었다. Colom 등 [] 과 Melano 등 [] 의연구를비롯한최근관련연구에서는 ESBL 생산주들은대부분하나의균주에여러종류의 bla 유전자를보유하는것으로보고되고있었으나이번경북지역에서확인된 ESBL 생산살모넬라속균은 S. 3개분리주가 bla CTX-M-5 유전자를 S. Infantis 개분리주가 bla CTX-M-7 유전자한개만을가지고있어최근유행하고있는 ESBL 생산주들과는조금다른양상을보였다 [,]. ESBL 생산균주는다양한 replicon 유형의 plasmid 에 bla 유전자를보유하고이것을통해내성유전자를전달하는것으로보고되고있으며우리나라에서도사람과닭에서분리된살모넬라속균분리주들가운데 bla CTX-M-5 또는 bla CTX-M- 유전자를가진 IncFII와 IncI replicon 유형의 plasmid가보고된바있다 [,3]. 본연구에서도 ESBL을생산하는 S. 와 S. Infantis 3주가 IncFII 유형의 plasmid에 bla 유전자를포함한것으로확인했고 S. 주에서도 IncHI replicon 유형의 plasmid에 bla 유전자가존재하는것으로확인하였다. 이결과를통해서도기존에다양한연구와마찬가지로 ESBL을암호화하는내성유전자가 plasmid에의해매개되어세균간수평적전달에의해쉽게 ESBL 생산능력이전파될수있을것으로예상할수있었다. 경북지역에서분리된 3주의살모넬라속균중 7주는 NA에 -<μg/ml 내성범위로확인되었다. 항균제에대한내성의원인을확인하기위해일차원적인원인이되는것으로알려진세균의 DNA gyrase를암호화하는 gyra 유전자와 topoisomeraseiv를암호화하는 parc 유전자의변이여부를확인하였다. 그결과, 내성이확인된모든분리주중 ParatyphiB 주가 gyra 유전자의 QRDR 부위의 3번아미노산잔기에변이가있는것을제외하고모두 7번아미노산잔기에변이가확인되었다. 선별된 7주들의 MIC값범위 (ciprofloxacin, - μg/ml) 로보면 gyra 유전자에서이위치의변이외에는 quinolone계항균제에대한내성에다른내성기전이관여하지않을것으로추정되었다 []. 본연구에서는항균제내성기전을공유하는균들외에도 년간경북지역에서분리된살모넬라속균 3주를대상으로 PFGE 시험법을이용하여균종간유전학적연관성을확인해보고자하였다. 살모넬라속균의 PFGE 유형은그혈청형별로분석하게되는데 S. 의경우 3주사이에서 6개의 PFGE 유형이확인되었고그중 7균주가 SEGX.3유형으로펄스넷코리아의 S. PFGE Data Base 에서가장많이확인되는유형이었으나 SEGX.9 유형은국내에서는처음으로확인된유형으로펄스넷코리아 S. PFGE Data Base에새롭게등록되었다. 그러나경북지역 S. 분리주들간의 PFGE 유형의연관관계는 9.6-96.97% 로높게나타나, 이를근거로봤을때는 3주의유전학적근원은유사한것
56 Ann Clin Microbiol ;7():5-57 으로볼수있었다. S. 의경우에도펄스넷코리아 S. PFGE Data Base 에서처음으로 SPXX.96 유형이확인되긴했으나 주사이의연관관계가 59.63-97.3% 로매우낮게나타났으며또, 항균제의내성경향의차이도다양해유적학적근원이유사하다고는볼수없었다. 년동안경북지역에서분리된살모넬라균속의특성에대한연구를통하여주요항균제에대한내성기전이나분리균주들간의유전학적연관성을확인한사실은시사하는바가크다. 이결과는살모넬라속균이외에경북지역에서분리된설사원인병원체에서도이지역만의다양한특성의존재가가능함을의미하기때문이다. 특히, 이들의항균제내성기전이 EHEC와같은병원성이강한병원체나이질균과같이전파속도가빠른병원체로전달될경우, 경북지역의공중보건에있어심각한위협이될수있으므로이에대한집중적인감시및관리가필요하다고판단된다. REFERENCES. Khakhria R, Woodward D, Johnson WM, Poppe C. Salmonella isolated from humans, animals and other sources in Canada, 93-9. Epidemiol Infect 997;9:5-3.. Jones TF, Ingram LA, Cieslak PR, Vugia DJ, Tobin-D'Angelo M, Hurd S, et al. Salmonellosis outcomes differ substantially by serotype. J Infect Dis ;9:9-. 3. Mermin J, Hutwagner L, Vugia D, Shallow S, Daily P, Bender J, et al; Emerging Infections Program FoodNet Working Group. Reptiles, amphibians, and human Salmonella infection: a populationbased, case-control study. Clin Infect Dis ;3 Suppl 3: S53-6.. 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Oh-Geun Kweon, et al. : Characterization of Salmonella spp. in Gyeongbuk 57 = 국문초록 = 경북지역설사환자에서분리된 Salmonella 균의특성분석 경상북도보건환경연구원미생물과, 질병관리본부국립보건연구원수인성질환과권오근, 김진석, 김규옥, 이창일, 정광현, 김준영 배경 : 최근국내외서는 3세대세팔로스포린계와퀴놀론계항균제내성을갖는살모넬라속균에대한보고가증가하고있다. 이와관련하여본연구에서는경북지역설사환자에서분리된살모넬라속균을대상으로하여항균제내성경향을확인하고주요항균제에대한내성주를선별하여원인을하고자했으며추가로이지역에서분리된살모넬라속균의유전학적연관성을확인하고자했다. 방법 : 년부터 3년까지경북지역설사환자에서분리된살모넬라속균을대상으로혈청형확인을확인하고 Sensititre 패널을이용하여최소억제농도 (MIC) 값을측정한후 WHONet 프로그램을이용하여항균제내성경향을분석하였다. 이결과를토대로확인된주요항균제에대해내성을보이는균주는선별하여그내성원인기전을확인하였다. 추가로경북지역에서분리된모든살모넬라속균은 pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) 를이용하여균주간유전학적연관성을확인하였다. 결과 : 경북지역에서설사환자에서분리된살모넬라속균 3주는 개의혈청형으로확인되었다. 이중 주가 개이상항균제에내성을보였고 주가 extended spectrum beta lactamase (ESBL) 을생산하였으며 7주가퀴놀론계항균제내성주로확인되었다. ESBL 생산살모넬라속균은 S. 3주에서 CTX-M-5형 ESBL을생산하였고 S. Infantis 주가 CTX-M-7형 ESBL을생산하는것으로확인되었으며 IncFII (bla CTX-M-5, bla CTX-M-7) 과 IncHI (bla CTX-M-5) replicon 유형의 plasmid에 bla 유전자를보유하고있었다. 7개의퀴놀론계항균제에내성인균주는 S. Paratyphi 주가 gyra 유전자의 3번아미노산잔기에변이가있는것을제외하고모두 7번아미노산잔기에변이가확인되었다. 경북지역에서분리된살모넬라속균을대상으로혈청형별로 PFGE 분석한결과, S. 3주는연관관계가 9.6-96.97% 로유전학적근원이유사한것으로확인되었으나 S. 은 59.63-97.3% 로비교적낮은연관성을갖는것으로확인되었다. 결론 : 설사환자에서분리된주요항균제에대해내성을보이는살모넬라속균들은경북지역외에도국내공중보건에심각한위협이될수있을것으로추정되며향후이에대한집중적인감시및관리가필요할것으로판단된다. [Ann Clin Microbiol ;7:5-57] 교신저자 : 김준영, 363-7, 충북청원군오송읍오송생명 로 7 질병관리본부국립보건연구원감염병센터수인성질환과 Tel: 3-79-, Fax: 3-79-9 E-mail: jun9@hanmail.net