<30345F D B1E8BEE7C7CF5FC0FAC0DAB1B3C1A4BEF8C0BD2E687770>

Size: px

Start display at page:

Download "<30345F D B1E8BEE7C7CF5FC0FAC0DAB1B3C1A4BEF8C0BD2E687770>"

송희 만
5 years ago
Views:

1 Ginsenoside Rg3 가지방세포분화과정에서 Adipocyte Fatty Acid Binding Protein mrna 발현과 Glycerol-3-phosphate Dehydrogenase 활성에미치는효과 이막순 1 김인환 2 김종태 3 김양하 1* 이화여자대학교식품영양학과 1, 고려대학교식품영양학과 2, 한국식품연구원식품나노바이오연구단 3 Effects of Ginsenoside Rg3 on Adipocyte Fatty Acid Binding Protein mrna Expression and Glycerol-3-phosphate Dehydrogenase Activity during Adipocytes Differentiation Mak-Soon Lee 1, In-Hwan Kim 2, Chong-Tai Kim 3, Yangha Kim 1* Department of Nutritional Science and Food Management, Ewha Womans University, Seoul, Korea 1, Department of Food and Nutrition, Korea University, Seoul, Korea 2, Food NanoBio Research Group, Korea Food Research Institute, Songnam, Gyeonggi, Korea 3 Abstract Objective: This study evaluated the effects of ginsenoside Rg3, a red ginseng component, on the adipogenesis during 3T3-L1 adipocytes differentiation. Methods: 3T3-L1 preadipocytes were differentiated in the presence and absence of ginsenoside Rg3 for 7 days. Cytoplasmic lipid accumulation was assessed by Oil-red O stating. Adipocyte fatty acid binding protein (ap2) mrna expression was measured by real-time PCR. Glycerol-3-phosphate dehydrogenase (GPDH) activity was quantitated by enzymatic method. Results: Ginsenoside Rg3 at concentration of 10 μm did not show any cytotoxic effects. Ginsenoside Rg3 suppressed the lipid accumulation, a marker of adipogenesis, in a time- or dose-dependent manner. The mrna level of ap2, which plays an important role in adipocyte differentiation, was significantly decreased by ginsenoside Rg3 treatmeant (P < 0.05). The activity of glycerol-3-phosphate dehydrogenase (GPDH), an indicator of lipid biosynthesis, was also significantly decreased in a time- or dose-dependent manner (P<0.05). Conclusion: These results suggest that ginsenoside Rg3 inhibits adipogenesis during adipocyte differentiation, which was at least partially mediated via decreased ap2 gene expression and GPDH activity. ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ Key Words: Ginsenoside Rg3, Adipogenesis, Lipid accumulation, AP2 gene expression, GPDH activity. 논문접수일 : , 수정논문접수일 : , 심사완료일 : 책임저자 : 김양하서울서대문구대현동 11-1 이화여자대학교식품영양학과 Tel: , Fax: , yhmoon@ewha.ac.kr

2 Korean J Lipidol 2011;21:67-75 서론 지방세포는체내에너지상태의변화에대응하여중성지방을저장하고유리지방산을방출하여에너지균형과지질항상성을유지하는데중추적인역할을한다. 1 지방세포내에과도한중성지방의축척은비만의원인이되며, 비만은고혈압, 당뇨병, 고지혈증, 심혈관계질환등여러가지질병발생의위험인자중의하나로많은관심이집중되고있다. 2,3 비만의빈도가전세계적으로점차증가하고있으며, 이로인한각종만성질환이환율과사망률이증가되는등비만은건강에대한심각한위협으로사회적인문제가되고있다. 최근에는비만과관련된체중조절분야에서지방축적을억제하고지방분해를촉진하는천연물질에대한연구가활발히진행되고있다. 고려인삼 (Panax ginseng C. A. Meyer) 은다년생숙근초로서식물학적으로오갈피나무과 (Araliacea) 에속하는식물이다. 인삼의주요성분은사포닌을비롯하여정유, 폴리아세틸렌, 페놀성분, 다당체등이있다. 4 인삼의주요생리활성유용성분은복합적인탄수화물의일종인사포닌혹은 ginsenoside 성분으로현재까지 66 종류가알려져있으며고려인삼에는 38 종류가포함되어있다. 5 인삼사포닌구성성분들에대한활발한연구와더불어생리활성작용기전들도많이알려져있다. 6 인삼의여러성분중에 ginsenoside Rg3는백삼에는없고홍삼에서만존재하는특이성분이다. 홍삼제조시변환되는주요사포닌 ginsenoside Rg3는항암, 7 항빈혈, 8 항통증, 9 항비만, 10 항스트레스, 11 면역증강작용, 12 등의생리활성효과가보고되어있다. 현재까지 ginsenoside Rg3의여러가지생리활성효과와작용기전에대한연구결과들이보고되었으나지방세포에서 adipocyte fatty acid binding protein (ap2) 과 glycerol-3- phosphate dehydrogenase (GPDH) 조절기전에대 한연구는아직알려져있지않다. 본연구에서는 3T3-L1 지방세포모델에서 ginsenoside Rg3의세포내지방축적억제효과가지방세포분화를조절하는 ap2 mrna 발현과 GPDH 활성에어떤영향을미치는지중점적으로알아보고자하였다. 재료및방법 1. 3T3-L1 세포배양및분화 3T3-L1 전구지방세포 (ATCC, USA) 는 10% bovine calf serum를함유하는 DMEM (Dulbecco's modified Eagle's medium) 배양액 (100 mm HEPES, 50 IU penicillin, and 50 μg streptomycin/ml) 을사용하여 37, 5% CO 2 조건하에서배양하고배양액은 3일마다교환하였다. 3T3-L1 지방세포의분화를위하여 3T3-L1 지방세포가약 70% 의 confluency를나타낼때분화유도물질 (10 μg/ml insulin, 0.25 μm dexamethasone, 0.5 mm 1-methyl-3-isobutylwanthine) 을첨가시킨 DMEM 배양액으로 2일간지방세포분화를유도한다음 10% fetal bovine serum (FBS) 를함유하는 DMEM 배양액에서 7일간배양하여 80% 이상지방입자축적을확인하였다. 2. 세포독성평가세포독성을평가하기위해 ginsenoside Rg3 (Santa Cruz, USA) 시료를처리한후 cell counting kit-8 (CCK-8, Dojindo Laboratories, Japan) 를이용하여살아있는세포수를측정하였다. 실험조건별처리한세포에 water-soluble tetrazolium salt (WST-8) 를투여하고일정시간동안배양하여세포내미토콘드리아에존재하는 succinate dehydrogenase 에의해생성된수용성 formazan의양을 450 nm 에서비색정량하여세포독성을확인하였다. Ginsenoside Rg3 시료는 dimethyl sulfoxide (DMSO) 에녹인후, 멸균된 0.2 μm filter

3 이막순등 : Ginsenoside Rg3 에의한지방세포분화억제효과 (Millipore, USA) 로여과하여사용하였다. 세포는 96-well plate에 세포수로 seeding하여 37 C, 5% CO 2 조건하에서 24시간배양하였다. Ginsenoside Rg3 시료는 0, 1, 10, 50, 100 μm 농도로첨가하여 37, 5% CO 2 조건하에서 1, 2, 5 및 7일동안각각배양하였다. 분석은 WST-8/1 -methoxy-phenazine methosulfate 용액을각 plate에첨가하여 2시간더배양시킨다음 Varioskan plate reader (Thermo Electron, USA) 로 450 nm에서흡광도를측정하였다. 각세포에대한독성은각각의대조군의평균흡광도값을구하여평균흡광도값에대한백분율로나타내었다. 3. 세포내지방염색및정량지방세포는 phosphate-buffered saline (PBS) 로세척하고 10% formalin/pbs (ph 7.4) 에서세포를고정한후, 0.6% oil red O dye를이용하여축적된지방을염색하였다. 염색된지방함량을측정하기위해서 4% Nonidet P-40 detergent가포함된용액으로용해한후분광광도계를이용하여 520 nm에서흡광도를측정하였다. 지방함량은대조군의평균흡광도값을구하여평균흡광도값에대한백분율로나타내었다. 4. 세포내중성지방농도세포내의중성지방농도는상업용키트 (Asan Pharm, Korea) 를이용하여측정하였다. 세포양의표준화를위한단백질함량은 bicinchoninic acid (BCA) protein assay (Thermo Scientific, USA) kit 를사용하여측정하였다. 5. RNA 추출및 Quantitative Real-time PCR 지방세포로부터의총 RNA 추출은 TRIzol (Invitrogen, USA) 을이용하여 lysis시킨후시료를균질화하였다. 이를 4 에서 12,000 rpm으로 10분간원심분리를통하여상층액을수거한후 이상층액과 phenol: chloroform: isoamylalcohol (25:24:1) 을혼합한다음교반한후 15분정도상온에두었다가맑은상층액만을수거하여 4 에서 12,000 rpm으로 15분간원심분리하였다. RNA 층만새로운튜브에옮기고동량의 100% isopropanol을혼합한후약 15분정도상온에두었다가 4 에서 12,000 rpm으로 15분간원심분리하였다. 상층액을제거하고 RNA pellet에 75% ethanol로세척한후 4, 12,000 rpm으로 5분간원심분리하여총 RNA를추출하였다. 총 RNA로부터 cdna 합성은 moloney murine meukemia virus reverse transcriptase (M-MLV-RTase) 를사용하여 RNA를 reverse transcription하여 cdna를합성하였다. 각각의 cdna는 2X SYBR Green PCR master mix (Qiagen, USA) 와혼합한후, Rotor-Gene RG-3000A (Corbett Research, Australia) 에서 real-time PCR을수행하였다. PCR 증폭을위해사용된 primer는온라인 primer3 프로그램 (primer3_http:// 을사용하여설계하였다. 13 이와같이제작된염기서열은다음과같다 ; ap2 forward 5'-CGACAGGAAGGTGAAGAGCA-3' reverse 5'-ATTCCACCACCAGCTTGTCA-3', β -actin forward 5'-GTTGCCAATAGTGATGACCT-3' reverse 5'-GGACCTGACAGACTACCTCA-3'. 정량분석을위한형광측정은매 PCR cycle 마다측정되었으며유전자발현에대한상대적인정량은 delta-delta Ct 방법을이용하여측정하였다. 6. GPDH 활성 GPDH 활성은 GPDH assay kit (Takara, Japan) 를이용하여측정하였다. 지방세포는 enzyme extraction buffer로분쇄하고 4 에서 10분동안원심분리하였다. GPDH 활성은 NADH 감소를 340 nm 흡광도에서측정하였으며단백질함량으로세포의양을표준화하였다. GPDH 활성값은대조군에대한백분율로표시하였다

4 Korean J Lipidol 2011;21: 통계분석모든실험결과는 SPSS 17.0 (Chicago, USA) 을이용하여통계분석하였다. 분석수치는실험군당평균과표준오차로나타내고, 독립표본 t-검정과일원배치분산분석 (one-way analysis of variance) 을한후 Tukey's multiple range test에의하여 P < 0.05수준에서유의성을검증하였다. 결과 1. Ginsenoside Rg3의세포독성측정 3T3-L1 지방세포에서 ginsenoside Rg3의세포독성을조사하기위해서다양한농도 (0, 1, 10, 50 및 100 μm) 로첨가하여 37 C, 5% CO 2 조건하에서기간별 (1, 2, 5 및 7일 ) 로배양하였다. 세포독성변화는대조군에비해 ginsenoside Rg3 처리군의세포증식의변화정도를백분율로나타내었다 (Fig. 1). 세포생존율은 1, 10 μm ginsenoside Rg3 농도처리군들에서 7일동안유의적인변화가없었다. 그러나 50 μm ginsenoside Rg3 농도이상처리군들에서는처리 2일째부터대조군에 비해세포생존율이유의적으로감소하여 100 μ M의 ginsenoside Rg3 고농도처리군에서는세포독성이나타냄을알수있었다. 따라서본연구에서사용될 ginsenoside Rg3 농도범위는세포생존율에영향을미치지않는 10 μm 농도이내의 ginsenoside Rg3를사용하기로하였다. 2. Ginsenoside Rg3의지질축적억제효과지방세포분화동안에 ginsenoside Rg3 처리에따른지질축적률을측정하기위해 3T3-L1 지방세포에 10 μm ginsenoside Rg3를첨가하여 37 C, 5% CO 2 조건하에서기간별 (2, 5 및 7일 ) 로배양하였다. 지방세포내지질함량측정은 oil-red O 염색에의해세포내지방입자염색한후흡광도를측정하여정량하였다. 지방세포내지질함량은 ginsenoside Rg3 처리 2일, 5일및 7일째대조군에비해각각 9.1%, 14.2% 및 21.9% 감소하였다 (Fig. 2A, 2B). 지방세포내중성지방함량은 ginsenoside Rg3를 7일처리하였을때농도가증가할수록감소하였으며, 10 μm ginsenoside Rg3 처리시대조군에비하여유의적으로감소하였다 (Fig. 3). Fig. 1. Effects of ginsenoside Rg3 on the cell viability. The 3T3-L1 adipocytes were treated with 0 (control), 1, 10, 50, or 100 μm of ginsenoside Rg3, and incubated for 1, 2, 5 or 7 days. Cell viability was determined using a WST-8 assay. Data are expressed as mean ± standard error (n=3). Mean value is significantly different from that of the control treatment

이막순등 : Ginsenoside Rg3 에의한지방세포분화억제효과 A B Fig. 2. Effect of ginsenoside Rg3 on lipid accumulation. The 3T3-L1 adipocytes were treated with 10 μm ginsenoside Rg3 and incubated for 2, 5 or 7 days.

Mean value is significantly different from that of the control treatment. Fig. 3. Effect of ginsenoside Rg3 on triglyceride (TG) content.

5 이막순등 : Ginsenoside Rg3 에의한지방세포분화억제효과 A B Fig. 2. Effect of ginsenoside Rg3 on lipid accumulation. The 3T3-L1 adipocytes were treated with 10 μm ginsenoside Rg3 and incubated for 2, 5 or 7 days. The intracellular oil droplets were stained with oil red O dye (A) and quantified by spectrophotomter (B). Values are expressed as mean±se (n=3). Mean value is significantly different from that of the control treatment. Fig. 3. Effect of ginsenoside Rg3 on triglyceride (TG) content. The cells were incubated for 7 days with different concentration (0 (control), 0.1, 1 or 10 μm) of ginsenoside Rg3. The intracellular TG contents were determined by enzymatic colorimetric methods. Values are expressed as mean±se (n=3). Mean value is significantly different from that of the control treatment. Fig. 4. Effect of ginsenoside Rg3 on ap2 gene expression. The cells were treated with different concentration (0 (control), 0.1, 1 or 10) for 7 days during adipocyte differentiation. The mrna Level of ap2 was measured by quantitative real-time PCR. Values are expressed as mean±se (n=3). Mean value is significantly different from that of the control treatment. 3. Ginsenoside Rg3에의한 ap2 mrna 발현비교 Ginsenoside Rg3 처리가지방합성을조절하는 ap2 mrna 발현에영향을미치는지알아보기위해 3T3-L1 지방세포에 ginsenoside Rg3을농도별 (0, 0.1, 1, 10 μm) 로첨가하여 37, 5% CO 2 조건하에서 7일동안배양하였다. ap2 mrna 발현은 1 μm과 10 μm ginsenoside Rg3의농도처리군에서대조군에비해각각 27.3% 와 64.7% 감소하였다 (Fig. 4). 4. Ginsenoside Rg3 에의한 GPDH 활성비교 Ginsenoside Rg3가지방세포분화동안지방합

6 Korean J Lipidol 2011;21:67-75 Fig. 5. Effect of ginsenoside Rg3 on GPDH activity. The cells were treated with different concentration (0 (control), 0.1, 1 or 10) (A) and incubated for 2, 5 or 7 days (B) of 10 μm ginsenoside Rg3. GPDH activity was determined using a GPDH assay kit. Values are expressed as mean±se (n=3). Mean value is significantly different from that of the control treatment. 성에관여하는 GPDH 효소활성에영향을미치는지측정하였다. 3T3-L1 전구지방세포에분화유도물질과 ginsenoside Rg3을농도별 (0, 0.1, 1, 10 μm) 로첨가하여 7일동안배양하였고, 10 µm ginsenoside Rg3를첨가하여기간별 (2, 5 및 7일 ) 로 37 C, 5% CO 2 조건하에서배양하였다. Ginsenoside Rg3 처리에따른 GPDH 활성은 ginsenoside Rg3의 1 μm과 10 μm 농도에서대조군에비해각각 17.1% 와 30.4% 감소하였으며 (Fig. 5A), 또한지방세포분화기간 5일과 7일째에각각 15.5% 와 28.7% 감소하였다 (Fig. 5B). 고찰 본연구는 3T3-L1 지방세포에서 ginsenoside Rg3의세포내지방축적억제효과기전을연구하기위하여지방세포분화를조절하는 ap2 mrna 발현과 GPDH 활성을측정하였다. 이를위하여 ginsenoside Rg3가함유된배지에서세포생존율을조사한결과처리농도와처리기간이증가할수록세포생존율이감소하는것으로나 타났다. 본연구에서사용한 ginsenoside Rg3 농도는 7일처리기간동안세포독성이보이지않은 10 μm 농도를사용하였다. 이와같은농도를처리하여지방세포내지질축적효과를조사하였고, 그결과 ginsenoside Rg3 처리에의해지방세포분화동안지질축적이감소한다는것을알수있었다. 지방전구세포가지방세포로분화하는과정에는세포의유전자발현양상변화가일어난다. 이분화전사단계에서지방세포특이전사인자들의경우에도분화과정에따라발현량에변화가나타난다. 특히, peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPAR-γ) 와 CCAAT enhancer binding protein alpha (C/EBPα) 는지방전구세포에서지방세포로의분화에있어가장핵심적인기능을담당한다고알려져있는전사조절인자이다. 14,15 지방조직특이유전자로밝혀진 fatty acid binding protein (ap2) 는 PPAR-γ의표적유전자로지방조직에서지방합성에관여하는 adipogenic enzyme 중하나로잘알려져있다 따라서본연구에서는 ginsenoside Rg3가지방분화동안 ap2 발현에어떠한영향을미치는지조사하였다. 3T3-L1-72 -

7 이막순등 : Ginsenoside Rg3 에의한지방세포분화억제효과 지방세포에 ginsenoside Rg3 처리시농도의존적으로 ap2 발현이감소하는것으로나타났다. 이와같은결과는 ginsenoside Rg3가지방산결합단백질 ap2 mrna 발현을저해함으로써지방세포의분화를억제한다는것을시사하고있다. 지방축적에관여하는효소중하나인 GPDH 는지방세포로분화가진행될수록발현이증가하며, 세포내지방축적에관여하는것으로알려져지방분화지표로이용되고있다. 19 본연구에서 ginsenoside Rg3가지방합성에관여하는 GPDH 효소활성에영향을미치는지조사하였다. Ginsenoside Rg3 처리에따른 GPDH 활성은처리시간및처리농도가증가할수록 GPDH 활성이감소하는것으로나타났다. 이결과는 ginsenoside Rg3가지방세포내 GPDH 활성을감소시켜지방합성을억제한다는것을추측할수있다. 최근에 3T3-L1 세포를이용하여전지방세포에서지방세포로의분화에서지방축적을억제하는천연활성물질의작용기전연구를통해항비만선도물질을발굴하고있다. 3T3-L1 세포를이용한 ginsenoside Rg3에대한최근연구결과들을살펴보면, Kim 20 등은 ginsenoside Rg3, Rk1 및 Rg5를포함하는 in vitro-digested ginsenosides 중에서 Rg3가지질축적을억제하는데가장효과가높았다고보고하였고, Hwang 10 등은 ginsenoside Rg3의항비만효과가지방합성전사조절인자인 PPAR-γ 유전자발현을억제하고지방산산화를조절하는 AMP-activated protein kinase (AMPK) 활성화와관련있음을보고하였다. 다른한편으로, Lee 21 등은 ginsenoside Rg3가분화된지방세포에서인슐린신호전달체계의조절하는 insulin receptor substrate-1 (IRS-1)/ phosphatidyl inositol-3 kinase (PI3K) 경로를통한 GLUT4 발현유도로포도당이용률 (glucose uptake) 이개선됨을보여주었다. 이와같이 ginsenoside Rg3는지방세포에서지방대사와당대사조절과정에유익한영향을미치고있다. 본 연구를통해 ginsenoside Rg3 성분의지방축적억제효과가지방세포의지방합성에관여하는 ap2 유전자발현과 GPDH 활성억제와관련이있음을시사하고있다. 현재까지 ginsenoside Rg3 의기능연구를통해비만과지질대사조절기전들이일부규명되고있으나아직까지는매우제한적이다. 이에대해향후세포와동물모델에서보다다양한경로를통한기전들을검증하는추가연구가필요할것으로사료된다. 요약 인삼에함유된 ginsenosides는여러종류가있고, 화학구조에따라약리활성도차이가있으며인삼의열처리로홍삼의 ginsenoside Rg3 함량이증가한다. 본연구에서는 3T3-L1 지방세포모델에서지방세포로의분화과정에서 ginsenoside Rg3의지방축적에대한효과를조사하고이에더하여지방분화를조절하는 ap2 발현과 GPDH 활성에어떤영향을미치는지중점적으로관찰하였다. 지방세포로의분화동안세포내지질축적은 ginsenoside Rg3 처리군에서대조군에비하여유의적으로감소하였다. Ginsenoside Rg3 처리에따라지방산결합단백질 ap2 mrna 수준이유의적으로감소하였고, GPDH 활성또한유의적으로감소하였다. 이러한결과들은 ginsenoside Rg3 성분이지방축적억제효과가있으며, 또한지방세포의중성지방형성에관여하는 ap2와 GPDH을억제하는데작용함을보여주고있다. 이와같은결과들은본연구가 ginsenoside Rg3의지방대사작용기전을이해하는데기초적자료로일부활용할수있을것으로사료된다. 감사의말씀 본논문은한국식품연구원식품고압기술개발

8 Korean J Lipidol 2011;21:67-75 사업 ( WT011) 과한국연구재단기초연구사업 (NRF ) 지원으로수행되었기에이에감사드립니다. 참고문헌 1. Ntambi JM, Kim YC. Adipocyte differentiation and gene expression. J Nutr. 2000;130:S3122-S Kopelman PG. Obesity as a medical problem. Nature 2000;404: Visscher TL. The public health impact of obesity. Annual review of public health 2001;22: Nam KY. The comparative understanding between red ginseng and white ginsengs processed ginsengs (Panax ginseng C. A. Meyer). J Ginseng Res 2005;29: Choi KT. Botanical characteristics, pharmacological effects and medicinal components of Korean Panax ginseng C. A. Meyer. Acta Pharmacol Sin 2008;29: Lü JM, Yao Q, Chen C. Ginseng compounds: an update on their molecular mechanisms and medical applications. Curr Vasc Pharmacol 2009;7: Chen QJ, Zhang MZ, Wang LX. Gensenoside Rg3 inhibits hypoxia-induced VEGF expression in human cancer cells. Cell Physiol Biochem 2010;26: Joo SS, Won TJ, Kim MS, Lee DI. Hematopoietic effect of ginsenoside Rg3 in ICR mouse primary cultures and its application to a biological response modifier. Fitoterapia 2004;75: Rhim H, Kim H, Lee DY, Oh TH, Nah SY. Ginseng and ginsenoside Rg3, a newly identified active ingredient of ginseng, modulate Ca2+ channel currents in rat sensory neurons. Eur J Pharmacol 2002;436: Hwang JT, Lee MS, Kim HJ, Sung MJ, Kim HY, Kim MS, Kwon DY. Antiobesity effect of ginsenoside Rg3 involves the AMPK and PPAR-gamma signal pathways. Phyto ther Res 2009;23: Lee SH, Jung BH, Kim SY, Lee EH, Chung BC. The antistress effect of ginseng total saponin and ginsenoside Rg3 and Rb1 evaluated by brain polyamine level under immobilization stress. Pharmacol Res 2006;54: Keum YS, Han SS, Chun KS, Park KK, Park JH, Lee SK, Surh YJ. Inhibitory effects of the ginsenoside Rg3 on phorbol ester-induced cyclooxygenase-2 expression, NF-kappaB activation and tumor promotion. Mutat Res 2003; : Rozen S, Skaletsky HJ Primer3 on the WWW for general users and for biologist programmers. In Bioinformatics Methods and Protocols: Methods in Molecular Biology (eds. Krawetz, S. and Misener, S), Humana Press, Totowa, New Jersey, pp Rosen ED, Sarraf P, Troy AE, Bradwin G, Moore K, Milstone DS, Spiegelman BM, Mortensen RM. PPAR is required for differentiation of adipose tissue in vivo and in vitro. Mol Cell 1999;4: Wu Z, Rosen ED, Brun R, Hauser S, Adelmant G, Troy AE, McKeon C, Darlington GJ, Spiegelman BM: Cross-regulation of C/EBP alpha and PPAR gamma controls the transcriptional pathway of adipo-genesis and insulin sensitivity. Mol Cell 1999;3: Willson TM, Cobb JE, Cowan DJ, Wiethe RW, Correa ID, Prakash SR, Beck KD, Moore LB, Kliewer SA, Lehmann JM. The structureactivity relationship between peroxisome

9 이막순등 : Ginsenoside Rg3 에의한지방세포분화억제효과 proliferator-activated receptor gamma agonist and the antihyperglycemic activity of thiazolidinediones. J Med Chem 1996;39: Rousseau V, Becker DJ, Ongemba LN, Rahier J, Henquin JC, Brichard SM. Developmental and nutritional changes of ob and PPAR gamma 2 gene expression in rat white adipose tissue. Biochem J 1997;321: Schoonjans K, Staels B, Auwerx J. The peroxisome proliferator activated receptors (PPARs) and their effects on lipid metabolism and adipocyte differentiation. Biochim Biophys Acta 1996;1302: Grégoire FM, Smas CM, Sul HS. Understanding adipocyte differentiation. Physiol Rev 1998;78: Kim SN, Lee JH, Shin H, Son SH, Kim YS. Effects of in vitro-digested ginsenosides on lipid accumulation in 3T3-L1 adipocytes. Planta Med 2009;75: Lee OH, Lee HH, Kim JH, Lee BY. Effect of ginsenosides Rg3 and Re on glucose transport in mature 3T3-L1 adipocytes. Phytother Res 2011;25:

농림수산식품부장관귀하 이보고서를 팥의대사성질환개선및기능성규명 에관한연구의최종보고서로제출 합니다 년 2 월 11 일 - 1 -

농림수산식품부장관귀하 이보고서를 팥의대사성질환개선및기능성규명 에관한연구의최종보고서로제출 합니다. 2013 년 2 월 11 일 - 1 - 연구기관명 : 부산대학교 연구책임자 : 정명호 연구원 : 손용해 연구원 : 장민경 - 2 - Ⅰ. 제목 팥의대사성질환개선및기능성규명 Ⅱ. 연구개발의목적및필요성 팥의대사성질환개선소재발굴과그기능성을과학적으로증명하기위해, 팥의당뇨,