대한임상병리사회지 : 제 21 권저 11 호 1989 최근에동물병원성으로인정된 S.i ntermedius 와 S. hyicus subsp. hyicus 에대한연구 신흥전문대학임상병리과 최승구 안양중앙병원임상병리과 구정서 1. 서료르 전세계적으로개에게물리는사람은대단히많 또한이들중 5-29% 는셰군에의하여감염되는데 그중에서도 S. aureus 가주 Pathogenes 으로써생각해 왔 반면에 S. epidermidis 와 Micrococcus spp. 는비병원 으로생각해왔 그러나최근연구에의하면 S. aureus 와마찬가지로기타 staphylococci 역시중요하 다고나타냈으며, 정확한동정법이필요하다고주장하 고있(6.7) 최근에는 coagulase 양성, 완전용혈, catalase 양성 gram EB 는 S. aureus 로써, 약한용혈능또는비용 혈, coagulase 음성 cocci 는 S. epidermidis 그리고 micrococcus 로동정했 그러나최근분류학적연구 (1, 2, 3, 4, 5, 6) 에서는 20 여가지의 staphy lococci 중에서 coagulase 양성균주 는 S. aureus, S. intermedius, S. hyicus subsp. hyicus 등이포함되며, 이들은 dog, mink, horses, cats 등에서정상균주로써분리되며, Skin, urina ry tract, bone, central nervous system 등에 감염의원인이되는병원성균주로써인식되고있 또한 S. intermedius 와 S. hyicus subsp hyicu!s 는 생화학적반응이 S. aureus 와극히유사한것이특정 이 따라셔임상미생물실험실에서 S. intermedius 와 S. hyicus subsp. hyicus 가 S. aureus 로찰못동정될수 있기때문에우리는 100 마리건강한개의윗잇옴으 로부터분리동정된 53. intermedius 와 S.hyicus subsp. hyicus 를가지고각종미생물학적특성, 항율제감수 성을검사했으며아래와같은결과를얻었기에보고하 는바이 L- II. 실험재료및방법 1989 년 7 월초 C 역부근의애견센터를중심으로하 여총 100 마리의개를대상으로검사에임했 1. 분리동정과정 개의윗엇몽으로부터멸균된면봉으로가검물을 채취했으며, sample 은즉시 mannitol 잃 lt agar(difco) 에접종하여 3 7"C 에서 48-72 시간배양했 일차 배양으로부터얻어진모든집락들은 Gram stain 과 catalse activity 검사를했으며, 72 시간동안배양해서 자란칩략은 bile esculin azide 에접종했 Grampositive, catalase-positive, bile esαllin -negative 의 균주는동정에필요한기타검사를수행했 용혈현상 은 5 % sheep blood 를첨가한 tryptic 잉 y agar 에서 24, 48 시간별로판독하고, coagulase 생성시험은 rabbit plasma 를이용한 tube 법을이용하여검사했 Acetoin 생성시험은 MR -VP broth (Difco ) 를이용 하여 37"C 에서 18-24 시간배양시킨후 5 % a-naphthol 3 방울, 40% KOH 2 방울을첨가한후 15 분후 판독했으며양성은퇴색되지않는 pink - redish 의 nng 을형성하는것을관찰할수있었 더욱이균주들은 API staph-ident 를이용하여확인동정했 staph -Ident kit 는균체로부터접종이되며배양판독의 과정을거쳐 convencial 방법과비교하여동정되었 (5, 6, 7, 8, 9) 표준균주는 A TCC 25923 S. aureus 를사용했 2. 항균제감수성검사 S. intermedius 와 S. hyicus subsp. hyicus 전체는 NCCLS disk 감수성검사를 Muller Hinton 배지를 사용해서검사했 ill. 성 Ã1 Table 1 은분리된 S. intermedius 와 S. hyicus subsp. hyicus 의특성을나타내고있 가검물채 취는 100 마리개로부터채취했으며 71 % male, 39 % female 이었 검사된개의평균나이는 1. 3 살이었 S.intermedius 와 S. hyicus subsp. hyicus 에있어서 steroid hormone, 항생제투여, 개의나이등에는중요한 --, -135-
Table 1. Characteristics of dogs with S. intermedius and S.hyicus subsp. hyicus isolated from gngival surfaces. Age Sex( %) Weight lsolate steroid prior antibiotic % of dogs with history of: % of dogs with habitat (year) M F (kg) Indoor outdoor therapy treatment S.interm 어 ius (12) 0.6 67 33 1.1 75 25 80 20 þ.hyicus subsp.hyicus ( 4 ) 0.8 75 25 1.4 100 0 100 0 Table 2. Microbiological profiles of S. irttermedius and S. hyicus sybsp. hyicus isolated from canine gingival surfaces. S 꾀 tern 빼뼈 (1 2) S.hyicus 하 Jap hyicus(4) Table 3. Bichemical reaction of S.intermedius and S.hyicus subsp hyicus on API -staph -Ident system. lsolate S.int, 하 m 때 ius(n=12) S.hyi 때 s subsp hyicus(n=4) 잃-m -m Table 4. Antibiotic susceptibilities of S.interm 어 ius and S.hyicus subsp hyicus. lsolate S.interm 어 ius (1 2) S.hyicus subsp hyicus(4) m -m-m CF: cephalothin MI: minocine P: penic 피 m TM: tetracycline OX: oxacillin MA: cephamnandole Tob: tobramycin EM: Erythromycin SPT: Trimethoprim -sulfamethoxazole SM: streptomycin 차이점이없었 또한 S. intermedius 가 S. hyicus subsp. hyicus 보다더욱많이분리되었(12%, 4 %) 그리고 S. intermedius, S. hyicus subsp. hyicus 를가지고있는개는집안에서기르는개에게서만히 분리되었 1. 미생물화적륙성 S. intermedius ( 12) 와 S. hyîcus, subsp, hyicus (4) 의미생물학적특징은 Table 2 에서잘나타내고 있 이들균주들은 1007~ 배양중 12% 와 4% 로분리 되었 Coagulase 반응은 24 시간동안배양한후모두양성 반응으로판독했으며 hemolysis, mannitol 분해능에 있어서 S. intermedius 는얼반적으로반응이늦게 catalase 100 100-136-
일어났으며 S. hyicus subsp. hyicus 는 72 시간후에도 반웅이안일어났 S. aureus 로부터 S. intermedius, s.hyicus subsp hyicus 분리는 acetoin 반응으로 명백한분리가가능하 즉, S. aureus 가 100% 생성하는데비하여 S. intermedius, S. hyicus subsp, hyicus 는 0% 를나타냈 S.intermedius 와 s.hyicus subsp. hyicus 차이점은 Mannitol (72 시간 ), Maltase(72 시간 ) Hemolysis ( 48 시간 ) 등으로분리할수있었(100 %, 0 %) 본실혐 의최종동정은 API staph -Ident 와더불어서일반 생화학검사로결정했 2. 약제감수성 S. intermedius 와 S. hyicus subsp hyicus 의항균제 감수성검사는 Table 4 에잘나타나있 S. intermedius 는다양한항균제에높은감수성을보이고있으 며특히야 nicillin 에높은내성을보이는 s. aureus 의 penícillin 내성 pattern 과차이를보이고있 v. 고찰 coagulase 양성포도상구균에는다양한동물중에서 3-72% 의 nasal-oral floras 로써인정됐었 1976 년 Hajek 는생화학적반응과세포벽의 protein 조성등에서 S. aureus 와상이한 S. aureus bioty 야 E 와 F 로써전에분리된바있는, coagulase 양성포도 상구균의 S. intermedius 를언급했다 10)11) R. schulman 등은 S. intermedius 와 S.hyicus subsp. hyicus 는인체와관련된포도상구율이라고동정한 바있다 8) 즉 S. intermedius 와 S. hyicus subsp, hyicus 는 dogs, pigenons, mink, cats, horses 의코와구강에서 발견되며여러동물에있어서 skin, urinary, respiratory, bone, reproductive tract 둥지에서병원성으로 작용한다고한다 8)9) 특히이들균주사이에생화학적 반응이매우유사하여잘못동정이되며 staph -Ident kit 이용시생화학적반웅이불규칙하여판정이애매 모호하기때문에일반 manual 방법과동시에시행 하여최종동정해야한 이는본실험에서도일치했 다 6η) 이들 staphylococcus 율주들은대부분이 penieillin 에내성을가지고이었 A 나약간의논문들은 Penicillin 에감수성이있다는것을주목했다 8) 최근논문에의하면 S. intermedius 와 S. hyicus subsp. hyicus 는야 nicillin 에대하여더욱감수성이 있다는것을제외하면, S. auraus 와유샤한항균제 감수성양성을나타냈는데, 이는본논문도얼치하고 있(92 %, 75 %).8) 분리된모든균주는색소를생성 치않았으며, coagulase 양성그리고 acetoin 음성이었 S. aureus 와 S. intermedius, S. hyicus subsp. hyicus 는 Acetoin 생성실험에의하여명백히분리되 었 API -staph- Ident는 S.intermedius와 S. hyicus subsp.hyicus 동정에있어서우리들의처음동정을 확인동정으로사용했 JEFFREY L. 처럼 7) API system 은 S. intermedius 와 S. hyicus subsp hyicus 의구별에있어서만족할만한결과는나타내지못했 요약을하면 S. intermedius 와 S. hyicus subsp. hyicus 는 Acetion 음성 (0 %, 0 %), phosphatase 양성 (100 %, 100 %) 색소생성능음성등은서로일치한 Mannitol(100 %, 0 %), Maltm 꽁 (100 %, 0 %), Hemolysis( 66%, 0%) 등은서로상이하기때문에 감별의요인으로써작용할수있다고샤료된 N. 결론 1989 년 C 역부근에서 100 마리의캐에서 S. intermedius 와 S.hyicus subsp hyicus 보유율및특성을조사 하기위하여실시한결과다음과같은결과를얻었 1. S. intermedius 와 S. hyicus subsp hyicus 에대한 보유율은각각 12%, 4% 였 2. S. intermedius 와 S.hyicus subsp hyicus 의생물학 적특성은 acetion 음성, Mannitol 의분해가약하거 나음성을나타냈 3. 항균제감수성검사는일반적 로알려진 S. aureus 에비하여 penicillín 감수성올나타냈 4. 연구결과 S. intermedius 와 S. hyicus subsp hyicus 는 S. aureus 와주요생화학적반응이유사하기 때문에잘봇동정가능성이높 그러나, acetoin 검사 Marrnitol, Maltose 분해능 등을실시하면잘봇동정의원인을제거할수있다 고사료된 -137-
s. intermedius and S. hyicus Subsp. hyicus Gingiva: Laboratory characterization of a recognized Zoonotic Pathogens 1n Canine Newly Seung-Gu Choi Dept. of Clinical Pathology, Shinheung Junior college. J oung-seo Koo Dept. of Clinical Pathology, Ahn yang center hospital Abstracts Staphylococcus flora were characterized in cultures with teeth suappings from 100 dogs. staphylococcus intermedius was isolated in 12% of cultures S. intermedius, S. hyicus subsp. hyicus. were differentiated from S. aureus by the following characteristies : acetion ( modifed. vages-proskauer) reaction ( 100 % of s. aureus isolates versus 0 % of the S. intermedius isolates). hemolytic activity on the sheep blood cells at 2 4hr ( 66 versus 0 %), and mannitol fermentation at 72hr( 100 verus 0 %). Drug susceptibility of S. intermedius and S. hyicus subsp. hyicus. were 92 and 75 to penicilline G. we conclude that S. intermedius, S. hyicus subsp. are a common canine gngival flora, will be responsible for some cannineinf1icted human wound infection, thus representing a newly recognized zoonotic pathogens. References 1. Adegoke, G.O. :characteristics of staphylococci isolated from man, poultry, and some other animals. ]. Appl Bacterial., 60:97-102, 1986. 2. Adekeye, J.D.:studies on possible cross tromsmission of mercuric chloride resitant staphylococcus aureus beteween dogs and kennel attendants. Int. ]. zoonoses., 8:72-76, 1981. 3. Biberstein, E.L., S.S.Jang, and D.C.Hirsh:Species distribution of coagulase-positive staphylococci in animals. ].Clin. Microbial., 19:610-615,1984. 4. Hoskin, J.D., S.S. Newman, A.F.Roy, and C.S. Foil: Detection of J3 -lactamase produced by staphyloccus intermedius. Am.]. Vet, Res., 7: 1 526-1528, 1985. 5. Kloos, W.E. and J.F. wolfshohl:identification of staphylococcus species with the API STAP- H-IDENT system.].clin. Microbial., 16:509-51 6, 1982. 6. Raus, J. and D.N. Love:characterization of coagulase-positive staphylococcus aureus isolated from veterinary clinical specimens J. din, Microbiol., 14 : 671-673, 1983. 7. Jeffrey, L.W., J.W. Pankey and S.C. Nickerson: Evaluation of the staph-i dent and SiAPHase system for identification of staphylococci, from bovine infections., 20: 448-452, 1984. 8. David.A.T., D. staaz., S.Andrew., J.C. Ellie., C. Goldstein., S. Katheleen and G.D. Overfurf: staphylococcus intermedius in canine gingiva and canine-inflicted human wound infections: Laboratory characterization of a newly recogniz ed zoonotic pathogen., 27:78-81, 1989. -138-
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