목 차 Ⅰ. 연구개발결과요약문 1 Ⅱ. 총괄연구개발과제연구결과 3 제1장총괄연구개발과제의최종연구개발목표 3 제1절연구개발과제의목표 3 제2절연구개발과제의목표달성도 3 제3절국내 외기술개발현황 4 제2장총괄연구개발과제의최종연구개발내용및방법 7 제1절연구내용 7 제2절연구

Transcription

1 축산항생제내성및항생제사용실태조사 Monitoring of antimicrobial resistance on the food-animals and meats 2007 주관연구기관 : 국립수의과학검역원 식품의약품안전청

2 목 차 Ⅰ. 연구개발결과요약문 1 Ⅱ. 총괄연구개발과제연구결과 3 제1장총괄연구개발과제의최종연구개발목표 3 제1절연구개발과제의목표 3 제2절연구개발과제의목표달성도 3 제3절국내 외기술개발현황 4 제2장총괄연구개발과제의최종연구개발내용및방법 7 제1절연구내용 7 제2절연구방법 7 1. 동물용 ( 축산용및수산용 ) 항생제사용실태조사 7 2. 동물및축산물유래항생제내성균분포조사 7 제3장연구개발과제의최종연구개발결과 13 제1절동물용 ( 축산및수산용 ) 항생제사용실태조사 13 제2절동물및축산물유래항생제내성균분포조사 균분리및동정 항생제내성균분포도조사 34 가. 동물분변에서분리된세균에대한항생제내성조사 34 나. 축산물에서분리된세균에대한항생제내성조사 61 제4장연구개발과제의연구결과고찰및결론 83 제5장참고문헌 87

3 연구결과보고서요약문 과제명축산항생제내성및항생제사용실태조사 중심단어 동물, 축산물, 항생제, 내성, 모니터링 주관연구기관국립수의과학검역원주관연구책임자정석찬 연구기간 최근다제내성균및슈퍼박테리아증가문제는사람및가축에서적절한치료제부재를초래하여국민의생명을위협하는사회적인문제로대두되고있다. 이러한내성균에대한대책으로선진국에서는국가차원의항생제내성균모니터링시스템이운영되고있으며, 국내에서도 2003년부터축산용항생제관리시스템을구축하여동물에서의항생제사용량및내성균분포도를조사하여국가의항생제내성관련정책수행에반영하고있다. 본과제에서수행한 2007년연구결과를요약하면다음과같다. 1. 동물용 ( 축산용및수산용 ) 항생제사용실태조사 2001년이후축산용항생 ( 항균 ) 제의용도별 ( 사료첨가용, 수의사진료용, 자가치료및예방용 ), 축종별 ( 소, 돼지, 닭, 수산용 ) 및종류별판매실적을조사한결과, 2003년까지는배합사료첨가용이약 54% 로가장높고, 자가치료및예방용, 수의사진료용순으로많이사용하고있는것으로나타났으나, 2004년이후에는자가치료및예방용이약 50% 이상을차지하였다. 축종별항생제사용량은돼지, 닭, 수산용, 소순으로많았으며, 전체항생제사용량은 2001년 1,595톤, 2002년 1,541톤이었으며, 2003년도는 1,439톤, 2004년 1,368톤, 2005년 1,553톤, 2006년도 1,457톤, 2007년 9월까지는약 989톤으로조사되었다. 2. 항생제내성균분포조사 2007년 4월부터 10월까지 65개농장에서 671 분변시료 ( 소, 돼지, 닭 ) 를채취하여 E. coli 529 주, E. faecium/e. faecalis 351주, Salmonella spp. 35주를분리하였다. 분리세균에대한항생제감수성검사결과소, 돼지, 닭분변유래대장균은 tetracycline에가장높은내성율을나타내었으며, 닭유래의 E. coli는 Quinolone계항생제인 ciprofloxacin에약 37% 이상의내성율을나타내었다. 그러나동물분변에서 VRSA, VRE 등의내성균은검출되지않았다. 축산물에서항생제내성율을조사하기위해전국 70개도축장에서 615 시료 ( 소고기, 돼지고기, 닭고기 ) 를채취하여 E. coli 215주, S. aureus 148주, E. faecium/e. faecalis 403주를분리하였다. 분리세균에대한항생제감수성검사결과축산물에서분리된대장균은돼지고기를제외하고 tetracycline에가장높은내성율을나타내었으며, 닭도체에서분리된 E. coli는 Quinolone계항생제에약 80% 이상의비교적높은내성율을나타내었으며, vana type VRE가 1주분리되었다

4 Summary Title of Project Monitoring of antimicrobial resistance on the food-animals and meats Key Words Animals, Meats, Antimicrobials, Resistance, Monitoring Institute National Veterinary Research & Quarantine Service Project Period Project Leader Jung Suk-Chan Pathogens resistant to various antimicrobial agents have emerged as a major concern of human and veterinary medicine. To tackle the problem of development and spread of resistance, reliable data on the rates of changes in the susceptibility to specific antimicrobials of bacteria isolated from both humans and animals should be available. In this context, investigations into the actual amount of antimicrobial consumption in livestock and antibiotic resistance of bacteria isolated from food producing animals and food products were conducted. 1. Surveillance on the usage of antimicrobials The sale rate of antimicrobials in the group of purpose was highest in feed additives, and followed others and hospital field in order until 2003 but hospital field was highest from The volume of antimicrobials sold in the species of animals was the largest in pigs, poultry, fishes and cattle in order. And the amount of antimicrobials sold was showing decreased slightly since that was 1,595 ton in 2001, 1,541 ton in 2002, 1,438 ton in 2003, 1,368 ton in 2004,1,474 ton in 2005, 1,457 ton in 2006 and 989 tone in Sept Monitoring of antimicrobial resistance in animals and livestock products. A total of 615 carcasses samples from 70 slaughters and 671 fecal samples from 65 farms were collected for the monitoring of antimicrobial resistance from April to October, Monitoring of antimicrobial resistance in animals Five hundred twenty-nine strains of E. coli, 35 strains of Salmonella spp., and 351 strains of E. faecium/ faecalis were isolated from 478 feces of animals in 52 farms. The antibiotic resistant rate of the isolates from animals was high to tetracycline. The E. coli isolated from chicken was higher resistant(about 37%) to ciprofloxacin. No strain of MRSA, VRSA and VRE was isolated from animal. Monitoring of antimicrobial resistance in livestock products Two hundred fifteen strains of E. coli, 403 strains of E. faecium/faecalis, and 148 strains of Staph. aureus were isolated from 615 carcasses in 70 slaughters. As the result in animals, the resistant rate of all bacteria was high to tetracycline and E. coli from from poultry meat showed over 80% to ciprofloxacin. VanA type VRE was isolated from poultry meat

5 총괄연구개발과제연구결과 제 1 장총괄연구개발과제의최종연구개발목표 1 절총괄연구개발과제의목표 국내축산용 ( 동물및수산용 ) 항생제의사용실태조사및축산물유래항생제내성균조사등으로축산분야의항생제관리시스템구축 축산분야의종합적인항생제내성관리대책수립및항생제내성균으로부터안전한축산물생산 공급 2 절총괄연구개발과제의목표달성도 축산분야에서의약제내성조사는지금까지는산발적이고지역적으로질병의치료제선발목적의특정병원성세균만을대상으로한경우가많았으나이번의항생제내성균모니터링조사에서는동물에서유래하는지표세균이나식품매개성병원세균을대상으로하는광범위하고체계적인약제내성세균에대한모니터링을수행함으로써동물에사용하는치료용항균제의유효성을추적하는데크게기여하여목표달성한것으로판된되며, 항균제가바로약제내성균의출현을야기하는것은아니지만항균제의사용량이증가함에따라내성균의출현이상대적으로높아지기때문에간접적으로항생제내성균의증가에관계하고있다. 따라서항생제내성균대책으로서는내성균의조사와동시에항균제의사용량과사용실태를좀더정확히파악하는것이선결과제이므로, 본사업의국내항생제사용실태조사는우리나라의축산용항생제관리시스템구축측면에서또다른하나의목적달성의계기가된것으로평가된다

6 3 절국내 외기술개발현황 1. 국외연구동향 1940년대에 penicillin이현대적인개념의항균제로서처음으로임상에사용된이후얼마되지않아 penicillin에내성을가진포도상구균이등장하였고, 1960년대에들어 methicillin이개발되어사용되어왔으나 MRSA(methicillin-resistant Staphylococcus aureus) 가출현하기시작하여또다른문제를야기하였으며, 급기야는 1996년에일본에서 vancomycin 내성포도상구균이출현하여항생제내성문제는전세계적인문제로대두되었다. 한편 vancomycin은 1956년처음개발된 glycopeptide제제로서현재까지도거의모든그람양성균에항균력을보인다. 그러나 MRSA의등장과함께그사용량이현저히증가하였고, VRE(vancomycin-resistant enterococci) 는 1986년유럽지역에서처음분리보고된이후주로외과수술후병원내감염균으로중요한의미를가지고있다. 국내임상환자에서 VRE 검출율은 0.5%('99) 에서 23.7%(2000) 로증가하는추세에있으며, 국내가축에서의 VRE 분리사항은약 2.58% 로서영국 ( 약 50%) 보다낮다. 그러나국내동물에서분리된 VRE와사람환자에서분리된 VRE를유전적분석결과동물과의상관성은아직확인되지않고있다. 일본에서의수입닭고기로부터 VRE 분리현황 ( 년조사 ) 은태국 21%, 프랑스 50%, 브라질 9% 임을보고 ( 일본 Gunma 의과대학 Yasuyoshi Ike) 한바있고프랑스와태국은 1997년및 1998년부터아보파신사용중지하였으며, 중국의닭고기에서는 VRE가검출된바없었다 ( 중국은아보파신을사용하지않음 ). 또한미국에서 1996년 ~ 1997년에보고된 quinolone 내성 Campylobacter는대부분이다른나라여행중에감염된것으로서유럽에서미국으로여행자에의해전염된것으로추정되고있으며, 유럽에서는 avoparcin을가축사료에첨가함으로써 vancomycin 내성인장구균이증가하여이러한내성균이가축과함께다른나라로전파될가능성이있다고보고있다. 그리고 Salmonella Typhimurium DT104는 ACSSuT(Ampicillin, Chloramphenicol, Streptomycin, Sulphamethoxazole 및 Tetracycline) 에내성을나타내는균으로 1984년영국에서처음보고되었고, 외국에서는가축에서소, 돼지및닭에서많이보고되고있고, 1996년미국의살모넬라감염증환자분리균의 32% 가 DT104이었다. 또한외국에서는항생제에대한축산농장내 control program운영으로내성균전파방지와사람에서문제시되고있는내성균과동물유래내성균과의표현형, 유전형등의특성비교분석과내성균의주요전파기전인 conjugative plasmid나 transposon등에대한연구가활발히진행되고 - 4 -

7 있다. 동물에서의 VRE 출현과사람의 VRE 감염과의관계에대한과학적근거는아직확실히밝혀지지않았으나 EU에서는위해평가이전에사전예방조치로서 1997년부터가축에서의아보파신등사용을금지조치 ( 영국 Robin Bywater) 한바있다. 유럽등선진국에서는항생제사용규제가강화되고있는실정이다. 특히사람에서사용되는약제및동일계열의항생제는가축에서사료첨가용으로의사용을금지하는추세로서우리나라에서도유사한조치를취하고있다. 항생제내성안전관리를위해서는과학적이고체계적인조사에근거한전체적인실태파악이선행되어야하며, 이러한이유로서이미미국등선진국가에서는국가적인차원에서의항생제내성모니터링사업을실시하고있으며, 미국 FDA에서는21세기공공보건에가장큰위협을끼치는항생제내성세균의출현문제를다루기위해이미 1996년부터체계화된연구를실시하고있는등전세계적으로항생제내성문제에대처하고있으며, 향후국내에서도내성균문제는소비자안전뿐만아니라국민건강을위협하는심각한상황으로발전할가능성을지니고있다. 미국 FDA는또한항생제내성세균의출현문제를다루기위해 Task Force on Antimicrobial Resistance라는특별위원회를설치운영하고있으며, NARMS(National Antimicrobial Resistance Monitoring System) 을구축하여인간과동물의장내박테리아가 17개의항생제에대한감수성및변화조사를실시하고한편으로 SCOPE(Surveillance and Control of Pathogenes of Epidemiologic importance) 프로그램을통해각지역의감염율, 감염경로, 항생제사용패턴등을분석하고이로인해감염균및내성균전파방지등에기여하고있다. 2007년 5월코펜하겐에서개최된 WHO 전문가회의에서는사람에서사용하는항생제의중요도에따라 CIA(critically important antimicrobials), HIA(highly important), IA(important antimicrobials) 로분류하였으며, 특히 CIA로분류된항생제중 quinolones, macrolides, 제3,4세대 cephalosporins계항생제에대해서는비임상에서이들항생제사용으로인한사람에서내성발현억제를위해위험관리전략수립등을권고하고있다. 2007년 10월서울에서개최된제1차 codex 항생제내성특별위원회에서는식품유래항생제내성균에대한위해평가지침개발, 위해관리지침개발, 위해프로파일설정등에대한특별위원회신규작업선정과기준설정등에대한토의가있었으며, 향후식품유래항생제내성균에대한위해평가, 위해관리등에대한국제적인지침이마련될것으로사료된다. 2. 국내연구동향 국내한국소비자보호원에서는 동안서울과수도권일대백화점, 할인점등 대형유통매장에서판매되는육류, 야채류, 가공식품등 18 품목 212 종을대상으로대장균군및식 - 5 -

8 중독균을분리하여항생제내성을조사한결과 4종이상의항생제에내성을가진다제내성균의비율이 12% 로높은분포를나타내었고, 식품의품목간에차이없이높은내성률을보였으며, 식품의 62.7% 에서대장균군이검출되었고이중약 93% 의균이항생제내성을나타내었으며, 식중독균에대한항생제내성률은살모넬라균 94.4%, 황색포도상구균 94.8%, 리스테리아균 55.9%, 비브리오균 100% 로항생제내성수준이높은것으로보고하고, 항생제내성균문제의해결을위한관련부처간긴밀한협조아래체계적인대책수립을건의및그개선사항을요청한바있다. 이에식품의약품안전청주관으로 2003년부터 국가항생제내성안전관리사업 을실시하고있으며, 국립수의과학검역원의 2003년부터 2006년까지 4년간의조사에서대장균및살모넬라의경우 17종의항생제를대상으로한결과시료 ( 분변, 축산물 ) 에관계없이 tetracycline에높은내성율을나타내었으며, 소를제외하고는 80% 이상의내성율을나타내었다. 그리고닭유래의대장균은소, 돼지유래분리균과달리 quinolone계에 40% 이상의내성율을나타내었다. 황색포도상구균 (8종의항생제 ) 및장구균 (10종의항생제 ) 도축종에관계없이 tetracycline에가장높은내성율을나타내었다. 인체병원에서사회적으로문제시되고있는 MRSA는 '06년에소도체에서 2주, 그리고 VRE는 05년닭도체에서 1주가분리되었으며, ACSSuT내성인 Salmonella Typhimurium DT104 등의내성균은검출되지않은것으로나타났다. 우리나라에서는항생제를안전하게사용하도록하기위하여 배합사료제조용동물용의약품첨가사용기준 ( 검역원고시제 호 ' ), 동물용의약품안전사용기준( 검역원고시제 호 ' ) 등을정하여운용하고있으며아울러배합사료제조용동물용의약품에대하여아보파신 ('97.2) 및스피라마이신, 아프리노시드, 올라퀸독스 ('02.1) 등 4개품목은사용금지조치한바있고, 또한안전성및교차내성가능성이있는항생제플루벤다졸, 스펙티노마이신등 2개품목은배합사료제조용으로사용금지조치 ('03.1) 하였으며, 배합사료제조용으로사용가능항생제를 54종에서 25종으로감축하였다 ( 05.5). 최근국내닭고기에서시프로플록사신 -내성캠필로박터균이문제가되고있어퀴놀론계항생제중사람과동물에서함께사용하고있는노플록사신, 시프로플록사신, 오플록사신, 페플록사신에대해서는국내제조 사용을금지조치하였다 ( ). 또한현재 25종의배합사료제조용의약품중가축에서내성율이높거나임상에서사용하고있는항생제와동일제제인 oxytetracycline, chlortetracycline, penicillin, colistin, bacitracin, lincomycin, neomycin 등 7종에대해서는 2009년 1월 1일부터추가로사용을금지조치할예정이다

9 제2장총괄연구개발과제의최종연구개발내용및방법제1절연구내용 1. 동물용 ( 축산및수산용 ) 항생제사용실태조사 항생제의종류별, 용도별 ( 추정치 ) 및축종별 ( 추정치 ) 사용실태조사 2. 동물및축산물유래항생제내성균분포조사 가. 조사대상 : 농장및도축장나. 대상시료 : 소, 돼지, 닭의분변및도체총 1,286시료 조사시료수 : 65개농장 671 분변시료, 70개도축장 615 도체시료다. 대상미생물 : Enterococcus spp.(e. faecium, E. faecalis), E. coli, Salmonella spp., S. aureus( 축산물 ), Campylobacter coli/jejuni( 닭분변, 닭도체 ) 등라. 항생제감수성시험 (1) Ampicillin 등 26종항생제 (2) 항생제디스크 Quality control 표준균주 : E. coli ATCC25922, Staph. aureus ATCC25923, E. faecalis ATCC29212, C. jejuni ATCC33560 제 2 절연구방법 1. 동물용항생제 ( 축산용및수산용 ) 사용실태조사 가. 조사대상항생제 : 국내에서축산및수산용으로사용되고있는모든항생제나. 항생제종류별판매실적조사다. 용도별 ( 사료첨가용, 수의사진료용, 자가치료 예방용등 ) 및축종별 ( 소, 돼지, 닭, 수산용 ) 조사 ( 추정치 ) 2. 동물및축산물유래항생제내성균분포조사 가. 공시시료 2007 년 4 월부터 10 월까지동물유래항생제내성균분포도조사를위하여소, 돼지, 닭 의농장에서분변과도축장에서의도체표면에서의시료채취내역은 Table 1 과같다. 농장에서의 분변시료채취는소의경우경기도, 강원도, 충청도, 전라도, 경상도, 제주도등 6개지역 21개농장에서 210개시료를채취하였고, 돼지는경기도, 충청도, 전라도, 경상도, 제주도등 5개지역 24개농장에서 261 시료, 닭은경기도, 충청도, 전라도, 경상도, 제주도등 4개지역 20개농장에서 200시료를채취하여균분리를실시하였다

10 도축장에서도체표면에대한시료채취는소의경우경기도, 강원도, 충청도, 전라도, 경상도, 제주도등 6개지역 25개도축장에서 220시료, 돼지는경기도, 강원도, 충청도, 전라도, 경상도, 제주도등 6개지역 24개도축장에서 210시료를그리고닭은경기도, 강원도, 충청도, 전라도, 경상도, 제주도등등 6개지역 21개도계장에서 185시료를채취하여균분리를시도하였다 (Table 1). Table 1. 농장및도축장으로부터시료채취현황 동 물 축 산 물 구분 경기도강원도충청도전라도경상도제주도계 농장 ( 도축장 ) 시료수 농장 ( 도축장 ) 시료수 농장 ( 도축장 ) 시료수 농장 ( 도축장 ) 시료수 농장 ( 도축장 ) 시료수 농장 ( 도축장 ) 시료수 농장 ( 도축장 ) 시료수 소 돼지 닭 소계 소 돼지 닭 소계 계 ,286 나. 미생물분리및동정동물및축산물로부터미생물의분리방법은 AOAC, 축산물의가공기준및성분규격 ( 국립수의과학검역원고시제2005-2호 : ) 등의방법에따라수행하였다. 증균또는직접배양후선택배지에서대상균종별로목적하는의심집락 3 5개를취한후생화학적시험으로확인하고, 동정된균종별로각 1개균주에대하여항생제감수성시험을실시하였다. 분리된세균은생화학적시험과 API 킷트또는 Vitek system 등을이용하여최종확인하였고, 또한 Salmonella spp. 등은표준항혈청을이용하여혈청형을동정하였다. 가. Salmonella spp. (1) 증균배양 : Buffered Peptone Water (CM509) 225ml에시료 25g( 또는ml ) 를넣어균질화후 37 에서 16 20시간배양하였다. (2) 선택배양 : 증균액 0.1ml를 10ml의 Rappaport-Vassiliadis R10 Broth (CM669) 에접중후 4 2 에서 18 24시간배양하였다 ( 양성일경우파란색에서무색또는옅은초록색으로변한다 )

11 (3) 분리배양 : Rambach(Merck) agar또는 Salmonella Chromogenic Medium (CM1007+ SR194) 등의배지에도말한후 37 에서 18 24시간배양하였다. 나. E. coli (1) 증균배양 : 시료 1g( ml ) 을 EC broth (CM853) 또는 BGLB broth 9ml에접종하여 44.5 에서 24 48시간동안증균배양한하였고, 분변시료의경우는증균과정없이직접분리배양하였다 (2) 분리배양 : MacConkey agar, Chromogenic E. coli/coliform medium (CM956) 또는 3M petrifilm 등에서 37, 18 24시간배양하였다. MacConkey agar에서붉은벽돌색집락, Chromogenic E. coli배지에서는보라색집락또는 3M petrifilm 배지에서는초록의가스환집락을 EMB agar에도말한후 35, 24시간배양한다음에금속성광택집락을분리하였다다. Staphylococcus aureus (1) 증균배양 : 10% NaCl을첨가한 Tryptic soy broth, Brain heart infusion broth 또는 Staphylococcus enrichment broth(merk) 에서 37, 16시간배양하였다. (2) 분리배양 : 배양액 50μl를 Baird Parker+RPF(bio Merieux사 )/ 또는 Baird Parker Medium (CM275 + SR54), Mannitol salt agar with egg york에접종후 37, 16시간배양하였다. (3) 전형적인집락을선택해서 Blood agar에접종후 35, 16시간배양하였고, β -hemolysis 현상이일어나는균을 Brain heart infusion agar 또는 Nutrient agar에접종하여 37, 16시간배양함과동시에 coagulase test를실시하였다. 라. Enterococcus spp. (1) 증균배양 : 시료 1ml (g) 을 SF broth(difco ), 또는 6.5% NaCl 함유된 Azide Dextrose broth(merck Cat ) 9ml에접종하여 37 에서 18 24시간증균배양하였다. (2) 분리배양 : 증균배양액을 Enterococcosel agar 또는 KF streptococcus agar에도말하여 3 7 에서 18 24시간배양하였다. 분변시료는증균배양없이직접 Enterococcosel agar에도말하여배양하였다. 또한 VRE를분리하기위하여 Vancomycin(6μg / ml ) 이첨가된 Enterococcosel agar에접종하여분리를실시하였다. (3) Enterococcosel agar에서검은색 (KF streptococcus agar에서는붉은색 ) 의집락을 3-5개선별하여 Brain heart infusion agar 또는 Tryptic soy agar(tsa) 에 37, 18 24시간순수분리배양하고, 그람염색양성및 catalase 음성으로확인또는 PCR법으로확인하였다. 마. Campylobacter jejuni/coli (1) 증균배양 : 검체 25g( 또는ml ) 를 Hunt enrichment broth (Lab/RD/ SR208 + SR48) 또는 Bolton selective enrichment broth(oxoid CM0983) 225ml에넣고균질화한다음 37, 4시간배양후 42, 24 48시간배양하였다. (2) 분리배양 : Campylobacter agar(cm689 + SR155) 또는 Campylobacter blood free - 9 -

12 selective agar(oxoid CMo739) 에서 42, 미호기적조건에서 48 시간배양하였다. 분리배양조건은미호기조건이가능한 Chamber/or Anaerobic Jar (AG25) 나 Campylobacter 가스팩 (Campygen (CN25)) 을이용하였다 3. 분리미생물에대한항생제감수성시험 가. 항생제감수성시험에사용한종류동물및축산물로부터분리한세균에대한균종별검사항생제종류는 Table 2, 3과같다. 항생제감수성시험은지표세균인대장균과장구균, 그리고살모넬라균은 MIC 방법으로수행하였다. 대장균, 살모넬라균, 장구균의 MIC는 96well plate에항생제를농도별로 coating하여제작의뢰하여 (Trek, UK) broth dilution 방법으로측정하였으며, 황색포도상구균은디스크확산법으로실시하였다. Table 2. 황색포도상구균의항생제감수성검사에사용한항생제 disc 종류및 breakpoint Antimicrobial agent Disc potency Diffusion zone breakpoint (mm) Cephalothin (CF) 30μg 14 Chloramphenicol(C) 30μg 12 Ciprofloxacin (CIP) 5μg 15 Clindamycin (CC) 2μg 14 Erythromycin (E) 15μg 13 Gentamicin (GM) 10μg 12 Oxacillin (OX) 1μg 10 Penicillin (P) 10unit 28 Streptomycin (S) 10μg 11 Tetracycline (TE) 30μg 14 Trimethoprim/ Sulfamethoxazole(SXT) 1.25/23.75 μg 10 Vancomycin (VA) 30 μg 14 계 12 종

13 Table 3. 대장균, 살모넬라균, 장구균의 MIC 검사에사용한항생제종류및 breakpoint Antimicrobial agent Amoxicillin / clavulanic acid 2:1 (AmC) E. coli/salmonella spp. E. faecium/e. faecalis Test range Breakpoint ( μg / ml ) Test range Breakpoint ( μg / ml ) 2/1-64/32 32/ Ampicillin (AM) Avilamycin (AVL) Bacitracin (B) Cefazolin (CZ) Ceftiofur (XNL) Cephalothin (CF) Ciprofloxacin (CIP) Chloramphenicol (C) Colistin (CL) Erythromycin (E) Florfenicol (FFC) Gentamicin (GM) , Lincomycin (LIN) Linezolid (LNZ) Nalidixic Acid (NA) Neomycin (N) Quinupristin/Dalfopristin (SYN) Salinomycin (SAL) Streptomycin (S) ,048 1,000 Tetracycline (TE) Trimethoprim / sulfamethoxazole (SXT) 0.12/2.38-4/76 4/ Tylosin (TYL) Vancomycin (VA) Virginiamycin (VIR) 계 15 종 16 종

14 나. 디스크확산법 (Disc diffusion method) 1) 감수성시험대상균주를 Mueller Hinton Broth에 35, 2-6시간동안배양하여균농도를 McFarland No. 0.5로조정한후, 멸균면봉을이용하여 MHA배지에도포하였다. 균을희석한후 15분이내에접종하였으며, 균접종시페트리디쉬를 60 로회전하면서 3회도포하였다. (2) 평판을 3 5분간말리고 15분이내에항생제 Disc를 dispenser로접종하였다. (3) 35 에서 16 18시간배양후균억제대 (inhibition zone) 의크기를관찰하여내성여부를판정하였다. 다만, Vancomycin, Oxacillin의경우는 24시간배양후내성여부를판정하였다. (4) 균억제대 (mm) 는억제대측정기기 (Zone reader, BIOMIC VISION SYSTE, GILES SCIENTIFIC INC, 미국 ) 로측정하였으며, 감수성범위는 CLSI의기준에따라판정하다. 다. 최소억제발육농도 (MIC) 검사법대장균, 살모넬라균, 장구균 (E. faecium/e. faecalis) 는 broth dilution 방법을이용하여 MIC를측정하였으며항생제가농도별로 coating된 sensititre plate(trek Diagnostic system, UK) 를이용하였다. (1) 검사하고자하는분리균주는 TSA 또는 BHI agar에 37 에서 16 18시간배양후배양하였다. (2) 배양균은멸균증류수 4ml에 McFarland No. 0.5가되도록조정한다. 조정한균액 10μl를 11ml의 Mueller-Hinton broth + TES(Sensititre) 에접종하였다. (3) 11ml의 Mueller-Hinton broth + TES을자동분주기 (Autoinoculator, Trek) 를이용하여 50μl씩접종하였다 (4) 접종한 plate는실링 (sealing) 한후 에서 18시간배양하였으며, vancomycin은 24시간배양하였다 (5) MIC는 Auto Reader(Trek,UK) 를이용하여측정하였으며 avilamycin 과 virginiamycin 은육안으로판독하였다. (6) 내성과감수성의 breakpoint 는 CLSI(Clinical Laboratory Standard Institute) 기준에따라판정하였으며, CLSI 에명시되지않는항생제의 breakpoint 는 DANMAP 과 SVARM 에서정한기준에따라판정하였다. 라. 정도관리 (Quality control) 디스크확산법및 MIC 방법에사용한표준균주는 E. coli ATCC25922, E. coli ATCC35218 균주 (β-lactam/β-lactamase inhibitor), S. aureus ATCC25923, E. faecalis ATCC29212 균주를이용하여 CLSI(Clinical Laboratory Standard Institute) 에서규정한표준균주허용범위와비교하였다

15 제3장총괄연구개발과제의최종연구개발결과제1절동물용 ( 축산및수산용 ) 항생제사용실태조사 1. 항생 ( 항균 ) 제사용실태조사가. 조사기준동물용항생 ( 항균 ) 제사용실적은 02년부터 07년 9월까지의판매실적을조사하였으며, 조사기준은다음과같다. (1) 용도별 ( 추정치 ) 1) 사료첨가용 : 제조 수입업체에서사료첨가용으로배합사료공장에판매되는항생 ( 항균 ) 제판매실적 2) 수의사처방 : 제조 수입업체에서동물병원을통해처방에의해판매되거나사용되는항생 ( 항균 ) 제판매실적 3) 자가치료및예방용등 : 제조 수입업체에서도매상, 대리점등을통해판매되는항생 ( 항균 ) 제판매실적 (2) 축종별 ( 추정치 ) : 소, 돼지, 닭, 수산용, 기타 (3) 종류별 : 항생제내성균실태조사대상항생제및항균제종류별판매실적 나. 총괄판매실적연도별총괄항생 ( 항균 ) 제판매실적을살펴보면, 02년도는 1,541톤, 03년도는 1,439톤, 04년도는 1,368톤으로판매실적이조금씩줄어드는추세를보였으며, 05년도는 1,553톤으로다소증가하였다가 06년도는 1,458톤으로약간감소추세를보였고 07.9월까지는 1,162톤으로 06년같은기간의판매실적 1,079톤에비하여다소증가하였다 (Table 4). Table 4. 항생 ( 항균 ) 제판매실적총괄 ( 단위 : kg) 구분 연도별항생제판매실적 (Kg) 2007 년 9 월 2006 년도 2005 년도 2004 년도 2003 년도 2002 년도 항생제 949,897 1,181,901 1,248,965 1,106,004 1,126,911 1,164,917 항균제 212, , , , , ,356 계 1,162,332 1,457,808 1,553,482 1,368,011 1,438,533 1,541,273 자료출처 : 한국동물약품협회

16 다. 용도별판매실적 ( 추정치 ) 용도별항생 ( 항균 ) 제사용량 ( 추정 ) 은배합사료제조용과자가치료 예방용이대부분이며수의사처방용순으로나타났다 (Table 5). 연도별로살펴보면배합사료제조용으로사용되는항생제는 02 년도에 48%, 03년도 47%, 04년도 44%, 05년도 44%, 06년에는 43% 에서 07년 9월에는 39% 로다소감소하는경향을보이고있다. 반면, 자가치료 예방용은 02년도 44%, 03년도 46%, 04년도 49%, 05년도 50%, 06년과 07년 9월에는각각 51% 와 55% 로증가하는경향을나타내었다. 이는배합사료첨가용항생제수가대폭감소 ( 05.4월, 53종 25종 ) 되었고축산물안전성확보를위해배합사료의위생관리가크게강화된것으로판단된다. 수의사처방용의경우, 02년부터 04년까지는 7~8% 였으나, 05년부터는 6% 정도를유지하는것으로나타났다. 위와같이수의사처방용으로판매되는항생제는전체판매량에 10% 에못미치는것으로나타났으나, 이는단순한판매경위조사에의해나타난결과로써동물병원을거치지않더라도시 도시험소, 동물용의약품등제조 수입업체, 도매상, 사료회사및농장등에서근무하고있는수의사의지도에따라사용되는항생제도상당량있을것으로예상되므로실질적인수의사진료에따라사용되는항생 ( 항균 ) 제의량은사용과정에대한직접적인역학조사가필요할것으로사료된다. Table 5. 용도별항생 ( 항균 ) 제판매실적 ( 추정치 ) ( 단위 : kg) 구분 연도별항생제판매실적 (Kg) 2007 년 9 월 2006 년도 2005 년도 2004 년도 2003 년도 2002 년도 배합사료제조용 456, , , , , ,881 수의사처방용 68,142 83,875 94, , , ,174 자가치료및예방용 637, , , , , ,218 계 1,162,332 1,457,808 1,553,482 1,368,011 1,438,533 1,541,273 자료출처 : 한국동물약품협회 라. 축종별판매실적 ( 추정치 ) 축종별항생 ( 항균 ) 제사용량 ( 추정 ) 을살펴보면, 소, 돼지, 닭및수산용등주요사육가축에서의판매량비율은소의경우 02년도부터 07년 9월까지약 7 8% 의항생 ( 항균 ) 제가판매되었으며, 돼지의경우 54 57% ( 07년 9월까지판매실적 ), 닭의경우는 19 24%( 07 년 9월까지판매실적 ), 수산용은 11 18%( 07년 9월까지판매실적 ) 가판매되어예년과유사하게판매된것으로나타났다. 사육가축중돼지에서항생 ( 항균 ) 제가가장많이사용되고닭, 수산용, 소의순이었으며이러한차이는국내축종별사육두수와비례하는것으로보인다 (Table6, 7). 위에서나타난것과같이각축종들의연도별항생 ( 항균 ) 제사용차이는크지않았으나, 앞에서

17 언급한바와같이연도별항생 ( 항균 ) 제판매실적은 02 년도 1,541 톤, 03 년도 1,439 톤, 04 년도 1,368 톤 으로차차감소하고있는추세로나타났으나, 05 년도 1,553 톤다소증가하다가 06 년에는 1,458 톤, 07 년 9 월에는 1,162 톤으로지난해같은기간에비해감소한것으로나타났다. Table 6. 축종별항생 ( 항균 ) 제판매실적 ( 추정치 ) 구분 연도별항생제판매실적 (Kg) 2007 년 9 월 2006 년 2005 년도 2004 년도 2003 년도 2002 년도 소 92, , ,974 97, , ,993 돼지 656, , , , , ,047 닭 214, , , , , ,561 수산용 198, , , , , ,672 계 1,162,332 1,457,808 1,553,482 1,368,011 1,438,533 1,541,273 자료출처 : 한국동물약품협회 Table 7. 용도별및축종별항생 ( 항균 ) 제판매실적 ( 추정치 ) ( 단위 : kg) 35, ,146 97, ,087 30,680 7,265 22,110 48, , , ,733 자료출처 : 한국동물약품협회

18 100% 80% 60% 40% 20% 0% 배합사료제조용수의사처방용자가치료및예방용 2002년도 48% 8% 44% 2003년도 47% 8% 46% 2004년도 44% 7% 49% 2005년도 44% 6% 50% 2006년도 43% 6% 51% 2007년 9월 39% 6% 55% 2002 년도 2003 년도 2004 년도 2005 년도 2006 년도 2007 년 9 월 Fig. 1. 용도별별항생 ( 항균 ) 제사용추이비교 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0% 소 돼지 닭 수산용 2002 년도 8% 57% 22% 12% 2003 년도 7% 57% 24% 11% 2004 년도 7% 56% 21% 16% 2005 년도 7% 54% 22% 18% 2006 년도 8% 57% 19% 15% 2007 년 9월 8% 57% 18% 17% 2002 년도 2003 년도 2004 년도 2005 년도 2006 년도 2007 년 9월 Fig. 2. 축종별항생 ( 항균 ) 제사용추이비교

19 마. 항생제종류별판매실적국내항생제종류별사용량은 2004년이후에 tetracylines 계열이년간약 톤으로서전체사용량의약 40-50% 정도를차지하며점차사용비율이감소하고있으며, 다음이 penicillins 및 sulfonamides 가 06년도기준으로각각약 225톤및약 184톤정도가사용되었고, 이외 aminoglycosides, macrolide, quinolone, polypeptide 순으로많이사용되고있고, cephalosporins계열은동물에서상대적으로가장적게사용되고있었고, nitrofurans는 2004년금지이후사용되지않았다 (Table 8, 9). Tetracyclines 계열에서는 chlortetracycline 과 oxytetracycline, sulfonamides 계열에서는 sulfathizole 과 sulfamethazine, penicillins 계열에서는 amoxycillin 과 penicillin G, aminoglycosides계열에서는 neomycin과 dihydrostreptomycin, macrolide계열에서는 tylosin과 erythromycin, polypeptide 계열에서는 colistin sulfate 가, quinolone 계열에서는 enrofloxacin 이가장많이사용되고있는것으로 조사되었다 (Table 8, 9). Table 8. 항생제계열별사용량 ( 단위 : kg) (AI 역가 ) 항생제 ( 계열 ) 연도별항생제사용량 (AI 역가 ) 2007 년 9 월 2006 년 2005 년 2004 년 2003 년 2002 년 Tetracyclines 477, , , ,632 Sulfonamides 136, , , ,241 Penicillins 204, , , ,166 Aminoglycosides 72,337 82,146 71,863 62,829 Macrolide 56,125 74,486 55,329 48,587 Quinolone 42,269 47,637 52,854 44,509 Polypeptide 35,948 42,127 42,039 31,796 Chloramphenicols 23,222 28,268 24,918 20,351 Lincosamides 11,803 18,084 14,433 11,981 Cephalosporins 1,551 3,297 2,169 1,865 Nitrofurans (0) 723,698 (664,838) 180,517 (179,933) 130,016 (74, ) 78,792 (57,064) 47,642 (43,108) 32,726 (32,325) 33,922 (32,699) 9,955 (9,955) 9,808 (9,127) 9,521 (9,506) 63,034 (57,244) 774,331 (706,217) 208,788 (208,338) 127,675 (84, ) 74,353 (55,122) 59,754 (54,132) 40,795 (40,274) 32,063 (30,936) 2,453 (2,453) 11,193 (10,437) 838 (831) 90,182 (82,829) 기타 99, , , , , ,848 Total 1,162,332 1,457,808 1,553,482 1,368,011 1,438,533 1,541,273 자료출처 : 한국동물약품협회

20 Table 9. 항생제종류별판매실적 항생제계열 항생제성분 연도별사용량 (Kg) 2007 년 9 월 2006 년 2005 년 2004 년 2003 년 2002 년 Amoxycillin 111, , ,466 97, ,449 Ampicillin 27,683 28,516 29,291 17,983 14,457 15,151 Penicillin Cloxacillin Dicloxacillin sodium ,039 Penicillin 65,435 61,510 64,022 52,613 47,655 33,851 소계 204, , , , , ,675 Cefadroxil Cefoperazone Cefquinome Cephalosporins Ceftiofur Cephalexin 981 2, , Cephazolin sodium 소계 1,551 3,297 2,169 1,865 9, Cenfloxacin HCl Ciprofloxacin 6,095 6,769 6,846 7,472 5,441 6,012 Danofloxacine Enrofloxacin 24,965 24,138 31,294 24,971 18,598 21,143 Flumequine 2,511 2,736 2,642 1,619 1,925 3,618 Nalidixic acid Quinolone Nitroxoline Norfloxacin 4,461 6,967 6,494 4,405 2,422 4,081 Ofloxacin Orbifloxacin Oxolinic acid 2,366 4,525 2,815 3,279 2,437 3,072 Pefloxacine 831 1,302 1,668 1, ,356 Sarafloxacin HCl 소계 42,269 47,637 52,854 44,509 32,726 40,

21 Table 9. 항생제종류별판매실적 (continued) 항생제계열 항생제성분 연도별사용량 (Kg) 2007 년 9 월 2006 년 2005 년 2004 년 2003 년 2002 년 Amikacin sulfate Apramycin sulfate 4,047 5,600 4,178 3,815 4,394 6,322 Destomycin Dihydrostreptomycin 15,495 11,505 10,800 8,597 8,473 9,220 Aminoglycoside Gentamycin 3,057 3,456 2,937 2,516 2,459 3,318 Kanamycin 2,745 3,637 3,688 3,597 3,793 3,972 Neomycine 39,875 48,204 40,710 36,252 52,489 41,150 Novobiocin Spectinomycin 3,028 4,500 3,747 2,894 2,457 3,960 Streptomycin sulfate 4,058 5,189 5,753 5,010 4,651 6,252 소계 72,337 82,146 71,863 62,740 78,792 74,353 Chlortetracycline 230, , , , , ,613 Doxycycline 2,266 2,809 3,962 4,382 2,295 2,030 Tetracycline Oxytetracycline 244, , , , , ,095 Tetracycline ,446 1,479 1,593 - 소계 477, , , , , ,331 Clindamycin 1,093 1, Lincosamide Lincomycin 10,710 16,114 13,741 11,518 9,420 10,608 소계 11,803 18,084 14,433 11,981 9,808 11,193 Chloramphenicol ,284 Chloramphenicos Florfenicol 22,659 27,444 24,073 19,354 8, Thiamphenicol 소계 23,222 28,268 24,918 20,351 9,955 2,

22 Table 9. 항생제종류별판매실적 (continued) 항생제계열 항생제성분 연도별사용량 (Kg) 2007 년 9 월 2006 년 2005 년 2004 년 2003 년 2002 년 Erythromycin 11,578 16,790 13,222 12,580 11,082 12,910 Josamycin Kitasamycin 1,354 1,934 1,367 1,470 1,533 1,469 Oleandomycin Macrolide Roxithromycine Spiramycine 2,144 2,646 2,465 2,358 1,254 1,451 Tilmicosin phosphate 1, ,117 1,275 Tylosin 39,983 52,153 37,948 31,372 32,580 42,536 소계 56,125 74,486 55,329 48,587 47,642 59,754 Formosulfathiazole Sulfachlorpyridazine 2,531 3,453 2, ,612 1,820 Sulfaclozine Sulfadiazine 6,851 7,705 6,847 4,965 5,680 5,928 Sulfadimethoxine 1,603 2,558 3,201 3,520 4,089 4,588 Sulfadoxine Sulfaguanidine Sulfamerazine ,065 Sulfamethazine 17,638 27,731 28,308 26,864 20,098 33,812 Sulfonamides Sulfamethoxazole 17,157 22,081 20,465 14,791 12,561 11,253 Sulfamethoypyridazine 500 1, Sulfamonmethoxine , Sulfanilamide Sulfaquinoxaline 3,412 4,777 4,576 5,985 5,201 5,949 Sulfathiazole 78,001 10, ,496 96, , ,517 Sulfisomidine Sulfisoxazole (2) 8 8 Trimethoprim 7,597 9,497 8,476 7,572 4,851 7,504 소계 136, , , , , ,

23 Table 9. 항생제종류별판매실적 (continued) 항생제계열 항생제성분 연도별사용량 (Kg) 2007 년 9 월 2006 년 2005 년 2004 년 2003 년 2002 년 Furaltadone HCl ,426 65,313 Furazolidone ,430 24,610 Nitrofurans Nitrofurazone Nitrovin 소계 ,034 90,182 Bacitracin 15,175 15,927 18,610 15,595 16,020 14,399 Bambermycin 1,835 2,407 2,980 2,943 4,940 5,243 Polypeptide Colistin sulfate 13,232 14,691 12,669 7,567 8,437 7,774 Enramycin 1,966 4,580 2, Virginiamycin 3,740 4,522 4,926 4,848 4,253 4,132 소계 35,948 42,127 42,039 31,796 33,922 32,063 기타 99, , , , , ,848 TOTAL 1,162,332 1,457,808 1,553,482 1,368,011 1,438,533 1,541,273 * Oxytetracycline quaterary ammonium salt 등 9 개약제는 AI(active ingredient) 로추정하지못함 자료출처 : 한국동물약품협회

24 Table 10. 용도별및축종별항생 ( 항균 ) 제판매실적 (2006 년 ) ( 단위 : kg) 구분 배합사료제조용수의사처방용자가치료및예방용 소돼지닭수산용소돼지닭수산용소돼지닭수산용 Amikacin sulfate Amoxycillin ,678 13,497 2,996 4,129 Amoxycillin Sodium Amoxycillin trihydrate ,661 1, ,745 59,512 14,714 8,349 Ampicillin ,157 Ampicillin sodium , Ampicillin trihydrate , ,182 3,121 8,748 6,554 1,657 Apitol-R Apramycin sulfate , Avilamycin , Avoparcin Bacitracin methylene disalicylate - 1, Bacitracin zinc , Bambermycin , Bromopropylate Carbadox , Cefacetril Cefadroxil Cefazolin sodium Cefoperazone Cefquinome Ceftiofur Ceftiofur HCL Ceftiofur sodium Cefuroxime Cefuroxime sodium Cenfloxacin HCl Cephalexin Cephalexin monohydrate Cephaloridine Cephapirin Cephazolin sodium Chloramphenicol Chloramphenicol monoethanolamine Chlormycetin Chlortetracycline 206 8,597 1, ,

25 구분 배합사료제조용수의사처방용자가치료및예방용 소돼지닭수산용소돼지닭수산용소돼지닭수산용 Chlortetracycline calcium 7, ,190 19, ,499 26,143 4,557 - Chlortetracycline HCl 541 6,702 3, ,433 2,637-3,078 49,352 15,331 - Ciprofloxacin ,696 - Ciprofloxacin HCl ,649 Clindamycin Clindamycin HCL ,393 Clopidol - 2,078 24, ,426 - Cloxacillin Cloxacillin benzathine Cloxacillin sodium Colistin sulfate 975 8,834 1, , Cymiazole HCl Danofloxacine Destomycin Diclazuril Dicloxacillin sodium Difuran Dihydrostreptomycin Dihydrostreptomycin sulfate ,128 6, Dimetridazole Doxycycline Doxycycline Hyclate Efrotomycin Enramycin - 2,092 2, Enrofloxacin , ,448 5,086 14, Enrofloxacin-Na Erythromycin ,709 Erythromycin estolate Erythromycin thiocyanate , ,989 9,236 Fenbendazol 225 2, , Florfenicol , ,920 18,595 3, Floxazone Flumequine ,456 Formosulfathiazole Fumagillin Furaltadone HCl Furazolidone Gentamycin

26 구분 배합사료제조용수의사처방용자가치료및예방용 소돼지닭수산용소돼지닭수산용소돼지닭수산용 Gentamycin sulfate ,076 1, Glydent Antimicrobial Iodochlorhydroxyquinoline Isoeugenol Josamycin Kanamycin Kanamycin sulfate , Kitasamycin , Kitasamycin tartrate Lasalocid sodium , Lincomycin , Lincomycin HCl - 10, , Maduramycin ammonium Marbofloxacine Methenamine Monensin sodium 1,829-5, Nafcillin Nafcillin sodium Nalidixic acid Narasin Neomycine Neomycine sulfate 7,742 29,827 5, ,271 2, Nicarbazine Nidroxyzone Nisin Nitrofurazone Nitrovin Nitroxoline Norfloxacin ,818 3, Nosiheptide Novobiocin Novobiocin sodium Ofloxacin Olaquindox Oleandomycin Oleanomycine phosphate Orbifloxacin Ormethoprim

27 구분 배합사료제조용수의사처방용자가치료및예방용 소돼지닭수산용소돼지닭수산용소돼지닭수산용 Oxacillin sodium monohydrate Oxolinic acid ,010 Oxytetracycline ,106 1, ,510 Oxytetracycline dihydrate Oxytetracycline HCl ,172 1,419 1,348 17,085 3,924 6,515 5, ,067 Oxytetracycline quaterary ammoni 19,585 45,310 32, , Pefloxacine Penicillin Penicillin G benzathine ,046 1, Penicillin G clemizole , Penicillin G potassium ,240 1,144 - Penicillin G procaine 3,792 27,731 2, ,919 10, Penicillin G sodium Phthalylsulfathiazole Piromidic acid Polymixin-B sulfate Rifampicin Robenidine HCl Roxarsone Roxithromycine Salinomycin Salinomysin sodium 12 4,573 24, Sarafloxacin HCl Sedecamycin Semduramycin Sodium nifurstylenate Spectinomycin , Spectinomycin HCl Spectinomycin sulfate tetrahydra , Spiramycin Spiramycin adipate Spiramycin embonate , Streptomycin sulfate ,991 2,973 - Sulfacetamide Sulfachloropyridazine Sulfachloropyridazine sodium , Sulfaclozine

28 구분 배합사료제조용수의사처방용자가치료및예방용소돼지닭수산용소돼지닭수산용소돼지닭수산용 Sulfadiazine ,142 Sulfadiazine sodium Sulfadimethoxine Sulfadimethoxine sodium Sulfadoxine Sulfaguanidine Sulfamerazine sulfamerazine sodium Sulfamethazine , ,742 1,683 - Sulfamethazine sodium Sulfamethoxazole ,658 7,587 7,031 - Sulfamethoxazole sodium ,480 1,715 - Sulfamethoypyridazine Sulfamethoypyridazine sodium Sulfamonomethoxine Sulfamonomethoxine sodium Sulfanilamide Sulfaphenazole Sulfaquinoxaline ,463 - Sulfathiazole 2,606 70, , ,953 24,172 1,833 - Sulfatolamide Sulfisomidine Sulfisoxazole Tetracycline Tetracycline HCl Thiamphenicol Thiopeptin Tiaclaton Tiamulin - 3, Tiamulin hydrogen fumarate - 7,171 1, , Tilmicosin phosphate Trimethoprim ,211 2, Tylosin Tylosin phosphate 1,141 16, , , Tylosin tartrate ,713 2,988 - Valnemulin Virginiamycin - 2,713 1, TOTAL 47, , ,420-7,562 37,639 13,023 25,651 64, , , ,646 자료출처 : 한국동물약품협회

29 Table 11. 용도별및축종별항생 ( 항균 ) 제판매실적 (2007 년 1 월 -9 월 ) 구분 ( 단위 : kg) 배합사료제조용수의사처방용자가치료및예방용 소돼지닭수산용소돼지닭수산용소돼지닭수산용 Amikacin sulfate Amoxycillin Amoxycillin Sodium Amoxycillin trihydrate Ampicillin Ampicillin sodium Ampicillin trihydrate Apitol-R Apramycin sulfate Avilamycin Avoparcin Bacitracin methylene disalicylate Bacitracin zinc Bambermycin Bromopropylate Carbadox Cefacetril Cefadroxil Cefazolin sodium Cefoperazone Cefquinome Ceftiofur Ceftiofur HCL Ceftiofur sodium Cefuroxime Cefuroxime sodium Cenfloxacin HCl Cephalexin Cephalexin monohydrate Cephaloridine Cephapirin Cephazolin sodium Chloramphenicol Chloramphenicol monoethanolamine Chlormycetin

30 구분 배합사료제조용수의사처방용자가치료및예방용 소돼지닭수산용소돼지닭수산용소돼지닭수산용 Chlortetracycline Chlortetracycline calcium Chlortetracycline HCl Ciprofloxacin Ciprofloxacin HCl Clindamycin Clindamycin HCL Clopidol Cloxacillin Cloxacillin benzathine Cloxacillin sodium Colistin sulfate Cymiazole HCl Danofloxacine Destomycin Diclazuril Dicloxacillin sodium Difuran Dihydrostreptomycin Dihydrostreptomycin sulfate Dimetridazole Doxycycline Doxycycline Hyclate Efrotomycin Enramycin Enrofloxacin Enrofloxacin-Na Erythromycin Erythromycin estolate Erythromycin thiocyanate Fenbendazol Florfenicol Floxazone Flumequine Formosulfathiazole Fumagillin Furaltadone HCl Furazolidone

31 구분 배합사료제조용수의사처방용자가치료및예방용 소돼지닭수산용소돼지닭수산용소돼지닭수산용 Gentamycin Gentamycin sulfate Glydent Antimicrobial Iodochlorhydroxyquinoline Isoeugenol Josamycin Kanamycin Kanamycin sulfate Kitasamycin Kitasamycin tartrate Lasalocid sodium Lincomycin Lincomycin HCl Maduramycin ammonium Marbofloxacine Methenamine Monensin sodium Nafcillin Nafcillin sodium Nalidixic acid Narasin Neomycine Neomycine sulfate Nicarbazine Nidroxyzone Nisin Nitrofurazone Nitrovin Nitroxoline Norfloxacin Nosiheptide Novobiocin Novobiocin sodium Ofloxacin Olaquindox Oleandomycin Oleanomycine phosphate Orbifloxacin

32 구분 배합사료제조용수의사처방용자가치료및예방용 소돼지닭수산용소돼지닭수산용소돼지닭수산용 Ormethoprim Oxacillin sodium monohydrate Oxolinic acid Oxolinic acid sodium Oxytetracycline Oxytetracycline dihydrate Oxytetracycline HCl Oxytetracycline quaterary ammoni Pefloxacine Penicillin Penicillin G benzathine Penicillin G clemizole Penicillin G potassium Penicillin G procaine Penicillin G sodium Phthalylsulfathiazole Piromidic acid Polymixin-B sulfate Rifampicin Robenidine HCl Roxarsone Roxithromycine Salinomycin Salinomysin sodium Sarafloxacin HCl Sedecamycin Semduramycin Sodium nifurstylenate Spectinomycin Spectinomycin HCl Spectinomycin sulfate Spectinomycin sulfate tetrahydra Spiramycin Spiramycin adipate Spiramycin embonate

33 구분 배합사료제조용수의사처방용자가치료및예방용 소돼지닭수산용소돼지닭수산용소돼지닭수산용 Streptomycin Streptomycin sulfate Sulfacetamide Sulfachloropyridazine Sulfachloropyridazine sodium Sulfaclozine Sulfadiazine Sulfadiazine sodium Sulfadimethoxine Sulfadimethoxine sodium Sulfadoxine Sulfaguanidine Sulfamerazine sulfamerazine sodium Sulfamethazine Sulfamethazine sodium Sulfamethoxazole Sulfamethoxazole sodium Sulfamethoypyridazine Sulfamethoypyridazine sodium Sulfamonomethoxine Sulfamonomethoxine sodium Sulfanilamide Sulfaphenazole Sulfaquinoxaline Sulfathiazole Sulfatolamide Sulfisomidine Sulfisoxazole Tetracycline Tetracycline HCl Thiamphenicol Thiopeptin Tiaclaton Tiamulin Tiamulin hydrogen fumarate Tilmicosin phosphate Trimethoprim

34 구분 배합사료제조용수의사처방용자가치료및예방용 소돼지닭수산용소돼지닭수산용소돼지닭수산용 Tulathromycin Tylosin Tylosin phosphate Tylosin tartrate Valnemulin Virginiamycin 계 35, ,146 97, ,087 30,680 7,265 22,110 48, , , ,733 자료출처 : 한국동물약품협회

35 제 2 절동물및축산물유래항생제내성균분포조사 1. 균분리및동정 동물유래항생제내성균분포도조사를위하여소는 21농가에서채취한 210분변시료를대상으로 E. coli 121균주, E. faecium과 E. faecalis를각각 24균주, 40균주를분리하였다. 돼지는 24농가에서채취한 261분변시료를대상으로 Salmonella spp. 15균주, E. coli 239균주, E. faecium과 E. faecalis를각각 45균주, 104균주등을분리하였다. 닭은 20농가에서채취한 200분변시료에서 Salmonella spp. 20균주, E. coli 169균주, E. faecium과 E. faecalis를각각 80균주, 58균주를분리하였다 (Table 12). 축산물유래항생제내성균분포조사를위하여소는전국 25개도축장에서 220시료를, 돼지는 24 개도축장에서 210시료를, 닭은 21개도계장에서 185시료를채취하여균분리를하였다. 이중소도체에서는 E. coli 57균주, S. aureus 23균주, E. faecium 10균주, E. faecalis 108균주, 돼지도체에서는 E. coli 62균주, S. aureus 33균주, E. faecium 12균주, E. faecalis 143균주, 닭도체에서는 E. coli 96균주, S. aureus 85균주, E. faecium 8균주, E. faecalis 122균주를분리하였다 (Table 13). Table 12. 동물분변유래균분리및동정 축종 농가수 검사시료수 동물별균분리및동정 Salmonella E. coli E. faecium E. faecalis C. jejuni 소 NT 돼지 NT 닭 계 * NT: not tested Table 13. 축산물유래균분리및동정 축종도축장수검사시료수 축산물별균분리및동정 Salmonella E. coli Staph. aureus E. faecium E. faecalis C.jejuni 소 NT* 돼지 NT 닭 계 * NT: not tested

36 2. 항생제내성균분포도조사 가. 동물분변에서분리된세균에대한항생제내성조사 (1) Salmonella spp. 돼지분변및닭분변에서분리한 Salmonella spp. 35균주의최소억제농도 (MIC) 의분포도는 Table 14과같다. 돼지유래 Salmonella spp. MIC는대체로닭유래균보다높게나타났다. 특히돼지유래 Salmonella spp. 는모든균주가 tetracycline의 MIC가 64( μg / ml ) 이상으로닭유래균에비해상당히높게나타났으며, chloramphenicol의경우닭유래균은모든균주가 MIC가 16( μg / ml ) 이하이었으나돼지유래균은 66% 가 16( μg / ml ) 이상으로나타났다. 그러나돼지및닭유래 Salmonella spp. 모두 ceftiofur, ciprofloxacin의 MIC는낮게나타났다 (Table 14). 닭유래 Salmonella spp. 는 gentamicin, nalidixic acid, streptomycin의내성율이돼지유래균에비해높게나타났으며특히 nalidixic acid에는모든균주가내성을나타내었으나그외항생제에는모두감수성을나타내었다. 돼지유래 Salmonella spp. 는모든균주가 tetracycline에내성을나타내었으며 chloramphenicol(8주, 53.3%), florfenicol(7주, 46.7%) 에비교적높은내성을나타내었으며 amoxicillin/clavulanic acid, ceftiofur, cephalothin, ciprofloxacin, colistin에모든균주가감수성을나타내었다 (Table 15). 돼지유래 15균주는모두 2개이상의항생제에내성을나타내었으며, 6주 (40%) 는 4개이상의항생제에내성을나타내었고가장빈번하게관찰되는내성양상은 S, TE(6주, 40%) 로나타났다. 닭유래균은 4개이상의항생제에내성을나타내는다제내성균을검출되지않았으며, 가장빈번하게관찰되는내성양상은 GM, NA, S(11주, 55%) 로나타났다 (Table 16)

37 Table 14 동물에서분리한 Salmonella spp 의최소억제농도 (MICs) 분포도 Antimicrobials animals * MIC range Amoxicillin /clavulanic acid Ampicillin Cefazolin Ceftiofur Cephalothin Chloramphenicol Ciprofloxacin Colistin Florfenicol Gentamicin Nalidixic Acid Neomycin Streptomycin Tetracycline distribution (%) of MICs( μg / ml ) pigs poultry pigs poultry pigs poultry pigs poultry pigs poultry pigs poultry pigs poultry pigs poultry pigs poultry pigs poultry pigs poultry pigs poultry pigs poultry pigs poultry Trimethoprim pigs /sulfamethoxazole poultry * pigs(n=15), poultry(n=20)

38 Table 15. 동물에서분리한 Salmonella spp. 항생제내성조사 Antimicrobials Amoxicillin / clavulanic acid Pigs (n=15) resistant isolates (%) Poultry (n= 20) Total (n=35) 0(0) 0(0) 0(0) Ampicillin 2(13.3) 0(0) 2(5.7) Cefazolin 2(13.3) 0(0) 2(5.7) Ceftiofur 0(0) 0(0) 0(0) Cephalothin 0(0) 0(0) 0(0) Chloramphenicol 8(53.3) 0(0) 8(22.9) Ciprofloxacin 0(0) 0(0) 0(0) Colistin 0(0) 0(0) 0(0) Florfenicol 7(46.7) 0(0) 7(20.0) Gentamicin 0(0) 11(55.0) 11(31.4) Nalidixic Acid 6(40.0) 20(100) 26(74.3) Neomycin 5(33.3) 0(0) 5(14.3) Streptomycin 8(53.3) 14(70.0) 22(62.9) Tetracycline 15(100) 0(0) 15(42.9) Trimethoprim /sulfamethoxazole 5(33.3) 0(0) 5(14.3)

39 Table 16. 동물에서분리한 Salmonella spp. 의항생제내성양상 Animals resistance Resistance patterns isolates(%) 2 S, TE 6(40.0) C, FFC, TE 1(6.7) 3 C, S, TE 2(13.3) Pigs (n=15) subtotal 3(20.0) 4 FFC, NA, S, TE 1(6.7) 7 C, FFC, NA, N, S, TE, SXT 3(20.0) 9 AM, CZ, C, FFC, NA, N, S, TE, SXT 2(13.3) 1 NA 6(30.0) Poultry (n=20) 2 NA, S 3(15.0) 3 GM, NA, S 11(55.0)

40 (2) Escherichia coli 소분변유래 E. coli는돼지나닭에서분리한 E. coli에비해 15종항생제에대해전반적으로최소억제농도 (MICs) 가낮게나타났으며, 특히 ciprofloxacin과 gentamicin에서낮게나타났다. 돼지분변유래 E. coli의 41% 와 31% 가각각 chloramphenicol과 florfenicol에 64( μg / ml ) 이상의 MIC를나타내었다. 닭분변유래 E. coli의 67.4% 가 nalidixic acid에 128( μg / ml ) 이상, 그리고 32% 가 ciprofloxacin에 8( μg / ml ) 이상의 MIC를나타내었다 (Table 17). 소에서분리한 E. coli는 streptomycin(56주, 46.3%) 과 tetracycline(54주, 44.6%) 에가장높은내성을나타내었다. 그러나 amoxicillin/clavulanic acid, cephalothin, ciprofloxacin, gentamicin에모든균주가감수성을나타내었다. 돼지에서분리한 E. coli도 streptomycin(199주, 83.3%) 과 tetracycline(199주, 83.3%) 에가장높은내성을나타내었으며, 그외 ampicillin(163주, 63.5%), florfenicol(122주, 50.6%), chloramphenicol(120주, 49.8%) 에도전체균주의약 50% 이상이내성을나타내었다. 그러나 amoxicillin/calvulanic acid, cefazolin, ceftiofur의내성율은낮게나타났다. 닭에서분리한 E. coli는 tetracycline(137주, 80.6%) 에가장높은내성을나타내었으며, 그외 nalidixic acid (124주, 72.9%), streptomycin(106주, 62.4%), ampicillin(163주, 63.5%), florfenicol(122주, 50.6%), chloramphenicol(120주, 49.8%) 에도전체균주의약 50% 이상이내성을나타내었다. 그러나 colistin 에는모든균주가감수성을나타내었으며 amoxicillin/calvulanic acid, cefazolin, cephalothin의내성율은낮게나타났다 (Table 18). 소분변유래 E. coli는 42주 (40.4%) 가모든항생제에감수성을나타내었으며가장빈번하게관찰되는내성양상은 S, TE(13주, 12.5%) 로나타났다. 돼지분변유래 E. coli는 142주 (59.4%) 가 4개이상의항생제에내성을나타내었으며, 가장빈번하게관찰되는 S, TE(14주, 5.9%) 로나타났다. 닭분변유래 E. coli는 110주 (65.1%) 가 4개이상의항생제에내성을나타내었으며가장빈번하게관찰되는내성양상은 AM, CIP, NA, S, TE, SXT(10주, 5.9%) 로나타났다 (Table 19)

41 Table 17. 동물에서분리한 E. coli의최소억제농도 (MICs) 분포도 MIC distribution (%) of MICs( μg / ml ) antimicrobials animals * range cattle Amoxicillin pigs /clavulanic acid poultry cattle Ampicillin pigs poultry cattle Cefazolin pigs poultry cattle Ceftiofur pigs poultry cattle Cephalothin pigs poultry cattle Chloramphenicol pigs poultry cattle Ciprofloxacin pig poultry cattle Colistin pigs poultry cattle Florfenicol pigs poultry cattle Gentamicin pigs poultry cattle Nalidixic Acid pigs poultry cattle Neomycin pigs poultry cattle Streptomycin pigs poultry cattle Tetracycline pigs poultry Trimethoprim/ sulfamethoxazole cattle pigs poultry * cattle(n=121), pigs(n=239), poultry(n=169)