대한내과학회지 : 제 69 권제 6 호 2005 인체기관지상피세포에서리노바이러스및담배연기추출물에의한 Interleukin-8 의생성에대한연구 한양대학교의과대학내과학교실, 제주대학교의과대학내과학교실 2 김영찬 이재형 김미옥 2 김태형 손장원 윤호주 신동호 박성수 =Abstract= The effect of rhinovirus & cigarette smoke extract on the production of interleukin-8 in human bronchial epithelial cells Young Chan Kim, M.D., Jae Hyung Lee, M.D., Mi Ok Kim, M.D. 2, Tae Hyung Kim, M.D., Jang Won Sohn M.D., Ho Joo Yoon, M.D., Dong Ho Shin, M.D. and Sung Soo Park, M.D. Department of Internal Medicine, Hanyang University College of Medicine, Seoul, Korea; Department of Internal Medicine, Cheju University College of Medicine, Cheju, Korea 2 Background : Rhinovirus (RV) or smoking are one of the most important precipitating factors in acute exacerbation of COPD and bronchial asthma. We hypothesized that alterations in interleukin (IL)-8 elaboration are present at sites of RV infection and cigarette smoke stimulation and also there is an additive effect if both agents are present in bronchial epithelial cells. To test this hypothesis, we characterized time-sequenced alterations in IL-8 elaboration from human bronchial epithelial cells in vitro under the stimuli of RV and cigarette smoke extract (CSE). Methods : We compared the ability of RV-infected &/or CSE-stimulated bronchial epithelial cells, BEAS-2B (from American Type Culture Collection) cells to produce the IL-8 with controls. We stimulated BEAS-2B cells with RV 14 &/or CSE. We harvest the supernatants from RV &/or CSEstimulated BEAS-2B cells and the controls at 2 hr, 4 hr, 6 hr, 12 hr, 24 hr, 48 hr from inoculation time. We measured the concentration of IL-8 by ELISA kits from supernatants and analysed IL-8 mrna transcript semiquantitatively by RT-PCR. Results : RV-infected &/or CSE-stimulated BEAS-2B cells increased the production of IL-8 from 24hr and produced outstandingly compared with the controls at 48 hr and there were an additive effects when both agents were present, especially in the combinations of RV and CSE stimuli. Conclusions : Our results demonstrate that RV infection and components of cigarette smoke elicit inflammatory responses in bronchial epithelial cells and RV and CSE could be more harmful to respiratory tract in combination.(korean J Med 69:660-667, 2005) Key Words : Rhinovirus, Cigarette, IL-8, Asthma, COPD 접수 : 2005년 10월 5일 통과 : 2005년 11월 10일 교신저자 : 윤호주, 서울시성동구행당동 17, 한양대학교의과대학내과학교실 (133-792) E-mail : hjyoon@hanyang.ac.kr * 본연구는 2001 년한양대학교교내연구지원비에의해수행되었음. - 660 -
- Young Chan Kim, et al : Rhinovirus & cigarette smoke extract stimulation of IL-8 - 서 론 천식은대기오염이나각종화학물질에노출등으로 최근에그유병률이증가하는추세이다. 미국 NHIS (Na- tional Health Interview Survey) 는 1996 년천식유병률 을전미인구의 1) 5.5% 로추정하고있으며, 1982년부터 1996년도까지백인에서는 55%, 흑인에서는 77.5% 의증 가율을보이고있다고발표하였다 2). 또한만성폐쇄성폐 질환은전세계에서네번째사인을차지할만큼공중 보건학적으로의미가크다 3). 유병률이나의료비용의증 가등공중보건학적의미가큰이들질환의급성악화 의주요위험인자로리노바이러스 (RV) 나흡연에대해서 는이미여러역학적조사를통해서잘알려져있다. RV 는천명음을동반한학령기아동에서 80~85% 에서검출 이되었고 4), 성인천식악화의가장흔한원인으로약 50% 정도를차지하며 5), 또한만성폐쇄성폐질환악화시 23% 를차지하는등바이러스에의한감염중가장흔한 것으로알려져있다 6). 흡연또한역학조사결과현재혹 은과거흡연자의약 90% 가만성폐쇄성폐질환과관련이 있으며, 그유병률은흡연량과용량의존형으로밀접한 연관이있다는것이밝혀졌다 7). RV 나흡연에의한천식및만성폐쇄성폐질환급성 악화의주된병리기전으로이들자극에의해인체기관 지상피세포에서호중구를비롯한여러염증세포들의 침윤과다양한화학매개체들이관여한다는것이여러 연구를통해잘알려져있다 8, 9) 은. Interleukin(IL)-8 RV 를포함한각종바이러스나흡연및대기오염등다양 한자극에반응하여상피세포를비롯한여러세포들에 서생성이되는대표적인 chemokine 으로서호중구나단 핵구와같은염증세포의유입및활성화에관여하여, 천 식이나특발성폐섬유화증, 낭성섬유화증등의중요한 병리기전으로작용한다고알려져있다 9). 이에저자등은 RV나흡연에의한천식및만성폐쇄 성폐질환의급성악화의기전을이해하기위해 in vitro 에서 RV 감염과수용성담배연기추출물 (CSE) 에의해 기관지상피세포에서호중구화학주성인자인 IL-8의 생성과이들두가지자극이동시에가해질때 IL-8 생 성에있어상승효과의유무를관찰하고자하였다. 대상및방법 RV 및 CSE 자극전과후에기도상피세포가 IL-8 을 분비하는지여부를시간에따라관찰하였으며, RV와 CSE 자극이동시에있을경우각각의자극시보다부가적 인효과가나타나는지보고자하였다. 2, 4, 6, 12, 24 및 48시간간격을두고 ELISA 로정량분석을하였다. 또한 RT-PCR 을이용하여 IL-8 mrna 전사체를반정량적으 로분석하였다. 실험군과대조군각각의평균과표준오 차를 triplicate determination 의방법으로비교하였다. 1. 바이러스스톡제조 Ameriacan Type Culture Collection (Manassas, VA, U.S.A.) 으로부터제공받은 RV14를기관지상피세 포주인 Hep2 세포에감염시킨후감염이진전되었을 때에세포상층액을동결과해빙의과정을통해파열시 킨뒤저속원심분리기로돌려침전물을만들었다. 정제 된상층액은 -70 에서얼렸고, 바이러스의흡착은 37 에서 90분간그리고배양은 33 에서시행되었다. 보전 바이러스 (stock virus) 의감염가측정은 -70 에보관되 었던 RV를 10배씩계단희석하여 24 소실(well) 로된조 직배양병의각소실에바이러스희석액을 0.2 ml씩접 종하여 CV-1 세포단일층에감염되도록한후 5내지 6 일경 10% 포르말린으로고정하여 crystal violet 으로염 색한후 plaque 수를계산하여바이러스주의 plaque form- ing unit (PFU) 를정하였다. 지정된실험을위하여 RV stock 에자외선을조사하였으며, sucrose gradient 를이 용하여정제를하였고, 완전정제를위하여 4 에서 45분 간 Beckman L5-50 원심분리기와 SW rotor 를이용하여 150,000 g 로농축시켰다. 이렇게해서얻은바이러스침 전물은 NTE 완충액(150 mm NaCl, 50 mm tris-hcl, ph 7.4, 1 mm EDTA) 에다시부유시켜하층에는 60% sucrose 2.4 ml가상층에는 30% sucrose 2.4 ml를함 유하고있는 2층의 sucrose cushion 에놓았다. 다음 90 분간의원심분리를시켜바이러스를함유하고있는접 촉면을수집하여정제하였다. 로 2. RV 14 세포감염과배양상층액획득 비축된바이러스를 2% 우태혈청이포함된 EMEM으 10배씩계단희석하여상피세포가융합단일층을이 룬각소실에분주하여 37 에서 2 시간동안흡착, 감염 시킨후흡착되지않은바이러스는 PBS로세척하여제거 하였으며, 33 에서원하는기간만큼충분한시간동안 배양을시켰다. 바이러스감염세포주인실험군과비감염 - 661 -
- 대한내과학회지 : 제 69 권제 6 호통권제 544 호 2005 - 세포주인대조군은동일하게 48시간동안 37, 5% CO2 의배양조건하에서 IL-8 의측정전까지배양을유지하였 으며, 기도상피세포에대한 RV 감염유무는간접면역 형광항체법과세포병변효과의유무로확인하였다. 3. 담배연기추출물 (CSE) 제조 수용성담배연기추출물은여과기가달린 를연소하면서생긴연기를 1-1 pyridoxin 이함유된 10개의담배 0.45% D-glucose 와 4 mg Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM; Gibco) 100 ml 를통과시켜만들었다. lipopolysaccharide 오염을줄이기위해유리시험관은 100 에서 1 시간동안가열을하였고, CSE 분획구는 -20 에서보관하였다. 4. IL-8 의측정 인체기관지상피세포상층액에서면역적으로활성도 가높은 IL-8 을 R & D Systems 에서구입한 ELISA kits 를 이용하여제조업체의프로토콜에따라정량분석하였으며 이분석방법은 5~15 pg/ml 까지도감지할수있었다. 시행하였다. 6. RNA 추출및 RT-PCR 분석 RNA는 Chomczynski 와 Sacchi 가시행하였던 acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform 추출법으 로정해진시간대에획득하였다. 각각의시간대에일정 량(10 μg) 의 RNA를 1% agarose 와 17% formaldehyde gel 을통해전기영동을시켜분획하였고, nylon membrane 으로전이후에 32 P-labeled cdna 단자에교잡하 였다. 그리고세척시킨뒤 autoradiography 를통해평가 하였다. IL-8 mrna 의측정은 β-actin transcripts 에 의해교정을한뒤측정하였다. 7. 통계분석 모든측정치는평균과표준오차로표시하였고, 각실 5. 세포생활력 (cell viability) 평가 세포생활력은 trypan blue dye exclusion 과 LDH를 이용하여이뤄졌으며, 세포내 LDH의분비는 Sigma에 서구입한 LDH assay kits (St. Louis,MO) 를이용하여 10 6 10 5 10 4 RV14 Control 10 3 10 8 10 7 10 6 Figure 1. Kinetics of IL-8 elaboration by RV 14-infected BEAS-2B cells. Monolayers of BEAS-2 cell were incubated in the absence (diamonds) and presence (squares) of RV (MOI=1.0) for the noted periods of time. The levels of immunoreactive IL-8 in the resulting supernatants were quantitated by ELISA at intervals thereafter and were expressed as picograms of IL-8 per million cells. The noted values represent the mean± SEM of a minimum of three assays. *, p<0.05 10 5 0 2 4 6 8 10 12 Time after stimulation(h) Figure 2. Semiquantative analysis of IL-8 and β-actin mrna transcripts in BEAS-2B cells with RV14 challenge. IL-8 mrna levels corrected by β-actin transcripts showed that RV-infected BEAS-2B cells were statistically stronger than the controls. - 662 -
- 김영찬외 7 인 : 리노바이러스와담배연기추출물에의한 IL-8의생성 - 10 8 smoke (20%) 10 7 smoke (40%) control 10 6 10 5 Figure 3. The kinetics of IL-8 elaboration by cigarette smoke extract (CSE)-stimulated BEAS-2B cells. Monolayers of BEAS-2 cell were incubated in the absence (diamonds) and presence (squares) of CSE (20%) for the noted periods of time. The level of immunoreactive IL-8 in the resulting supernatants were quantitated by ELISA at intervals thereafter and were expressed as picograms of IL-8 per million cells. The noted values represent the mean±sem of a minimum of three assays. *, p<0.05 10 8 10 7 10 6 10 5 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 험군과대조군의측정치를비교분석하기위해서통계 기법으로분산분석 (ANOVA) 을시행하였으며그통계 학적유의수준은 5% 미만으로하였다. 결 과 1. RV14 감염에의한인체기도상피세포에서 IL-8 생성에서배양시간에따른동역학 감염시키지않은대조군의상피세포에서도 IL-8의 분비가시간경과에따라다소증가하였으나의미있는 상승은아니었다. 그러나 RV로감염된상피세포에서는 처음 12시간까지는대조군과통계학적으로의미있는차 이를보이지않다가배양 24시간에 IL-8의분비가대조 군에서는 965 pg/ml 인반면에실험군은 3,489 pg/ml 로 통계적으로유의하게분비가증가하기시작하여 (p<0.05), 48시간에는대조군이 1,025 pg/ml, 실험군이 3,987 pg/ml 로현저한차이를보였다( 그림 1). 또한 RV 감염 의경우대조군에비해 이증가되었다 ( 그림 2). IL-8 mrna transcripts 의생성 2. CSE 자극에의한인체기도상피세포에서 IL-8 생성에서배양시간에따른동역학 CSE 자극시에도마찬가지로, 배양 24시간부터통계 학적으로의미있는차이를보이게되었는데, 대조군에서 는 886 pg/ml, 실험군에서는 3,987 pg/ml 였고, 48시간 에는대조군은 1,025 pg/ml, 실험군에서는 3,987 pg/ml 로측정되었다 ( 그림 3). 또한 CSE 자극이있는경우대 조군에비해 었다( 그림 4). IL-8 mrna transcripts 의생성이증가되 3. RV14/CSE 자극에의한인체기도상피세포에서 IL-8 의생성 대조군에서는 789 pg/ml 였으나, RV 감염군에서는 2,289 pg/ml 그리고 CSE 자극군에서는 2,987 pg/ml 로 대조군보다 Time after stimulation(h) Figure 4. Semiquantitative analysis of IL-8 and β-actin mrna transcripts in BEAS-2B cells with CSE challenge. As with RV infection, CSE-stimulated BEAS-2B cells also show increased production of IL-8 mrna. IL-8 의생성이증가하였다. 그러나이두가 지자극이동시에가해질경우즉, RV 감염후 CSE 자 극이있는군에서는 3,789 pg/ml, 반대로 CSE 자극후 RV 감염이있는군에서는 4,986 pg/ml로각각의자극 시보다 IL-8 의생성이증가되었는데, 이로써 RV 감염 및 CSE 자극이동시에주워질때 IL-8 생성에부가적인 효과가나타남을알수있었고, 특히 CSE 자극후 RV 감염이있는경우유의한 IL-8 의생성을보였다 ( 그림 5). 또한각각의자극의경우대조군보다는 IL-8 mrna transcripts 의생성이증가되었다 ( 그림 6). - 663 -
- Korean Journal of Medicine : Vol. 69, No. 6, 2005 - Figure 5. IL-8 elaboration by RV14 &/or CSE-stimulated BEAS-2B cells. Quantification of the IL-8 in BEAS-2B cell supernatants. Monolayers were incubated under control conditions, RV infection, CSE stimulation or combinations of both stimuli. The amount of IL-8 was quantitated by ELISA and was expressed as picograms of IL-8 per million cells. The noted values represent the mean ±SEM of triplicate determinations. 고 찰 최근천식이나만성폐쇄성폐질환은유병률이증가 하면서공중보건학적으로그중요성이대두되고있다 1-3). 그러므로이들질환의가장흔한악화요인인 RV 감염 및흡연에대한관심이증가하였는데, RV는인간에게서 가장흔한급성감염성질환인감기의 50~60% 를차지 하고있으며 10, 11), 만성기관지염악화의 40% 를차지하 고있다 12). PCR을이용한진단법의개발로천식악화시 RV 의중요성이강조되었는데, 9~11세의학령기아동 천식악화의 85% 를그리고성인에서는 45% 를차지하고 있는것으로알려졌다 4, 5). 또한담배는약 4,800여가지 의성분으로구성된복합연무질로서 13), 어떻게천식이 나만성폐쇄성폐질환을악화시키는지그기전에대해 서는명확히알려져있지않다. 다만최근에는흡연에 의해호중구나단핵구등의염증세포침윤이일어나고, 이들세포의침윤이 protease-antiprotease 사이의불균 형을초래하여폐손상을유발한다는이론이보편적으로 받아들여지고있다 14). RV 감염이나흡연에의한폐질환의병태생리에있 어서중요한공통점은첫째, RV나흡연에대한조기반 응으로호중구와같은염증세포침윤이일어난다는점 이다 11, 15-17). RV는 adenovirus 나 influenza virus 처럼직 접적인세포독성에의한손상보다는여러염증성매개 체가관여하여호중구침윤이일어난다는사실은이미 잘알려져있다 9, 18, 19) 흡연. 또한직접적혹은간접적으 로호중구를기도로유인하며, 이와같은염증세포의유 인및활성화가폐기종이나만성기관지염과같은폐질 환의병태생리에첫단계라는것이밝혀졌다 20-23). 둘째, 상피세포가 RV나흡연의자극에대해단순한표적세 포가아니라다른세포들과의상호작용을통하여, 염증 반응을유발하거나지속시키는작동세포로서의기능을 한다는점이다 24, 25). 기도가 RV나흡연의자극을받으면 호중구와같은염증세포들의침윤과다양한사이토카 인이생성이되는데, 이때기도상피세포는이들의표적 세포로작용할뿐아니라, 다양한사이토카인을생산하 여염증세포들을활성화시키고생존을연장시키는것 으로알려져있다 25-27). RV 감염이나흡연에의한기도 상피세포의손상은만성폐쇄성폐질환이나천식과같 은하기도질환에서흔히관찰되는소견으로이는상피 세포와백혈구간의상호작용에의한기도염증반응에 기인한다 28). 이러한기도염증반응에있어서말초혈액 에서염증부위로호중구의이동, 유착, 활성화의과정에 다양한사이토카인이나유착분자가관여할것이라는 가설을세울수있었다. NC CSE CSE +RV Figure 6. Induction of mrna for IL-8 in BEAS-2B cells with CSE and RV14 challenge. RT-PCR gel showed that magnitude of IL-8 signals of CSE with RV was higher than of medium alone or CSE. NC, normal control; CSE, cigarette smoke extract; RV, rhinovirus. - 664 -
- Young Chan Kim, et al : Rhinovirus & cigarette smoke extract stimulation of IL-8 - 이에저자등은호중구의유인및활성화에관여하는 대표적인사이토카인인 IL-8이 RV 감염이나 CSE 자극 에의해기도상피세포에서생성이증가되는지의여부 와이들두가지자극이동시에존재할경우 IL-8 생성 면에서부가효과가나타나는지관찰하고자하였다. 그 결과 RV 감염이나 CSE 각각의자극에의해 IL-8의생 성이증가하지만, 특히이두가지자극이동시에주워 질때 IL-8 생성에상승효과가나타남을알수있었다. 본연구결과( 그림 4) 에서 CSE를 20% 와 40% 의서로다 른농도로자극하였을때, 20% 에서는 IL-8의생성이지 속이되었으나, 40% 에서는 12시간경에최고점에이르 렀다가이후에점차감소하는소견을보였다. Oltmanns 등 29) 은기도평활근에 5%, 10%, 15%, 20%, 30% 서로 다른농도의 CSE로자극을주면서 IL-8의생성량을관 찰하였다. 그결과 15% 까지는 IL-8의생성이증가하였 으나, 20~30% 농도에서는 IL-8의생성량이감소하였는 데, 그이유에대해그들은첫째, 높은농도의 CSE에서 평활근세포가소실되면서생성량이감소하였고둘째, 20% 이상의 CSE 농도에서는 TNF- α의 IL-8 생성에대 한부가효과가감소하며셋째, 약 4,000여가지의 CSE 성분중에일정농도이상에달하면 IL-8 생성을자극하 기보다는억제하는효과가강하기때문이라고설명하 였다. 이는기도평활근세포에대한 CSE의효과에대 한연구로서기관지상피세포에도동일하게적용할수 있을지에대해서는더많은연구가필요할것으로사료 된다. 그리고 RV 감염이나 CSE 자극이없는대조군의기 관지상피세포도시간이경과함에따라서서히 IL-8의 생성이증가한다는사실을알수있었는데, Zhou 등 9) 은 RV 감염이없었던정상비점막에서도 IL-8이지속적으 로생성되는데, 이는미생물이나미립자등각종항원을 포착하는비점막의여과기능이라고설명하였다. 그러나 본연구에서관찰된대조군상피세포에서 IL-8 생성양 은미미하였는데, Teran 등 30) 의연구처럼호중구침윤이 없는정상하부기도에서의 IL-8 생성은비점막처럼여 과기능을할정도로의미있는양이아닌것으로사료된 다. Takizawa 등 31) 은기관지내시경을이용하여, 흡연자 와비흡연자소기도에서직접적으로기관지상피세포 를획득한후이들두군사이에 IL-8과 ICAM-1 의생 성을비교하였다. 그결과흡연자들에게서 IL-8의생성 이증가되었을뿐아니라, 호중구의유착및활성화에 중요한역할을하는 ICAM-1 의 mrna 역시증가함을 밝혔다. 이처럼 IL-8이나 ICAM-1의증가는폐포내호 중구침윤을유발하고, 침윤된호중구에서분비되는여 러단백분해효소들이세기관지및폐포에손상을주 어기도의변형을일으킨다고주장하였다. Zhou 등 9) 은 실험적으로인체에 RV를감염시킨후 in vivo와 vitro에 서 IL-8 을어떻게생성하는지관찰하였다. 그결과 RV 에의한 IL-8의생성은 RV 주입후 48~72 시간에최고 점을이루었는데, 이는 RV가 IL-8 promoter luciferase activity 를자극함으로 IL-8 mrna 전사가증가하며, NF-κB 부위변이시 IL-8 생성이줄어든다는사실을통 해 RV에의한 IL-8의생성기전이 NF-κB 의존형전사 방식에의한다는것을밝혔다. 이와같이 RV나흡연에의한폐손상의기전을밝히 기위해실험실적인접근을통한사이토카인생성에대 해많은연구가이뤄졌으며, 앞서기술한다른연구처럼, 본연구를통해서도 RV나흡연이기관지상피세포에서 IL-8 생성의강력한자극제라는것을알수있었다. RV 나흡연은우리주변에서흔히동시에접하고노출될수 있는환경적요인으로본연구결과는이들두가지자 극이동시에가해질때 IL-8 생성에상승효과가나타나 서더심한폐손상을유발할수있다는추정을할수있 었다. 또한천식이나만성폐쇄성폐질환의주요한악화 요인인 RV 및흡연이 IL-8을통해폐손상을유발한다는 사실을통해향후이들질환의새로운치료목표로서 IL-8 의중요성에대해고려해볼수있을것으로생각한 다. 요 약 목적 : 최근공해나각종화학물에노출등으로천식 유병률이모든연령과인종에관계없이증가하고있으 며, 만성폐쇄성폐질환은세계에서네번째주요사망원 인이되는등이들질환의공중보건학적인중요성이대 두되고있다. 이처럼리노바이러스 (RV) 감염이나흡연 이천식이나만성폐쇄성폐질환을악화시킨다는것은여 러역학적연구를통해잘알려져있다. RV나흡연에대 한기관지상피세포의최초반응이호중구와같은염증 세포의침윤이며, 이러한호중구침윤에관여하는대표 적인사이토카인이 IL-8 이라는사실을고려할때, 저자 들은 RV 감염이나흡연에의한폐질환의악화에 IL-8이 관여할것이라는가설을세울수있었고, RV 감염이나 - 665 -
- 대한내과학회지 : 제 69 권제 6 호통권제 544 호 2005 - 흡연의자극에의해인체기관지상피세포에서 IL-8이 생성되는지의여부와두가지자극이동시에가해질때 부가효과가나타나는지관찰하고자하였다. 방법 : American Type Culture Collection (Manassas, VA) 으로부터제공받은인체기관지상피세포 BEAS- 2B 세포에 RV 감염(MOI=1.0) 과담배연기추출물 (CSE) 로자극을준뒤대조군과비교하였다. 자극후 2hr, 4hr, 6hr, 12hr, 24hr, 48hr 의시간간격을두고저속원심분리 기로분리하여배양상층액을획득한뒤, ELISA kits를 이용하여각각의시간에따라 IL-8의농도를측정하였 고, RT-PCR 을이용하여 IL-8 mrna transcripts 를반 정량적으로분석하였다. 결과 : RV 감염에의한실험군과대조군이각각 12시 간에는 965 pg/ml과 3,489 pg/ml, 24시간에는 1,025 pg/ml 과 3,087 pg/ml 로통계학적으로의미있는차이가 (p<0.05%) 나타났다. CSE의자극에의해서도 12시간에 는 658 pg/ml 과 2,689 pg/ml 로차이가나기시작하여, 24시간에는 1,025 pg/ml 과 3,087 pg/ml 로더욱현저한 차이를보였다. 그리고 RV 감염에의해서는 2,289 pg/ ml, CSE 자극에의해서는 2,987 pg/ml가생성되었으 나, 이두가지자극이동시에주워질때즉, CSE 자극 후 RV 감염시 4,986 pg/ml, RV 감염후 CSE 자극시 3,789 pg/ml 로각각의자극시보다상승효과가나타남 을알수있었다. 결론 : RV 감염이나 CSE의자극에의해인체기관지 상피세포에서호중구를유인하는대표적인사이토카인 인 IL-8 이생성되며, 이두가지자극이동시에가해질 때상승효과가나타나서더심한폐손상을유발할수 있다는추정을할수있었다. 그리고 RV 감염이나흡연 에의한천식이나만성폐쇄성폐질환의급성악화에새 로운치료목표로서 요할것이다. IL-8에대한연구가지속적으로필 색인단어 : 리노바이러스, 담배연기추출액, IL-8, 천 식, 만성폐쇄성폐질환 REFERENCES 1) Adams PF, Hendershot GE, Marano MA. Current estimates from the National Health Interview Survey, 1996. Vital Health Stat 200:1-10, 1999 2) Middleton. Epidemiology of asthma and Allergic disease. In: Erika Avila Tang, Denise G. Wiesch, Jonathan M. Samet eds. Allergy: Principles and Practice. 6th ed. p.1131-1132, St. Louis, Mosby Inc., 2003 3) Pauwels RA, Buist AS, Calverly MA, Jenkins CR, Hurd SS. Global strategy for the diagnosis, management, and prevention of chronic obstructive pulmonary disease. NHLBI/WHO Global Initiative for Chronic Obstructive Lung Disease(GOLD) Workshop summary. Am J Respir Crit Care Med 163:1256-1276, 2001 4) Johnston SL. Natural and experimental rhinovirus infections of the lower respiratory tract. Am J Respir Crit Care Med 152:S46-S52, 1995 5) Nichoson KG, Kent J, Ireland DC. Respiratory viruses and exacerbations of asthma in adults. Br Med J 307:982-986, 1993 6) Seemungal TA, Harper-owen R, Bhowmik A, Jeffries DJ, Wedzicha JA. Detection of rhinovirus in induced sputum at exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease. Eur Respir J 16:677-683, 2000 7) Eric GH, Roland HI Jr. Chronic bronchitis, Emphysema, and Airways obstruction. In: Braunwald E, Fauci AS, Kasper DL, Hauser SL, Longo DL, Jamson JL, eds. Harrison's textbook of medicine. 15th ed. p. 1491-1492, New York, McGraw-Hill, 2001 8) Masubuchi T, Koyama S, Sato E, Takamizawa A, Kubo K, Sekiguchi M, Nagai S, Iz T. Smoke extract stimulates lung epithelial cells to release neutrophil and monocyte chemotactic activity. Am J Pathol 153:1903-1912, 1998 9) Zhu Z, Tang W, Gwaltney JM Jr, Wu Y, Elias JA. Rhinovirus stimulation of interleukin-8 in vivo and in vitro: role of NF-κB. Am J Physiol 273:814-824, 1997 10) Johnston SL, Pattemore PK, Sanderson G, Smith S, Lample F, Josephs L, Symington P, O'Toole S, Myint SH, Tyrrell DAJ, Holgate ST. Community study of role of viral infections in exacerbation of asthma. in 9-11 year old children. Br Med J 310:1225-1229, 1995 11) Turner RB. The role of neutrophils in the pathogenesis of rhinovirus infections. Pediatr Infect Dis J 9:832-835, 1990 12) Stanway G. Rhinoviruses. In: Webster RG and Granoff A, eds. Encyclopedia of virology. 2nd ed. p 1253-1259, London, Academic, 1994 13) Talamini G, Bassi C, Falconi M, Frulloni L, DiFrancesco V, Vaona B, Bovo P, Rigo L, Castagnini A, Angelini G, Vantini I, Pederzoli P, Cavallini G. Cigarette smoking: an independent risk factor in alcoholic pancreatitis Pancreas. 12:131-137, 1996-666 -
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