대한진단검사의학회지 : 제 25 권제 6 호 2005 Korean J Lab Med 2005; 25: 399-405 임상미생물학 요검체에서분리된 Providencia rettgeri 에서 VIM-2형 Metallo- -Lactamase의생성 김정민 신경섭 1 경북대학교의과대학미생물학교실, 충북대학교의과대학진단검사의학교실 1 Production of VIM-2 Type Metallo- -Lactamase in Urinary Isolates of Providencia rettgeri Jungmin Kim, M.D. and Kyeong Seob Shin, M.D. 1 Department of Microbiology, Kyungpook National University School of Medicine, Daegu; Department of Laboratory Medicine, Chungbuk National University College of Medicine 1, Cheongju, Korea Background : VIM-2 type metallo- -lactamase (MBL) producing strains are presently spreading to Pseudomonas spp., Acinetobacter spp. and even to Enterobacteriaceae such as Serratia marcescens, Enterobacter cloacae and Klebsiella pneumoniae in Korea. Recently we determined the phenotype and the genotype of three MBL-producing Providencia rettgeri isolated from urinary specimen of three patients with neurosurgical ward, and analyzed the bla VIM-2 containing integron of a P. rettgeri CBU852. Methods : EDTA-disk synergy test was used for the screening of MBL, and the PCR for bla IMP-1, bla VIM-1 and bla VIM-2 was performed. The minimal inhibitory concentration of those isolates was determined by broth microdilution method, and the genomic DNA fingerprinting analysis was performed by random amplified polymorphic DNA (RAPD). The sequence of the bla VIM-2 containing integron was determined. Results : Three P. rettgeri with reduced imipenem susceptibility showed the positive EDTA-disk synergy test and bla VIM-2 was detected by PCR. Antimicrobial susceptibility test showed the resistance to all -lactams tested, ciprofloxacin and aminoglycoside such as gentamicin, tobramycin and amikacin, indicating multidrug resistance of those isolates. RAPD analysis showed the identical DNA fingerprint of those three isolates. The novel class 1 integron, including aaca4, bla VIM-2, orf ii and orf iii, was detected in a P. rettgeri CBU852. Conclusions : In this study, the multidrug resistant P. rettgeri CBU852 had blavim-2 containing novel class 1 integron. The emergence of bla VIM-2 producing P. rettgeri could compromise the use of carbapenem in treatment of infections caused by MBL producing bacteria. To our knowledge, this is the first report that VIM-2 MBL gene has been detected in P. rettgeri. (Korean J Lab Med 2005; 25: 399-405) Key Words : Metallo- -lactamase, VIM-2, Providencia rettgeri 접수 : 2005년 7월 1일접수번호 : KJLM1864 수정본접수 : 2005년 9월 2일교신저자 : 신경섭우 361-711 충북청주시흥덕구개신동산 62 충북대학교병원진단검사의학과전화 : 043-269-6240, Fax: 043-271-5243 E-mail : ksshin@chungbuk.ac.kr * 본논문은 2004년도충북대학교학술연구지원사업의연구비에의해연구되었음. 서론 Providencia는원내감염을일으키는주요그람음성간균으로현재까지 P. alcalifaciens, P. heimbachae, P. rettgeri, P. rustigianii 및 P. stuartii 등 5종으로구분되며이중 P. rettgeri는항상요소를가수분해하며, 가축, 파충류, 양서류의대변그리고지표수등자연계에널리분포하고있다 [1]. 이균은요로도관에 399
400 김정민 신경섭 집락을쉽게형성하여장기입원환자나비뇨기계질환이있는노인에서흔히감염을일으킬수있다 [2, 3]. P. rettgeri는 P. stuartii보다 aminoglycoside, cephalosporin 및페니실린계항균제에대한내성률이낮으며, 다제내성인경우도드물다 [4]. Metallo- -lactamase (MBL) 는 monobactam 항균제를제외한대부분의 -lactam 항균제를가수분해할수있어이들균에의한감염의치료에큰문제를야기할수있다. 또한 MBL 유전자는 integron이라는이동성유전자 (mobile DNA element) 에의해장소 -특이적재조합 (site-specific recombination) 으로포획되어기능이발현되며다른균으로쉽게전달될수도있다 [5]. 현재까지 4종류의 MBL (IMP, VIM, SPM, GIM) 이알려져있으며, 이중 IMP형및 VIM형이전세계적으로널리분포되어있다 [6]. VIM-1 형및 VIM-2 형 MBL은각각이탈리아 [7] 및프랑스 [8] 에서 Pseudomonas aeruginosa로부터분리된이래유럽, 아시아및북아메리카등에서다양한종으로부터도분리되었다 [6]. 국내에서는 1995년에분리된 P. aeruginosa에서 VIM-2형이 2002년처음보고되었다 [9]. 국내에서분리되는 MBL 생성균은대부분 VIM-2형으로알려져있으며 IMP-1형도보고되고있다 [10, 11]. VIM-2형 MBL은 P. aeruginosa 및 Acinetobacter species를포함한포도당비발효균에서주로분리되었으나최근에장내세균에서도분리되고있다. 국내에서는 Serratia marcescens[12], Enterobacter cloacae[13], Klebsiella pneumoniae[14] 등에서 VIM-2형이분리되었으며, 그리스에서는 Escherichia coli에서도 VIM-2형 MBL이분리되었다 [15]. 이와같은 MBL 유전자의장내세균으로의확산은이들균에의한감염에서 carbapenem을포함한대부분의 -lactam제의역할을무력화할수도있을것이다. 한대학병원의신경외과병동에입원중인 3명의환자소변에서 imipenem에내성인 P. rettgeri가분리되어이들균주를대상으로 MBL 생성여부와유전형을결정하였으며, 이균들의표현형과유전형의특성을규명하기위하여항균제감수성검사, random amplified polymorphic DNA (RAPD) 분석및 integron 구조분석을시행하였다. Phamaceutical, Seoul), cefoxitin (Choongwae Phamaceutical, Seoul), cefotaxime (Jeiljedang Pharmaceutical, Seoul), ceftazidime (Jeiljedang Pharmaceutical, Seoul), cefepime (Bayer Korea, Seoul), aztreonam (Bristol-Myers Squibb, Prinston, NJ, USA), gentamicin (Dong Shin Pharmaceutical, Seoul), tobramycin (Daewoong-Lilly, Seoul), amikacin (Boryeong Pharmaceutical, Seoul), ciprofloxacin (Bayer Korea, Seoul) 이었다. 정도관리를위하여 E. coli ATCC 25922와 P. aeruginosa ATCC 27853을사용하였다. 2. MBL 생성선별및유전형검사 MBL 생성유무를검출하기위해 EDTA-disk synergy test를 Lee 등 [17] 의방법대로시행하였는데, 간략히약술하면다음과같다. 하룻밤동안배양한균주를 McFarland 0.5로희석하여 Mueller-Hinton 배지에접종하였다. 10 g imipenem 디스크와 0.5 M EDTA 용액 10 L를떨어뜨린디스크를디스크간거리가 10 mm되게하여 16-18시간배양하여두디스크사이에새로운억제대가생기거나억제대가커지면양성으로판정하였다. MBL 유전자를검출하기위하여 bla IMP-1, bla VIM-1 및 bla VIM-2 유전자에대한 PCR을시행하였다. 사용한시발체는기존문헌 [8] 을참고하여제작하였으며, DNA 는증류수 1 ml에 1-2 개의균집락을넣고 100 에서 15분간끓인후상층액을이용하였다. PCR 반응을위하여 DNA 1 L, dntp 200 M, MgCl 2 1.5 mm, primer 각각 20 pmol, Taq DNA polymerase (Bioneer, Cheongwon) 2.5 U 및반응완충용액 (100 mm Tris-HCl, 400 mm KCl, 15 mm MgCl 2 ) 5 L에총부피가 50 L되게증류수를첨가하였다. DNA의증폭은 PTC-200 Thermal cycler (MJ Research, Waltham, MA, USA) 를이용하였으며, 94 에서 8분동안변성시킨후 94 에서 30초, 58.5 에서 30초, 72 에서 45초로 30회증폭하였다. 마지막으로 72 에서 7분간연장반응을시켰다. 증폭산물은 2% 아가로스겔에서 100 V로 40분동안전기영동후판독하였다. 재료및방법 3. 접합에의한내성전달 1. 대상균주및감수성검사 2004년 5월부터 7월사이에 imipenem에내성인 P. rettgeri가같은신경외과병실에입원해있는 3명의환자소변검체에서 3균주 (CBU 852, 1162, 130) 가분리되었다. 최소억제농도 (MIC) 는미량액체배지희석법 [16] 으로측정하였으며시험한항균제는 imipenem (Merk/Sharp & Dohme, Rahway, NJ, USA), meropenem (Yuhanyanghang Pharmaceutical, Seoul), ampicillin (Yung Jin Pharmaceutical, Seoul), piperacillin (Yuhanyanghang Pharmaceutical, Seoul), cefazolin (Chong Kun Dang Jacoby 및 Han의방법 [18] 을참조하여시험하였다. Azide-내성인 E. coli J53을내성수여자로사용하였다. 공여자 (MBL 생성 P. rettgeri) 와수여자를각각 brain heart infusion (Becton Dickinson & Co., Cockeysville, MD, USA) 액체배지에접종하여 3시간동안진탕배양하였다. 공여자배양액 0.2 ml와수여자배양액 2.2 ml를시험관에넣어서 37 로 1시간배양후, ceftazidime (2 g/ml) 와 azide (100 g/ml) 가함유된 MacConkey 한천에접종하였다. 37 에서 18시간배양후 transconjugant 를선별하였다.
VIM-2 형 MBL 생성 Providencia rettgeri 401 4. RAPD에의한 DNA fingerprinting Genomic DNA fingerprinting은 random amplified polymorphic DNA (RAPD) 방법을이용하였으며시발체는기존문헌을 [19] 참고하여제작하였다 (1254: 5 -CCG CAG CCA A-3 ). Genomic DNA extraction kit (Bioneer) 를이용하여 DNA를추출하였으며, PCR 반응액은 genomic DNA 10 ng, dntp 200 M, MgCl 2 2 mm, primer 100 pmol, Taq DNA polymerase (Bioneer) 0.5 U 및반응완충용액 (100 mm Tris-HCl, 400 mm KCl, 15 mm MgCl 2 ) 2.5 L에총부피가 25 L되게증류수를첨가하였다. DNA의증폭은 94 에서 1분, 35 에서 1분, 72 에서 1분으로 40회증폭한후 72 에서 5분동안연장반응을시켰다. 5. 환자의임상정보조사및환경배양소변에서분리된균이감염을일으켰는지여부를알기위해환자의진료기록지를통하여요검사, 소변내백혈구수및항균제사용여부를조사하였다. 환경배양을위해소변용기, 병실에있는화장실의손잡이, 수도꼭지, 세면대등에서면봉으로검체를채취하여증균배지에접종하였다. 증균 3일후 BAP에접종하여균의증식여부를확인하였다. AAT CTG GTA AAG CCG GAC CT-3 (bp 128 to 145) 였다 (Fig. 2). 염기서열조합은 Readsoft Visual Cloning version 3 (Readsoft Co., Toronto, Canada) 를이용하였다. 결과 1. EDTA-disk synergy test 및 MBL 유전형검사 P. rettgeri 3균주는 EDTA-disk synergy 검사에서모두양성이었으며, bla VIM-2 에대한시발체를이용한 PCR에서양성을보였다. 2. MIC 및내성전달 MBL 생성 P. rettgeri에대한 imipenem 및 meropenem에대한 MIC는각각 16 g/ml와 8 g/ml이었으며시험한모든 -lactam, aminoglycoside 및 ciprofloxacin에내성이었다 (Table 1). 3균주모두 3회의접합에의한내성전달시험에서내성은전달되지않았다. M 1 2 3 4 5 M 6. Integron 의염기서열분석 bla VIM-2 가포함되어있는 integron의염기서열분석을위해 Riccio 등 [20] 의방법에따라서 INT/5 CS 및 INT/3 CS primer를이용하여 class 1 integron을증폭하였으며, 증폭된산물을 PCR product purification kit (Bioneer) 로정제한다음 Macrogen (Seoul) 에의뢰하여염기서열분석을시행하였다. 사용된 primers 는 INT/5 CS, INT/3 CS 에대한시발체 [20] 와자체제작한 ORF- II-1, 5 -GTA AGG CGT GTT GAA ATA GC-3 (bp 1052 to 1071), ORF-II-2, 5 -TGG ATT AAG CTT CAC TC-3 (bp 8 to 24), VIM-2-1, 5 -ATT GGT CTA TTT GAC CGC GTC-3 (bp 24 to 35), VIM-2-AS1, 5 -TGC TAC TCA ACG ACT GAC CG-3 (bp 784 to 803), VIM-2-AS2, 5 - Fig. 1. RAPD patterns of VIM-2 type MBL producing Providencia rettgeri. M, molecular size marker (100 bp ladder), lanes 1-2, 4; clinical isolates of blavim-2 positive P. rettgeri; lane 3, clinical isolate of blavim-2 negative P. rettgeri; lane 5, clinical isolate of P. stuartii. Table 1. The minimal inhibitory concentration (MIC) of VIM-2 producing Providencia rettgeri isolated from urine No* Isolated day (Y/M/D) MIC ( AMP PIP CZ FOX CTX CTZ FEP AZT GM TOB AN IMP MEM CIP g/ml) 852 04-05-18 >256 >256 >256 128 >256 >256 >256 >256 128 128 128 16 8 >64 1162 04-06-22 >256 >256 >256 128 >256 >256 >256 >256 >128 >128 >128 16 8 >64 130 04-07-01 >256 >256 >256 128 >256 >256 >256 >256 64 >128 >128 16 8 >64 *Three P. rettgeri isolated from Foley catheterized urine of patients with spinal injury (852), subdural hemorrhage (1162) and cerebral infarction (130). Abbreviations: AMP, ampicillin; PIP, piperacillin; CZ, cefazolin; FOX, cefoxitin; CTX, cefotaxime; CTZ, ceftazidime; FEP, cefepime; AZT, aztreonam; GM, gentamicin; TOB, tobramycin; AN, amikacin; IMP, imipenem; MEM, meropenem; CIP, ciprofloxacin.
402 김정민 신경섭 Int I1 aaca4 blavim-2 orf ii orf iii qace 1 VIM-2-AS1 VIM-2-AS2 ORF-II-2 ORF-II-1 INT/3 CS INT/5 CS VIM-2-1 Fig. 2. Schematic map of the class 1 integron that contains the blavim-2 gene cassette from the Providencia rettgeri CBU852 clinical isolate (3,760 bp). Inserted gene cassettes and their transcriptional orientation are indicated by arrows. The atti1 recombination site is represented by a black circle and 59-base elements by white circle. Primers used for sequencing are shown up and under the integron structures (see text for primer sequences). 3. RAPD에의한 DNA fingerprinting MBL 생성 P. rettgeri 3균주는동일한 RAPD 양상을보였으며, 실험대상균주의분리시기와비슷한시기에소변에서분리된 MBL을생성하지않는 P. rettgeri 및 P. stuartii 임상균주와는 3개이상의 band에차이를보였다 (Fig. 1). 4. 환자정보및환경배양 P. rettgeri가분리된 3명의환자는모두신경외과병동의같은병실에입원하고있었으며, 모두유치도뇨카테터를삽입하고있었다. CBU 852번균주가분리된환자는소변검사상백혈구수가증가되어있어 (>25/HPF) 요로감염이의심되었으나나머지두환자는소변백혈구수가 0-1/HPF (CBU 1162) 및 3-5/HPF (CBU 130) 으로오염균으로생각되었다. 병실의환경배양에서환자의소변채집기및화장실의수도꼭지손잡이에서 P. rettgeri 가분리되었는데이들균주는 EDTA-disk synergy test에양성이었으며 VIM-2 PCR에양성이었다. 이들환자에서항균제의사용은모두기존에다른부위에감염이 ( 폐렴, 욕창 ) 있어투여하고있었던 ceftriaxone을계속투여하였다. 환경배양후소변채집기를철저히분리하여사용하고요로카테터를교체하였는데 3주후한환자 (CBU 1162) 에서 1예의 MBL 생성 P. rettgeri가분리되었으나더이상분리되지않았다. 5. blavim-2를포함하는 Class 1 integron의염기서열 P. rettgeri CBU852에서 class 1 integron의 5 CS 및 3 CS primer를이용한 PCR에서 3,760 bp의 integron이증폭되었다. 이 integron은 4개의 gene cassette를포함하고있었으며, 그 gene cassette는 aaca4, bla VIM-2, orf ii" 및 orf iii" 이었다. aaca4 및 orf iii" 에는특징적인 59-base element (be) 구조 (core site 및 inverse core site) 가존재하였으나, bla VIM-2 및 orf ii" 에는 59- be가존재하지않았다 (Fig. 2). P. rettgeri CBU852의 integron 염기서열은 accession number AY887109로 GenBank 염기서열데이터베이스에등록되었다. 고찰 MBL은 monobactam을제외한모든 -lactam 항균제를가수분해할수있다고알려져있다 [5, 6]. 이들균에존재하는 integron은흔히 aminoglycoside 내성유전자등을동시에포획할수있고 [9, 13, 21], 이들균에이미 AmpC 또는 extended spectrum- -lactamase (ESBL) 와같은 -lactamase를포함하고있는경우도있으므로 [13, 15] 이런경우적절한항균제의선택은더욱어렵다. 이연구에서 imipenem 및 aztreonam을포함한여러 -lactam 항균제와 aminoglycoside에내성인 P. rettgeri 3균주의 MBL 생성을조사한결과 VIM-2 형 MBL을가지고있었다. 처음에 Vitek GNS card (BioMerieux, Hazelwood, MO, USA) 를이용한감수성검사에서이들 3균주는 imipenem에감수성 (MIC 4 g/ml) 이었으나미량액체배지희석법에서는 imipenem을포함하여시험한모든항균제가내성이었다 (imipenem: MIC 16 g/ ml)(table 1). 환자의진료기록에서연구기간이전 (2-4개월전 ) 에도 3명의환자소변에서 P. rettgeri가각각 2-3회분리되었는데이들균주는모두 Vitek 감수성카드에서위와동일한감수성양상을보였기때문에그당시에 MBL 선별검사를시행하지않았다. 미량액체배지희석법과비교하여자동화기기를이용한 imipenem의감수성검사에서 imipenem의활성감소, 접종균농도및기기의해석오류등으로인해 imipenem에대한내성정도가높게보고되는경우가있는데 (major error)[22, 23], 이연구에서는오히려 imipenem 내성균주가감수성으로보고되어 (very major error) 처음분리되었을당시에 MBL 선별검사를하지않았다. 그리고 MBL을생성하는장내세균중 imipenem에감수성인경우도보고되고 [23] 있으므로장내세균에서 MBL의선별검사를시행할때 imipenem 내성균주만을포함할것이아니라
VIM-2 형 MBL 생성 Providencia rettgeri 403 imipenem에감수성일지라도 extended-spectrum- -lactam 항균제를포함하여다양한 -lactam 항균제에내성을보일경우도포함시킬필요가있다. 이연구에서 P. rettgeri 3 균주는같은병실에입원하고있는 3명의환자소변에서분리되었으며, 매우유사한항균제감수성양상및 RAPD 양상을보여동일클론으로생각된다 (Fig. 1). 실제로병실환경배양결과환자의소변용기를통하여균이전파되었을것으로추정된다. 3명의환자중첫번째환자의소변에서만백혈구가증가되어있어요로감염이의심되었으며, 나머지두환자에서는균의집락화또는오염균으로간주되었다. 분리된균은시험한모든항균제에내성이었으므로요로감염이의심되는환자에서적절한항균제의선택은불가능하였으며기존에폐렴이있어치료중이었던 ceftriaxone을계속사용하였다. 그러나요로카테터의교체후균은분리되지않았으며, 뇨백혈구수도정상화되었다. 따라서이환자의경우도균집락화가능성이높다고사료된다. 또한환경배양후소변용기를철저히분리하여사용토록한후 3명의환자중한환자에서 1회만이균이분리되었고나머지예에서는더이상균이분리되지않았다. 일본에서 IMP-1형 P. rettgeri가처음분리되었으나 [24] VIM- 2형은전세계적으로아직보고되지않았다. bla IMP 는이전의보고에서접합성 (conjugative) plasmid에서발견되었으나 [25] bla VIM-2 는 self-transferable elements에서발견되지않았다 [8, 9, 13]. 이번연구에서도내성전달이이루어지지않았으므로 bla VIM-2 유전자가염색체에위치할가능성이크다고할수있으나이를확인하기위해서는추가적인실험이필요하며 bla VIM-2 유전자가비접합성 plasmid에있을가능성도배제할수는없다. P. rettgeri CBU852를대상으로한 class 1 integron의염기서열분석결과 bla VIM-2 를포함하는약 3.7 kb의 integron이존재하였는데, aaca4, bla VIM-2, orf ii" 그리고 orf iii" 유전자 cassette 를포함하고있어기존에보고된적이없는새로운구조를나타내었다 (Fig. 2). 이들 4개의 open reading frame (ORF) 중 aaca4 및 orf iii" 는 gene cassette의전형적인형태, 즉내성유전자뒤에 59-be가존재하였으며 59-be는 core site (GTTRRRY) 와 inverse core site (RYYYAAC) 를갖고있었다. 59-be는재결합의인지부위로작용하기도하며 stem-loop를형성하여뒤에존재하는유전자의발현이조기종결되어발현양이감소될수있다고알려져있는데 [26, 27], P. rettgeri CBU852에서도 aaca4 gene cassette에있는 59-be의작용에의해 aaca4 gene cassette 의뒤에존재하는 bla VIM-2 의발현양을감소시켰을것으로추정된다 (imipenem MIC, 16 g/ml). 특이한것은기능이알려져있지않은두개의 ORF (orf ii" 및 orf iii") 가존재하였는데, 이들은기존에국내에서보고된 VIM-2 생성균주에서자주발견되었다. 이두개의 ORF은국내에서분리된 Acinetobacter genomospecies 3 (inti1-bla VIM-2 -aaca4-aada1-orf ii"-orf iii"-qac- E1; GenBank accession number AF369871)[21], S. marcescens (unpublished, inti1-aac3i-aaca7-bla VIM-2 -aada1-orf"ii"- orf"iii"-qace 1: GenBank AY884051) 그리고 P. putida (unpublished, inti1-aaca4- bla VIM-2 -orf i"-orf ii"-orf iii"-qace 1; GenBank AY065966) 에서보고된 orf ii" 및 orf iii" 와 100% 일치하였으며, S. marcescens (inti1-bla VIM-2 -qacf'-orf ii"-orf iii"-qace 1; GenBank AY030343)[12], P. aeruginosa (inti1- aaca4-bla VIM-2 -orf i"-orf ii"-orf iii"-qace 1; GenBank AY- 029772)[9] 와는각각 99.7% 및 99.8% 의일치를보였다. 특히 P. putida AY065966의 integron 전체구조와매우유사하여이들 ORF의수평전달가능성을시사하고있다 [13]. 결론적으로현재 VIM-2 형 MBL이 P. rettgeri에까지확산되고있으며이는적절한항균제의선택을더욱어렵게할수있다. MBL 생성균주는다양한내성유전자를동시에포함할수있고 integron에의해쉽게전파될수도있으므로 MBL 생성균의확산을방지하기위해검사실에서는이들균을적극적으로검출하는것이중요하다. 마지막으로장내세균에서 MBL의선별을위해 imipenem에대한감수성결과만을이용하는것보다항균제감수성양상을확인하여여러 -lactam제에내성인장내세균일경우에 MBL에대한선별검사도시행할필요가있다. 요약배경 : Metallo- -lactamase (MBL) 은국내에서 Pseudomonas spp. 및 Acinetobacter spp. 에서검출빈도가매우높아지고있으며, Serratia marcescens, Enterobacter cloacae 및 Klebsiella pneumoniae 등의장내세균에서도 VIM-2형 MBL이분리된바있다. 최근에저자들은신경외과병실에있는 3명의환자소변에서분리된 3주의 MBL 생성 Providencia rettgeri의표현형과유전형을분석하고한환자에서분리된 Providencia rettgeri CBU852 균주의 bla VIM-2 를포함하는 integron을분석하였다. 방법 : EDTA-disk synergy test로 MBL을선별하였으며, IMP-1, VIM-1, VIM-2 유전자에대한 PCR을시행하였다. 최소억제농도는미량액체배지희석법을이용하였고, random amplified polymorphic DNA를이용하여 DNA fingerprint를시행하였다. bla VIM-2 를포함하는 integron의염기서열을분석하였다. 결과 : Imipenem 내성 P. rettgeri 3주모두 EDTA-disk synergy test에서양성이었고 PCR 결과 VIM-2형 MBL이검출되었다. 항균제감수성검사에서시험한모든 -lactam제에내성일뿐만아니라 gentamicin, tobramycin, amikacin 및 ciprofloxacin 에도내성을나타내었다. P. rettgeri CBU852는 aaca4, bla VIM-2, orf ii", orf iii" 를포함하는새로운구조의 class 1 integron을갖고있었다. 이들균주의 RAPD 양상은동일하였다. 결론 : 이연구에서다제내성인 P. rettgeri CBU852는 bla VIM-2 를포함하는새로운 class 1 integron을갖고있었다. P. rettgeri 에까지bla VIM-2 의확산은이들균에의한감염의치료에서 carbapenem을무력화할수있으며, 이보고는 VIM-2형 MBL을
404 김정민 신경섭 생성하는 P. rettgeri의첫예이다. 참고문헌 1. Abbott SL. Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Serratia, Plesiomonas, and other Enterobacteriaceae. In: Murray PR, Baron EJ, et al. eds. Manual of clinical microbiology. 8th ed. Washington, D.C.: ASM press, 2003: 684-700. 2. Cornaglia G, Frugoni S, Mazzariol A, Piacentini E, Berlusconi A, Fontana R. Activities of oral antibiotics on Providencia strains isolated from institutionalized elderly patients with urinary tract infections. Antimicrob Agents Chemother 1995; 39: 2819-21. 3. The Enterobacteriaceae. In: Koneman EW, Allen DS, et al. eds. Color atlas and textbook of diagnostic microbiology. 5th ed. New York, Lippincott. 1997: 171-252. 4. Stock I and Wiedemann B. Natural antibiotic susceptibility of Providencia stuartii, P. rettgeri, P. alcalifaciens and P. rustigianii strains. J Med Microbiol 1998; 47: 629-42. 5. Nordmann P and Poirel L. Emerging carbapenemases in Gram-negative aerobes. Clin Microbiol Infect 2002; 8: 321-31. 6. 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