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Lumbar spine

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632 Korean J Lab Med 2010;30:631-6 있어서는장내집락화의유무를조기에검출하여사람간의전파방지및격리를해야한다. 그러므로대변에서의 VRE 선별검사는 VRE의조기검출을위한여러가지선별배지를이용하는것과최근에신속증균 PCR법을사용하는방법등이소개되고있다 [1,


서론 34 2

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12.077~081(A12_이종국).fm

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THE JOURNAL OF KOREAN INSTITUTE OF ELECTROMAGNETIC ENGINEERING AND SCIENCE. vol. 29, no. 10, Oct ,,. 0.5 %.., cm mm FR4 (ε r =4.4)

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주간건강과질병 제 12 권제 16 호 연구단신, Brief report 년국내표본감시기관의료관련감염병 ( 항생제내성균 6 종 ) 발생현황 질병관리본부감염병관리센터의료감염관리과이승재, 이은주, 박현정, 이상은, 김성남, 이형민 * * 교신저자 : s

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Viridans Streptococci 균혈증 247 나이며, 이는류마티스성열, 승모판탈출, 선천성결손, 인공판막등으로인한심장판막손상이나결손이있는사람에서주로발생한다 [4]. 최근에는혈액종양이나고형암또는골수이식등의치료에사용된항암제에따른심각한호중구감소증, 구강점막의궤양등과

674 권순재ㆍ정연중ㆍ윤현진ㆍ목종수ㆍ권지영,.., (Watts et al., 2017)., 70% (Kummerer, 2009). (Witte, 2000)., (Souli et al., 2008)., % ,113 (NIFS, 2017

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Detection of VRE using Melting Curve Analysis 139 재료및방법 Table 1. Multiplex real-time PCR primers for the detection of vancomycin-resistant enterococci

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Kor. J. Aesthet. Cosmetol., 및 자아존중감과 스트레스와도 밀접한 관계가 있고, 만족 정도 에 따라 전반적인 생활에도 영향을 미치므로 신체는 갈수록 개 인적, 사회적 차원에서 중요해지고 있다(안희진, 2010). 따라서 외모만족도는 개인의 신체는 타


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목차 ⅰ ⅲ ⅳ Abstract v Ⅰ Ⅱ Ⅲ i

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목 차 회사현황 1. 회사개요 2. 회사연혁 3. 회사업무영역/업무현황 4. 등록면허보유현황 5. 상훈현황 6. 기술자보유현황 7. 시스템보유현황 주요기술자별 약력 1. 대표이사 2. 임원짂 조직 및 용도별 수행실적 1. 조직 2. 용도별 수행실적

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Kor. J. Aesthet. Cosmetol., 라이프스타일은 개인 생활에 있어 심리적 문화적 사회적 모든 측면의 생활방식과 차이 전체를 말한다. 이러한 라이프스 타일은 사람의 내재된 가치관이나 욕구, 행동 변화를 파악하여 소비행동과 심리를 추측할 수 있고, 개인의


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Evaluation of Phoenix for AST of S. pneumoniae 213 mento, CA, USA) 이사용되고있다. 2000년에 Becton Dickinson에서포도알균, 장알균과그람음성세균의동정과항균제감수성검사를위한 Phoenix Automated

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증례토론 Lab Med Online Vol. 3, No. 4: , October 임상미생물학 대변감시배양에서 vanb PCR 양성이지만 vanb 형반코마이신내성장구균배양음

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Analysis of objective and error source of ski technical championship Jin Su Seok 1, Seoung ki Kang 1 *, Jae Hyung Lee 1, & Won Il Son 2 1 yong in Univ

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Korean J. Food Sci. An. Vol. 33, No. 1, pp. 133~138(2013) DOI http://dx.doi.org/10.5851/kosfa.2013.33.1.133 ARTICLE 시판축산물및수산물에서 Enterococcus faecalis 와 Enterococcus faecium 분포및항생제감수성에관한연구 성창현 천정환 곽효선 1 김현숙 2 서건호 * 건국대학교 KU 식품안전연구센터, 1 식품의약품안전청식중독예방관리과, 2 캘리포니아대학교 (UC DAVIS) 영양학과 Prevalence and Antimicrobial Resistance of Enterococus faecalis and Enterococcus faecium Isolated from Beef, Pork, Chicken and Sashimi Chang-Hyun Sung, Jung-Whan Chon, Hyo-Sun Kwak 1, Hyunsook Kim 2, and Kun-Ho Seo* KU Center for Food Safety, Konkuk University, Seoul 143-701, Korea 1 Foodborne Disease Prevention and Surveillance Division, Korea Food and Drug Administration, Cheongwon-gun 363-700, Korea 2 Department of Nutrition, University of California, Davis 95616, USA Abstract In this study, a total of 256 samples of retail raw meats (beef, pork and chicken) and sashimi were investigated for the presence of Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium. We isolated a total of 117 E. faecalis and E. faecium from the samples, with contamination rates ranging from 18.8% for sashimi samples to 68.8% of chicken samples. E. faecalis was the predominant species recovered from all of the retail raw meats beef (42.2%), pork (42.2%), chicken (65.6%) and sashimi (12.5%). Among 117 isolates, 61 isolates (52.1%) were resistant to tetracycline, 32 isolates (27.4%) were resistant to erythromycin, 23 isolates (19.7%) were resistant to chloramphenicol, 16 isolates (13.7%) were resistant to ripampin, 10 isolates (8.5%) were resistant to gentamycin, 9 isolates (7.7%) were resistant to ciprofloxacin and 1 isolate (0.9%) was resistant to ampicillin and penicillin G. No resistance to amoxicillin + clavulanic acid and vancomycin was observed. Although no strain was resistant to vancomycin, the vanb gene was observed in 9 of 117 of Enterococcus (7.7%) demonstrating potential risk of vancomycin-resistant Enterococcus (VRE). Our results indicate that E. faecalis and E. faecium were highly prevalent in retail raw meats, but most strains were sensitive to tested antibiotics. Key words: Enterococcus, prevalence, antimicrobial resistance, vancomycin-resistant Enterococcus 서 *Corresponding author: Kun-Ho Seo, Department of Public Health, Konkuk University, Seoul 143-701, Korea. Tel: 82-2-450-4121, Fax: 82-2-3436-4182, E-mail: bracstu3@konkuk.ac.kr 론 Enterococcus는그람양성, 통성혐기성세균으로대부분동물의장내정상세균총으로존재하며분변을통해식품및환경에존재가능한균이다 (Kang et al., 2008; Katie et al., 2009). 동물의분변에오염되지않은환경에서는검출되지않으므로대장균과함께식품의분변오염지표세균으로활용된다 (Oh et al., 2008). 하지만최근들어 Enterococcus는중요한병원균으로인식되고있다 (Tailer et al., 1993). Enterococcus는병원내기회감염원인균으로 (nosocomial pathogen) 경우에따라요로계감염, 심내막염, 뇌수막염등을유발할수있다 (Cauwerts et al., 2007; De Fatima Silva Lopes et al., 2005). 더욱이 Enterococcus가여러종류의항생제에대해내성을보이기때문에감염환자의치료가어려운실정이다 (Quednau et al., 1998). 최근들어 Enterococcus의항생제내성양상이전세계적으로높아지는추세이기때문에 Enterococcus의항생제내성양상에대해많은연구가이루어지고있다 (Harwood et al., 2001; Quednau et al., 1998). 특히강력한항생제인 vancomycin에내성을보이는 vancomycin-resistant Enterococcus(VRE) 는 1987년유럽에서출현한이래국내에서도분리균주가급증하는병원내중요한기회감염균이다 (Cha et al., 2010). Aminoglycoside, glycopeptide 및 penicillin 계열의항생제에내성을갖기때 133

134 Korean J. Food Sci. An., Vol. 33, No. 1 (2013) 문에감염환자를치료하기가매우어려울뿐만아니라 (Park et al., 1992; Sood et al., 2008) VRE 내성유전자가 methicillin resistant Staphylococcus aureus(mrsa) 등을포함한다른세균에게전달될가능성이있기때문에임상적으로극히중요시되고있다 (Noble et al., 1992; Schlefer et al., 1987). 원내감염과연관성이높은대표적인 Enterococcus 종으로는 Enterococcus faecalis와 Enterococcus faecium이있으며, 병원뿐아니라축산물, 수산물, 채소류등과같은식품에서도빈번하게분리된다 (Franz et al., 1999; Mandel et al., 1995; Sood et al., 2008). 식품을통한해당균의인체감염및발병가능성은높지않으나, 감염될경우장내정상세균총으로의내성유전자전이가가능하여문제가될수있다 (Chadwick et al., 1996; Kang et al., 2008). 따라서식품에서의 E. faecalis 및 E. faecium의오염률과해당균의항생제내성양상은공중보건학적으로의미가있다. 국제적으로식품에서분리된 Enterococcus 중에서 PCR 을통해 vana gene과 vanb gene을검출하여 VRE의정확한분리연구가이루어지고있으나 (Harwood et al., 2001; Quednau et al., 1998), 국내연구에서는식품중 VRE의검출에대한연구보고가많지않다 (Kang et al., 2008). 또한디스크확산법이나 minimum inhibitory concentration (MIC) test를활용하여실제로내성을보이는 Enterococcus 만검출하므로, 잠재적위험성이있는 vana gene과 vanb gene의분포에대해서는충분한정보를제공하지못하고있다 (Ham, 2007; Kang et al., 2008; Oh et al., 2008; Park et al., 1992; Park et al., 2006). 최근임상의학에서는 VRE 의유전자형과항생제내성표현형이일치하지않는경우가보고되고있어 (Cha et al., 2010; Park et al., 2006), 식품에서분리된균주에대해서도 VRE 검출에대한표현형과유전형을모두확인하는심도있는연구가요구된다. Enterococcus 의분리및 VRE의검출에관한연구는채소, 건해산물, 생식등다양한식품에서수행되어왔으나 (Ham, 2007; Kang et al., 2008; Kim et al., 2007), 축산식품과수산식품에서의 Entercoccus에대한연구는국내에서많이이루어지지않은실정이다. 따라서본연구에서는서울시내에서시판되는소고기, 돼지고기, 닭고기등의신선육류와다양한횟감어류로부터 E. faecalis와 E. faecium 을분리하고디스크확산법을통해 10종의항생제에대한내성양상을분석하였다. 분리된균주의 vana gene과 vanb gene의보유여부를확인하여 VRE 검출에대한표현형과유전형을모두확인함으로써식품의 Enterococcus 오염관리와항생제내성균위험평가의중요한기초자료를제공하고자하였다. 재료및방법 실험에사용된시료 2010년 1월부터 9월까지 16차례에걸쳐서울시광진구, 중랑구, 성동구, 강동구내에있는대형마트, 슈퍼마켓, 재래시장, 정육점, 횟집등총 256곳의개별판매점에서축산물과수산물을구입하였다. 시료는 1월, 4월, 7월, 9월에각계절별로 64건씩수집하였으며, 계절별 64건은각 4개의지역구당 16개씩구매하여수집하였다. 축종별시료수는축산물의경우소고기, 돼지고기, 닭고기각 64개씩 192 개였으며, 수산물은횟감어류로서광어, 우럭, 도미, 농어각 16개씩 64개로총 256개의시료를사용하였다. 구입한모든시료는구입직후냉장포장하여 1시간내에실험실로옮기고, 4 o C에서냉장보관하여 4시간내에실험에사용하였다. E. faecalis와 E. faecium의분리및동정시료에서 E. faecalis, E. faecium을분리하기위해서샘플을 25 g씩채취한뒤 225 ml의 azide-dextrose broth(merck, Germany) 에넣어주었다. Stomacher(Interscience TM, USA) 로 30초간균질화한후 37 o C에서 24시간동안증균배양하였다. 증균배양액을 bromocresol purple azide broth (Merck) 9 ml에 1mL 접종하고 37 o C에서 48시간동안배양하여노란색으로색이변한 broth를선택하여 enterococcosel agar(oxoid, UK) 에획선도말하여 37 o C에서 24 시간동안배양하였다. 검은색을띄는집락을선택하여 laked horse blood(oxoid) 가 5% 함유된 blood agar에 37 o C 에서 24시간동안배양후 catalase 음성, oxidase 음성집락에한하여 VITEK2(BioMerieux, France) 로생화학적확인동정을실시하였다. 분리된균주는추가적인실험에사용되기전까지 -70 o C에서동결보존하였다. 항생제감수성시험모든항생제내성시험은 National Committee for Clinical Laboratory Standard(NCCLS, 2004) 의기준에맞추어수행하였으며아래와같다. 분리된균주를 Mueller-Hinton broth(mhb; Difco, USA) 에접종하여 37 o C에서 24시간동안배양한후배양액을멸균된생리식염수로희석한뒤 densichek plus TM (BioMerieux) 를이용하여탁도기준을 MacFarland 0.5로맞추었다. 멸균된면봉에배양액을묻혀 Mueller-Hinton Agar(MHA; Difco) 에고르게도말하고, 15 분후 Disc dispenser(oxoid) 를이용하여항생제디스크를부착시킨뒤 37 o C에서 18시간동안배양하였다. 사용된항생제디스크는 ampicillin(amp, 10 µg, Oxoid), amoxicillin/ clavulanic acid(amc, 30 µg, Oxoid), chloramphenicol(c, 30 µg, Oxoid), ciprofloxacin(cip, 5 µg, Oxoid), erythromycin (E, 15 µg, Oxoid), gentamycin(cn, 10 µg, Oxoid), penicillin

Antimicrobial Resistance of Enterococus spp. in Meat Products 135 G(P, 10 µg, Oxoid), rifampicin(rd, 5 µg, Oxoid), tetracycline(te, 30 µg, Oxoid), vancomycin(va, 30 µg, Oxoid) 등총 10종류였으며배양후억제대의크기를측정하여 NCCLS 기준과비교하여내성, 중간내성및감수성을판정하였다. Vancomycin 내성유전자의검출분리된모든균주의 vana gene 및 vanb gene 보유여부를 multiplex PCR로분석하였다. DNA추출은중탕가열법 (boiling method) 을이용하였으며상층액의 DNA농도는 20-90 ng/µl가되도록조절하였다. Primer 시퀀스와 PCR 조건은 Cha 등 (2010) 의연구와동일하게사용하였다. vana gene과 vanb gene의 primer sequence는 vana는, forward- TATTGACTTCGTTCAGTACA, reverse-tgtggatatgtt- TTTACAAG를사용하였고, vanb는 forward-cagaccctg- TATCGCACCAT, reverse-aacggcgtatggaagctatg를사용하였다. 양성대조군으로해당유전자를지닌 E. faecium ATCC 700221(vanA) 와 E. faecalis ATCC 51299(vanB) 를사용하였다. PCR반응은 Maxime PCR PreMix Kit (intron, Seongnam, Korea) 에 2µL의 primer 혼합액 (vana primer, 0.8 µm; vanb primer 0.2 µm), 16 µl의증류수, 2 µl의 DNA template를넣어반응액 20 µl를제조하여 multiplex PCR을실시하였다. 94 o C에서 2분반응후 94 o C에서 20초, 53 o C에서 10초, 72 o C에서 30초의반응을 40회반복하였고최종연장반응을 72 o C에서 2분동안시행하였다. 최종반응산물은 2% agarose gel에서전기영동하여해당되는밴드의유무를확인하였다. 결과및고찰 E. faecalis와 E. faecium의분리율구입한축산물과수산물에서의 E. faecalis와 E. faecium 분리율은 Table 1에제시되어있다. 총 256개시료중 117 개에서 E. faecalis 또는 E. faecium가검출되어 45.7% 의분리율을나타내었다. 균주에따라비교해보면 E. faecalis 가 104개균주 (40.6%), E. faecium가 13개균주 (5.1%) 로써 E. faecalis가 8배높은분리율을보였다. 그중축산물은 192개중 105개균주가분리되어 54.7% 의분리율을나타내었다. 시료의종류에따라비교해보면닭고기에서 64개 Table 1. Prevalence of E. faecalis and E. faecium in meats and sashimi Samples (No. of samples) No. of isolates (%) E. faecalis E. faecium Total Beef (64) 27 (42.2) 2 (3.1) 29 (45.3) Pork (64) 27 (42.2) 5 (7.8) 32 (50.0) Chicken (64) 42 (65.6) 2 (3.1) 44 (68.8) Sashimi (64) 8 (12.5) 4 (6.3) 12 (18.8) Total (256) 104 (40.6) 13 (5.1) 117 (45.7) 중 44개균주가분리되어가장높은 68.8% 의분리율을나타내었고돼지고기에서 64개중 32개균주가분리되어 50.0% 의분리율을, 쇠고기에서 64개중 29개균주가분리되어 45.3% 의분리율을나타내었다. 수산물시료로사용된횟감어류에서는 64개중 12개균주가분리되어 18.8% 의분리율을나타내었다. 축산물에서 Enterococcus를분리한국외연구에서는 Pavia 등 (2000) 이이탈리아에서시판되는쇠고기, 돼지고기, 닭고기, 칠면조, 양고기등 100개의샘플에서 45개의 Enterococcus 를분리하였는데그중 E. faecalis가 16개균주 (16%), E. faecium이 15개균주 (15%) 로서총 31% 의분리율을나타내었다. Klein 등 (1998) 은독일에서판매되는쇠고기와돼지고기 555개의샘플에서 209개의 Enterococcus를분리하였는데그중 E. faecalis가 182개균주 (32.8%), E. faecium 이 8개균주 (1.4%) 로서두균은총 34.2% 의분리율을나타내었다. Quednau 등 (1998) 은스웨덴과덴마크에서시판되는돼지고기와닭고기 115개의샘플에서각샘플당 5개씩의균주를분리한결과 277개의 Enterococcus를분리하였는데그중 E. faecalis가 56개균주 (9.7%), E. faecium 이 77개균주 (13.4%) 로서두균은총 23.1% 의분리율을나타내었다. 이처럼 E. faecalis와 E. faecium의분리율은각연구마다다양한차이를보였으며본연구결과는이들연구결과와비교해볼때분리율이다소높은편이였다. Enterococcus가축산물의위생지표세균으로도활용된다는점에서 (Lee et al., 2009), 본연구결과는국내축산물위생수준의개선이필요함을나타내고있다. 수산물에서 Enterococcus를분리한국내연구에서는 Ham(2007) 이시판되는 164개의건조해산물에서 87개의 Enterococcus를분리하여 53.0% 의분리율을보고하였다. Oh 등 (2008) 이어류양식장에서채취한 66개의수산물에서 25개의 Enterococcus spp. 를분리하여 37.9% 의분리율을보고하였으며종별로는 E. faecalis가 14개균주 (21.2%), E. faecum이 8개균주 (12.5%) 였다. 이들연구와비교해볼때본연구결과에서는분리율이비교적낮았다. 이는시료의차이에의한것으로보여지는데 Ham(2007) 의연구에서는건조해산물을, Oh 등 (2008) 의연구에서는내장과아가미와같은비가식부위를시료로사용하였다. 주로육상에서유래되는 Entercoccus가수산물에서일정수준으로분리되는것은유통및조리과정에서오염되었을가능성이높다. 횟감어류를비롯한수산물은가열과정없이섭취되는경우가많으며, 손질및가공과정에서교차오염의가능성때문에 Enterococcus뿐만아니라식중독세균의감염위험성이높다 (Sung et al., 2010). 분리된균주의항생제내성양상분리된 117개 E. faecalis와 E. faecium에대한항생제감수성및내성양상은 Table 2에제시되어있다. Tetracy-

136 Korean J. Food Sci. An., Vol. 33, No. 1 (2013) Table 2. Antibiotic resistance patterns of E. faecalis and E. faecium (n= 117) isolated from meats and sashimi Antibiotics No. of isolates (%) Susceptible Intermediate Resistant Ampicillin 116 (99.1) 0 (0) 1 (0.9) Gentamycin 105 (89.8) 2 (1.7) 10 (8.5) Amoxicillin + clavulanic acid 117 (100) 0 (0) 0 (0) Ciprofloxacin 73 (62.4) 35 (29.9) 9 (7.7) Penicillin 116 (99.1) 0 (0) 1 (0.9) Rifampin 43 (36.7) 58 (49.6) 16 (13.7) Erythromycin 41 (35.0) 44 (37.6) 32 (27.4) Vancomycin 103 (88) 14 (12.0) 0 (0) Chloramphenicol 87 (74.3) 7 (6.0) 23 (19.7) Tetracycline 44 (37.6) 12 (10.3) 61 (52.1) cline의내성률이 52.1% 로가장높았으며, erythromycin의내성률이 27.4% 로두번째로높았다. Chloramphenicol과 rifampin의내성률은각각 19.7%, 13.7% 으로나타났다. 중간내성률 (intermediate resistance) 은 rifampin이 49.6%, erythromycin이 37.6% 로높은수준으로나타났다. Ampicillin과 penicillin는 1개의균주를제외하고는모두감수성을보였으며, amoxicillin + clavulanic acid에는모든균주가감수성을보였다. 모든균은 vancomycin에감수성을보여 vancomycin에내성을나타내는 VRE는한균주도검출되지않았다. 분리된 117개의균주중 74.4% 인 87개의균주들이 1가지이상의항생제에내성을보였으며 3가지계열이상의항생제에내성을보이는균은전체 117균주중 17.1% 인 20균주였다. 4가지계열의항생제에내성을보이는균주는 4균주 (3.4%), 5가지계열의항생제에내성을보이는균주는 2균주 (1.7%) 로나타났다. 분리된 Enterococcus를이용하여항생제내성양상을파악한연구를살펴보면 Pavia 등 (2000) 이이탈리아에서축산물에서분리한 Enterococcus의항생제내성양상을 14종의항생제를이용하여연구한결과 tetracycline에 84.4% 내성, erythromycin에 75.6% 내성, gentamycin에 66.7% 내성, vancomycin에 64.4% 내성, ciprofloxacin에 55.6% 내성, chloramphenicol 42.2% 내성, ampicillin에 17.8% 내성, rifampin에 15.6% 의내성을나타내었다고보고하였다. 본연구결과와비교해볼때 Pavia 등 (2000) 의연구결과에서는대부분항생제내성률이본연구결과보다매우높은경향을보였고, rifampin의내성률은비슷한수준이었다. 반면에 Klein 등 (1998) 이독일에서축산물에서분리한 Enterococcus의항생제내성양상을연구한결과, tetracycline 에 20.1% 내성, erythromycin에 17% 내성, ciprofloxacin에 3.8% 내성, chloramphenicol에 1% 내성, penicillin에 0.5% 내성을나타내었으며, ampicillin, amoxicillin + clavulanic acid, gentamycin, vancomycin에내성을나타내는균주는없었다고보고하였다. Gentamycin, ciprofloxacin, erythromycin, chloramphenicol, tetracycline의내성률이본연구결과보다낮은경향을보였고, 나머지항생제의내성률은본연구결과와비슷한경향을보였다. Tetracycline의내성률이대부분의연구에서가장높은수준으로나타났는데이는 tetracycline계열의항생제가가축에서가장흔하게사용되는항생제이기때문에 (Lee et al., 2009) 장내세균인 Enterococcus가해당항생제에대해높은수준의내성을 획득한것으로보인다. 본연구와비교하여다른연구가수행된국가및지역에따라 Enterococcus의항생제내성양상이많은차이를보였는데이는장내세균의항생제노출정도와사용실태의차이에의한것으로추정된다 (Kang et al., 2008). 축산농가및양식장에서항생제의오남용이늘어날경우여러항생제내성유전자의전파로인해 Enterococcus뿐만아니라병원성세균의항생제내성률이높아질가능성이있으므로항생제의신중한사용이요구된다. 또한내성유전자를보유한세균이식품을통해인체로감염될경우장내정상세균총의부정적변화와체내병원성세균의항생제내성률증가로심각한공중보건학적위험을초래할수있다 (Kummerer, 2003; Lee et al., 2009). Vancomycin 내성유전자의검출분리된 117개의 E. faecalis와 E. faecium의 vana gene 및 vanb gene 보유여부를 multiplex PCR로분석한결과, vana gene을보유한균주는없었으며, vanb gene을보유한균주는 9개로나타났다 (Fig. 1). 그러나 vanb gene을보유한이들 9개균주도모두항생제디스크검사에서 vancomycin에감수성을나타냈다. VRE의유전형과항생제내성표현형에대한연구는임상의학분야에서주로이루어졌으며, 본연구의결과와같이유전형과표현형이일치하지않는경우가임상분리균주에서많이보고되었다 (Cha et al., 2010; Park et al., 2006). 본연구에서분리된균주처럼표현형은없으나내 Fig. 1. Agarose gel electrophoresis showing PCR product with vanb primer from isolated E. feacalis and E. faecium in meat and sashimi.

Antimicrobial Resistance of Enterococus spp. in Meat Products 137 성유전자를가진균주의경우, 추후에 vancomycin 내성표현형이발현되거나내성유전자가다른세균에게전파될가능성이있어 (Noble et al., 1992; Schlefer et al., 1987) 잠재적위해가능성을염두에두어야한다. Enterococcus는항생제내성과관련이깊은기회감염균임에도불구하고식중독균이아니라는이유로임상분야가아닌식품분야에서는폭넓게다루어지지않았다. 특히국외에비해국내에서는연구가많이이루어지지않았으며특히축산물과수산물에서는자료가매우부족한실정이다. 본연구에서는시판축산물및수산물에서 E. faecalis 와 E. faecium을검출하였고이에대한항생제내성과관련유전자를관찰하였다. 특히수산물의경우, 조리되지않고섭취되어실질적으로균의감염위험이큰생선회를대상으로하였다. 전반적으로분리된균의항생제내성양상은국외의다른연구결과에비해우려할만한수준은아니었으며특히 vancomycin에내성을보이는 VRE는한균주도검출되지않았다. 그러나 multiplex PCR을이용하여 vancomycin 내성유전자보유여부를확인하였을때, vancomycin에감수성을나타내던 9개의균주에서 vanb gene이검출되었다. 이러한잠재적내성균주의검출은디스크확산법이나 MIC test로는한계가있으므로 (Harwood et al., 2001; Quednau et al., 1998), 향후식품내 VRE를검출할경우본연구와같이표현형과유전형을모두고려한다각적인분석이필요할것으로보인다. 한편항생제내성률을감소시키기위하여축산선진국에서는오래전부터항생제오남용에의한내성균출현모니터링을실시하고그결과에따라항생제사용을규제하고있는점을고려하여 (Kim et al., 2011) 향후국내에서도축산물및수산물등식품에서유래한 Enterococcus의항생제내성양상에대한지속적이고심도있는모니터링이필요할것으로보인다. 축산물과수산물의 Enterococcus 오염도및항생제내성균양상과 VRE 표현형과유전형의상관관계를분석한본연구의결과는향후축산물및수산물섭취가인체건강에미치는위험평가 (risk analysis) 의중요한기초자료가될것이다. 요약본연구에서는서울시내 256곳의판매점에서구입한축산물및수산물에서 Enterococcus faecalis 와 Enterococcus facium을분리하였으며분리된균주의항생제내성양상과 vancomycin 내성유전자보유여부를검증하였다. 총 256개시료중 117개에서 E. faecalis(40.6%) 와 E. faecium(5.1%) 가검출되어 45.7% 의분리율을나타내었다. 축산물은 192 개중 105개균주가분리되어 54.7% 의분리율을나타내었는데닭고기에서가장높은 68.8% 의분리율을, 돼지고기에서 50.0% 의분리율을, 쇠고기에서 45.3% 의분리율을 나타내었다. 횟감어류에서는 18.8% 의분리율을나타내었다. 분리된균주에대한항생제내성양상은 10종의항생제디스크를이용하여검증하였다. Tetracycline의내성률이 52.1% 로가장높았으며, erythromycin의내성률이 27.4% 로두번째로높게나타났다. Ampicillin과 penicillin는 1개 의균주를제외하고는모두감수성을보였으며, amoxicillin & clavulanic acid에는모든균주가감수성을보였다. Vancomycin에는모든균주가감수성을보여 VRE는검출되지않았다. 분리된균주의 vancomycin 내성유전자의검출은 multiplex PCR을이용하여 vana gene과 vanb gene 보유여부를확인하였다. vana gene이검출된균주는없었으나, vancomycin에감수성을나타내던 9개의균주에서 vanb gene이검출되어 VRE균출현의잠재적인가능성을보여주었다. 감사의글 본연구는 2010년도식약청용역사업 (10162항생제112) 의연구비지원과 2012년도교과부재원으로한국연구재단 (No. 2012R1A2A2A01015344) 의지원을받아수행되었으며이에감사드립니다. 저자인천정환은 Brain Korea 21 (BK21) 사업의부분적인지원을받았습니다. 또한실험에도움을아끼지않은송광영, 현지연, 김윤경, 박준호, 이재훈, 김선영님께감사합니다. 참고문헌 1. Cauwerts, K., Decostere, A., De Graef, E. M., Haesebrouck, F., and Pasmans, F. (2007) High prevalence of tetracycline resistance in Enterococcus isolates from broilers carrying the erm(b) gene. Avian Pathol. 36, 395-399. 2. Cha, C. H., An, H. K., and Kim, J. U. (2010) Detection of vancomycin-resistant enterococci using multiplex real-time PCR assay and melting curve analysis. Korean J. Lab. Med. 30, 138-146. 3. Chadwick, P. R., Woodford, N., Kaczmarski, B., Gray, S., Barrell, R. A., and Oppenheim, B. A. (1996) Glycopeptide resistant enterococci isolated from uncooked meat. J. Antimicrob. Chemother. 38, 908-909. 4. De Fatima Silva Lopes, M., Ribeiro, T., Abrantes, M., Figueiredo Marques, J. J., Tenreiro, R., and Crespo, M. T. (2005) Antimicrobial resistance profiles of dairy and clinical isolates and type strains of enterococci. Int. J. Food Microbiol. 103, 191-198. 5. Franz, C. M., Holzapfel, W. H., and Stiles, M.E. (1999) enterococci at the crossroads of food safety. Int. J. Food Microbiol. 47, 1-24. 6. Ham, H. J. (2007) E. faecalis and E. faecium isolated in dried marine products. J. Fd. Hyg. Safety 22, 294-299. 7. Harwood, V. J., Brownell, M., Perusek, W., and Whitlock, J. E. (2001) Vancomycin-resistant Enterococcus spp. isolated

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